本期目录

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• 2023年, 第47卷, 第9期
  刊出日期：2023-09-25

    

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  应激医学的发展现状与趋势

  蒋春雷

  2023, 47(9): 641-645. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.001

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  应激医学的产生是基于人类承受越来越强烈的生理和心理应激以及由此诱发或加剧的应激性疾病。应激医学是研究人体对特殊环境、职业因素和需求等应激源的反应及其相关医学问题的一门综合性交叉学科。随着应激研究的重点逐渐从躯体应激转到心理应激,以及应激与疾病之间愈来愈密切的联系,应激医学研究逐渐强化心理应激,突出特殊应激,提高作业能力,彰显医学要素。通过研究引发心理行为症状的生物学机制,从而开发新的诊断标准和基于遗传、生理和认知数据而非仅局限于症状的治疗手段,是应激性疾病的防治趋势。
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  论著

  武警某部新兵与特勤人员膳食营养与健康状况调查

  张予弦, 谢金丽, 毕珣, 王锋, 姚站馨

  2023, 47(9): 646-649. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.002

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  目的 调查某地武警某部新兵及特勤人员的膳食营养与健康状况,为制定适用于此类人群的营养方案提供依据。方法 采用称重法进行为期3 d的膳食调查,新兵和特勤人员调查人数分别为251例和226例,均为男性;利用人体体成分分析仪测定新兵大队全队1264名新兵体质指数（BMI）和体脂率。结果 新兵大队仅畜肉、禽肉、禽蛋、牛奶和水果5类食物摄入达到现行军标要求,其余均不达标,三大产能营养素供能比基本均衡;钙、锌、维生素A、维生素B₁和维生素B₂未达到现行军标要求;超重者占20.96%,消瘦者占1.90%。特勤大队仅畜肉、禽蛋、牛奶和水果4类食物摄入达到现行军标要求,其余均不达标,三大产能营养素供能比失衡;维生素A和维生素B₁摄入未达到现行军标要求。结论 新兵大队和特勤大队膳食结构均不合理,部分食物及营养素摄入未达到现行军标要求,特勤大队三大营养素供能比失衡;新兵体重超重与消瘦并存。
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  论著

  γ射线照射对小肠类器官生长及小肠干细胞生物学特性的影响研究

  李小宇, 王勇懿, 段敏, 叶雨萌, 李杨, 左红艳

  2023, 47(9): 650-656. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.003

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  目的 探讨γ射线照射对小肠类器官生长及Lgr5⁺隐窝基底柱状细胞、Hopx⁺储备干细胞和Clu⁺修复性干细胞生物学特性的影响。方法 体外分离C57BL/6小鼠小肠隐窝,并行小肠类器官培养。将传代后第1天小肠类器官随机分为假照射（C）组、5和10 Gy γ射线照射组,分别在照射后1和6 h收集类器官,制作冰冻切片,用γH2AX免疫荧光染色和原位末端标记法检测类器官DNA损伤和凋亡。分别在照射后第1、3、5天观察类器官生长状态,通过形态学分析类器官的出芽率和表面积;用CellTiter 3D细胞化学发光法检测类器官细胞活力;免疫荧光染色观察类器官ki67、Apoa4和Clu表达;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测APOA4、CLU、LGR5和HOPX的mRNA表达。结果 与C组比较,照射后第1、3、5天,5 Gy组和10 Gy组类器官出芽率显著减少（均P<0.001）,细胞活力显著降低（均P<0.05）,照射后第3、5天,5 Gy组和10 Gy组类器官表面积显著减小（均P<0.05）,上述指标两组间差异无统计学意义。照射后1 h,5 Gy组和10 Gy组γH2AX阳性细胞显著增多（均P<0.001）,照射后6 h,5 Gy组和10 Gy组凋亡细胞显著增多（均P<0.001）,且10 Gy组显著多于5 Gy组（P<0.001）;照射后第1、3、5天,5 Gy组和10 Gy组ki67⁺细胞减少,Apoa4⁺细胞、Clu⁺干细胞增多;且APOA4和HOPX mRNA显著增高（均P<0.05）,LGR5 mRNA显著降低（均P<0.05）,CLU mRNA主要在照射后第1天显著增高（P<0.001）,上述变化10 Gy组较5 Gy组更为显著（均P<0.05）。结论 γ射线照射显著抑制小鼠小肠类器官生长,导致DNA损伤和细胞凋亡;Lgr5⁺隐窝基底柱状细胞对电离辐射敏感,Clu⁺修复性干细胞和Hopx⁺储备干细胞对电离辐射较为耐受。
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  论著

  1,2-丙二醇对放射性口腔黏膜炎的防护作用研究

  蒋瑛, 闫福林, 王训, 邢爽, 屠彦红, 宋若会, 申星, 余祖胤

  2023, 47(9): 657-661. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.004

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  目的 研究1,2-丙二醇对放射性口腔黏膜炎的防护作用。方法 采用17 Gy X射线单次照射小鼠头颈部制备模型,观察1,2-丙二醇6 g/kg腹腔注射预防给药（照前3 h）对小鼠放射性口腔黏膜炎的影响。将SPF级C57BL/6J小鼠随机分为对照组和给药组,每组8只,观察照后30 d小鼠体重和存活情况。病理取材观察实验分为正常组、照射对照组和给药组,每组4只,于照后7 d处死,取口腔黏膜进行甲苯胺蓝染色、HE染色、Ki67和P63免疫组化标记。结果 17 Gy X射线照射后,对照组小鼠在11 d内全部死亡,1,2-丙二醇预防给药可显著提高小鼠存活率, 30 d存活率达到37.5%。形态学观察结果,正常组小鼠舌面未见溃疡,照射对照组小鼠照后7 d舌面溃疡成片,溃疡面积为（0.06±0.01） cm²,而1,2-丙二醇给药组舌面溃疡较少,溃疡面积为（0.01±0.01）cm²。组织病理显示,照射对照组小鼠照后7 d舌黏膜上皮结构严重破坏,上皮厚度明显变薄,而1,2-丙二醇给药组舌黏膜上皮结构保持完整,上皮厚度较照射对照组明显增加。Ki-67及P63免疫组化结果显示,照射对照组小鼠照后7 d舌黏膜角化上皮增殖细胞和角化上皮干细胞数量极少,1,2-丙二醇给药组小鼠舌黏膜角化上皮增殖细胞和角化上皮干细胞呈现明显增殖再生。结论 1,2-丙二醇对放射性口腔黏膜炎小鼠具有防护作用。
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  论著

  乙型肝炎病毒稳定转染后宿主细胞高级染色质结构改变分析

  江修宇, 郝晓娟, 周喆, 王学军, 杨骞

  2023, 47(9): 662-667. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.005

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  目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）对肝细胞三维基因组学空间组织结构的影响。方法 使用桥接高通量染色质构象捕获（BL-Hi-C）技术,获取HBV稳定转染细胞HepG2.CW与对照细胞HepG2的基因组三维空间互作信息,并联合转录组测序分析差异表达基因。通过CCK-8实验及Kaplan-Meier生存分析方法分别检测细胞増殖活力,分析差异表达基因功能。结果 BL-Hi-C实验获取了2株细胞的基因组三维互作信息,在50 kb分辨率下,HBV稳定转染细胞HepG2.CW与HepG2相比,16号染色体与22号染色体发生了染色体易位以及易位点染色体拓扑相关结构域（TAD）的融合变异。结合转录组数据发现,染色体易位点及TAD变异关联区域的22号染色体开放阅读框34（C22ORF34）与肌醇加氧酶（MIOX）出现明显变化。细胞生长曲线表明,HepG2.CW具有更高的细胞増殖活力。生存分析发现C22ORF34及MIOX基因与患者的生存预期密切相关。结论 HBV稳定转染可引起HepG2细胞发生染色体易位及三维基因组结构改变,并导致相关区域内C22ORF34和MIOX基因的表达改变。
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  论著

  利用CRISPR/Cas9系统建立长链非编码RNA SNHG1基因敲除细胞系并研究其功能

  王田田, 台福敏, 葛常辉, 郑晓飞, 付汉江

  2023, 47(9): 668-673. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.006

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  目的 利用CRISPR/Cas9介导的同源定向修复机制构建长链非编码RNA（lncRNA）核仁小分子RNA宿主基因1（SNHG1）稳定敲除的A549细胞系,并进行功能研究。方法 设计靶向SNHG1基因的小向导RNA（sgRNA）,将其克隆到LentiCRISPR v2质粒中,构建Cas9-sgSNHG1质粒。以A549细胞基因组DNA为模板,PCR扩增5′同源臂（5′Arm）和3′同源臂（3′Arm）序列,以pEGFP-Blast质粒为模板,PCR扩增pEGFP-Blast-polyA序列;利用重叠PCR将3个序列连接为5′Arm-pEGFP-Blast-polyA-3′Arm,通过Gibson克隆将其连接到pUC18质粒上,构建SNHG1同源重组模板质粒。将构建成功的两个重组质粒共转染A549细胞,用杀稻瘟菌素（Blast）筛选稳定插入pEGFP-Blast-polyA的细胞株,挑取单克隆。实时荧光定量PCR（qPCR）检测敲除效率,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖活力及克隆形成能力。结果 成功构建Cas9-sgSNHG1及SNHG1同源重组模板质粒,筛选获得敲除效率较高的A549细胞系,发现敲除SNHG1可抑制A549细胞增殖活力及克隆形成能力。结论 SNHG1稳定敲除的A549细胞系构建成功,SNHG1的癌基因功能受到显著抑制。CRISPR/Cas9介导的同源定向修复可有效抑制长链非编码RNA的表达,是长链非编码RNA功能研究的重要工具。
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  论著

  低氧对共培养体系中内皮细胞eNOS活性及平滑肌细胞增殖与迁移能力的影响

  曹炎, 何云凌, 李建, 陈迎, 王宇菲, 吴丽颖

  2023, 47(9): 674-679. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.007

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  目的 探讨在内皮细胞和平滑肌细胞共培养模型中,低氧对内皮细胞中eNOS活性,以及平滑肌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 利用人肺动脉内皮细胞（HPAEC）与人肺动脉平滑肌细胞（HPASMC）构建共培养模型,经过低氧（3%O₂）或常氧（20%O₂）处理后,通过CCK-8实验、Ki-67和EdU染色、Western印迹及Transwell小室迁移实验分别检测低氧对HPASMC增殖和迁移的影响;通过试剂盒和Western印迹分别检测低氧对NO释放量和eNOS活性的影响;进一步利用硝普钠（SNP）分解生成NO的特性验证HPAEC释放的NO在调节HPASMC增殖和迁移中的作用。结果 低氧能显著促进共培养模型中HPASMC的增殖与迁移能力,并抑制HPAEC中eNOS的活性和NO生成;然而,在HPAEC培养基中添加SNP则能明显逆转由低氧导致的HPASMC增殖与迁移。结论 低氧通过抑制共培养体系下HPAEC中eNOS的活性进而减少NO的生成和分泌,NO释放量的减少最终促进了HPASMC的增殖与迁移。
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  论著

  脱氧胆酸促进小鼠肠道Th17浸润参与肠道炎症

  李丹, 田春艳, 吴瑾

  2023, 47(9): 680-685. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.008

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  目的 探讨高脱氧胆酸（DCA）对小鼠Th17浸润的影响及对肠道炎症的诱导作用。方法 野生型C57BL/6小鼠14只,随机分为普通饮食组和添加0.2%DCA饮食组,每组7只;6周后分别对2组小鼠结肠组织切片进行苏木精-伊红 （HE） 染色和病理评分,利用流式细胞术分析肠系膜淋巴结Th17比例,免疫荧光染色检测结肠组织Th17浸润改变,实时荧光定量PCR（qPCR）测定小鼠肠道白细胞介素17（IL-17）,包括IL-17A、IL-17F等mRNA的表达水平。结果 给予小鼠添加0.2%DCA膳食6周后,与普通饮食组相比,其肠道炎症反应增加（P<0.01）,并且肠系膜淋巴结Th17比例较普通饮食组升高（P<0.05）;添加DCA饮食组小鼠结肠组织浸润的Th17显著增加（P<0.001）,肠道促炎性细胞因子IL-17A、IL-17F等表达上调（P<0.05）。结论 高水平DCA可促进肠道Th17浸润并参与诱发肠道炎症。
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  论著

  白血病和淋巴瘤患者体内人内源性逆转录病毒K的转录特征研究

  李天夫, 李韩平, 王晓林, 钱坤, 窦丽萍, 李敬云, 李林

  2023, 47(9): 686-691. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.009

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  目的 检测并分析白血病和淋巴瘤患者外周血单个核细胞（PBMC）中人内源性逆转录病毒K（HERV-K）转录水平,并确定HERV-K的整合位点。与健康对照人群比较,筛选出在白血病和淋巴瘤患者中转录水平显著改变的HERV-K整合位点。方法 以白血病和淋巴瘤患者为实验组、健康人为对照组,采用实时荧光PCR检测PBMC样本中HERV-K转录水平,通过PCR扩增及二代测序确定HERV-K整合位点,分析实验组与对照组HERV-K整合位点的表达差异。结果 白血病和淋巴瘤患者PBMC中HERV-K gag、pol、env的转录水平均显著高于健康对照（P<0.0001）。在白血病、淋巴瘤患者和健康对照人群的基因组中,有转录活性的HERV-K整合位点分别为86、81和77个。与对照组相比,白血病和淋巴瘤患者分别有20、12个位点的转录升高,3、8个位点的转录降低,不同位点生物学功能存在显著差异。结论 白血病和淋巴瘤患者PBMC中的HERV-K转录水平显著高于健康人,明确了表达水平发生改变的HERV-K的整合位点,有助于进一步探索HERV-K在白血病和淋巴瘤发生发展中的作用,并为以HERV-K为靶点的治疗策略提供基础。
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  论著

  一种基于A549细胞与内皮细胞共培养的新型气液培养模型的建立

  张雪妹, 杨慧, 曾泉, 习佳飞, 岳文, 阎新龙, 周军年

  2023, 47(9): 692-699. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.010

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  目的 通过气-液界面（ALI）培养技术将人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549与内皮细胞共培养,探究内皮细胞存在条件下A549细胞表型和功能的变化。方法 基于transwell培养体系建立气液共培养模型,A549细胞接种于transwell膜上表面,内皮细胞接种于transwell膜下表面,实时定量PCR（RT-qPCR）检测A549细胞经过传统ALI培养和ALI与内皮细胞共培养后的肺表面活性蛋白、细胞间连接以及与新冠病毒入侵细胞相关分子的表达,流式细胞术检测新冠病毒S蛋白截短体重组慢病毒的细胞感染率。结果 通过比较分析,发现EA.hy926内皮细胞系较原代内皮细胞HUVEC更加适合建立新型ALI共培养模型。A549细胞经过传统ALI培养后肺表面活性蛋白SP-B、SP-D的表达上调,促进上皮钙黏蛋白E、紧密连接蛋白表达,新冠病毒受体神经紧张素1、去唾液酸糖蛋白受体1、含kringle跨膜蛋白1显著上调;而在ALI与内皮细胞共培养体系中,上述基因的上调更加显著（P<0.05）,模型病毒粒子感染率较传统ALI培养的A549细胞显著上升（P<0.05）。结论 成功构建A549细胞和EA.hy926内皮细胞共培养模型,为相关肺部疾病病理研究和药物筛选提供了新的研究模型。
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  论著

  BMJ Military Health期刊知识图谱分析及其借鉴

  尤伟杰, 郭青, 武建虎, 刘冬妍, 于超奇, 张向阳

  2023, 47(9): 700-705. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.011

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  目的 构建英国BMJ Military Health期刊的知识图谱,分析和挖掘2011年以来该期刊发表论文情况,为我军医学期刊及研究机构了解该刊发展现状及开展相关工作提供有价值的参考借鉴。方法 检索2011—2022年Web of Science核心合集数据库中收录的BMJ Military Health期刊论文,共得到1475条文献记录。采用Hiscite、VOSviewer、CiteSpace等分析工具构建知识图谱。结果 BMJ Military Health期刊被引频次呈现逐年快速增长趋势,表明英军军事医学已经受到国际越来越多的关注。该刊以军事医学为基本定位,聚焦军队人员重大慢病防控、创伤损伤救治及运动医学研究,其军事医学研究注重团队优势,军地融合程度较高,基础研究与临床实践的衔接性较高。此外,该期刊鼓励在国家层面、机构层面、作者层面合作发表论文。结论 构建BMJ Military Health期刊知识图谱,可以高效、全面、系统地了解该期刊的现状及发展态势。
综述
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  综述

  不同来源外泌体在创面修复中的研究进展

  孟天娇, 杜丽, 赵希荣

  2023, 47(9): 706-709. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.012

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  创面修复始终是皮肤再生的挑战。外泌体是一种纳米级的细胞外囊泡,由多种细胞分泌,保留了完整的细胞特性。目前研究发现,不同细胞分泌的外泌体具有不同的生物成分和功能特征,在多种病理生理过程中发挥着重要作用。外泌体可通过抑制炎症、促进细胞增殖迁移、促进血管生成、抑制瘢痕形成等,在创面修复过程中发挥其促进修复的作用。该文综述了不同来源外泌体在创面修复中的研究进展。
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  综述

  MHC-Ⅱ在病毒性感染中的作用研究进展

  周洁, 吕忠霖, 魏寅祥, 韩根成

  2023, 47(9): 710-713. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.013

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  病毒感染性疾病严重危害人们的生命健康,而近年暴发的新冠病毒感染给人们的身心健康和生产生活带来了严重影响。主要组织相容性复合物Ⅱ分子（MHC-Ⅱ）主要表达于B细胞、单核-巨噬细胞和树突状细胞等专职抗原递呈细胞上,参与调控体液免疫和细胞免疫应答。越来越多研究表明,MHC-Ⅱ在抗病毒感染及病毒免疫逃逸中发挥重要的生理及病理作用,但其机制仍不清楚,该文就MHC-Ⅱ在病毒性感染中的作用及研究进展进行了综述。
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  综述

  间充质干细胞治疗肺损伤研究进展

  毛壮, 王华

  2023, 47(9): 714-720. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2023.09.014

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  呼吸系统疾病发病率和病死率的不断上升,使其成为一个全球性公共卫生问题。随着再生医学的发展,细胞疗法成为治疗肺部疾病的新策略。间充质干细胞是一种多能成体干细胞,具有强大的自我更新和分化能力,因其生物学特性、低免疫原性和来源丰富等特点,成为治疗急慢性肺部疾病的理想种子细胞。该文对间充质干细胞治疗新型冠状病毒肺炎、急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺疾病、哮喘等急慢性肺损伤的可能机制及研究现状进行了综述。