本期目录

• 2021年, 第45卷, 第3期
  刊出日期：2021-03-25

    

  ---

  综述
  articles
  实验研究
  articles
  

• 全选
  |

综述
• Select
  综述

  细胞自噬与肿瘤发生发展

  蒋琦炜

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  自噬是真核生物中一种高度保守的胞内降解途径。其主要通过溶酶体或液泡进行饥饿状态下的营养动员，清除受损蛋白质、细胞器和胞内病原体。自噬主要包括巨自噬、分子伴侣介导的自噬和微自噬。自噬已被证实与多种人类疾病相关，其中在肿瘤发生发展中具有重要意义。近年研究中，对于自噬和肿瘤关系有了进一步的认识，本文就自噬分子机制、调控通路以及与肿瘤发生发展关系的研究进展作一综述。
articles
• Select
  articles

  透明质酸介导运动受体HMMR真核表达载体的构建及其对乳腺癌增殖和迁移的影响

  石石烟祝

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  构建HMMR基因真核表达重组质粒并在乳腺癌ZR75-1细胞中转染和鉴定，探究HMMR基因对乳腺癌细胞生长、增殖和迁移的影响。 方法 采用PCR技术以人乳腺文库为模板扩增HMMR基因并与pcDNA3.0载体在EcoRV和XhoI酶切位点进行连接，构建pcDNA3.0-FLAG-HMMR真核表达载体，并转染乳腺癌ZR75-1细胞；通过Western blot法、CCK8实验和克隆形成检测HMMR基因表达对ZR75-1生长的影响，划痕实验验证pcDNA3.0-FLAG-HMMR对ZR75-1细胞迁移的影响。结果 经酶切后凝胶电泳鉴定及质粒序列测序验证真核重组表达质粒pcDNA3.0-FLAG-HMMR构建成功，并在ZR75-1细胞中表达；并且发现HMMR对ZR75-1细胞的增殖和迁移具有显著的促进作用。结论 构建的pcDNA3.0-FLAG-HMMR重组质粒转染至ZR75-1细胞后，明显促进ZR75-1增殖和迁移，这为研究HMMR基因在乳腺癌发生发展的机制奠定了基础。
• Select
  articles

  盐酸罗哌卡因纳米结构脂质载体的制备和质量评价

  庞良芳

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  [摘要] 目的 本文旨在制备包载盐酸罗哌卡因的纳米结构脂质载体（ropivacaine-loaded nanostructured lipid carriers, RP-NLC）并对其进行质量评价。方法 采用熔融-超声法制备了RP-NLC，通过正交试验优化RP-NLC处方，并对优化后的处方进行质量评价。结果 按照优化处方的RP-NLC外观呈类球形，粒径(117.36±12.27)nm，多聚分散度(polydispersity index polydispersity index, PDI)为0.275±0.032，粒径分布均一，包封率为(66.28±1.29)%，体外释药具有缓释特征，在4°C条件下放置3个月，粒径、PDI和包封率无明显变化。结论 所制备的RP-NLC具有较好的理化性质和缓释作用。
• Select
  articles

  载桂皮醛同轴静电纺丝纳米纤维膜的构建及性能评价

  袁橙

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  [摘要] 目的 用同轴静电纺丝技术构建桂皮醛纳米纤维膜，具有药物缓释功能。方法 用DMF和DCM混合溶剂溶解聚己内酯和致孔剂聚乙二醇4000为壳层纺丝液，用无水乙醇溶解聚乙烯吡咯烷酮-K90和桂皮醛为芯层纺丝液；在电压为15 kV，接收距离为14cm，芯层纺丝液流速为0.1 mm/min，不同壳层纺丝液流速(0.3 mm/min,0.6 mm/min,0.9 mm/min)条件下，用同轴静电纺丝工艺制备致孔剂含量及壳层厚度不同的壳-芯结构纳米纤维；用场发射扫描电镜、透射电镜表征，考察壳层厚度、致孔剂含量及投药量对桂皮醛包封率、载药量、稳定性及体外释放行为的影响，并对其体外释放行为进行数学模型拟合。结果 载桂皮醛同轴纳米纤维表面光滑，纤维间无粘连，无串珠结构，直径为324～683nm；呈现壳-芯结构，壳层随壳层纺丝液流速增大而增厚。壳层最厚的纤维中桂皮醛包封率最大(95.2%)，芯层桂皮醛在壳层的保护下挥发受到抑制，其稳定性最大值为82.5，远大于原料药(2.6)；载桂皮醛的纳米纤维膜在pH=6.8PEG400-PBS缓冲液中24 h累积释放量为57.9～89.1%，显示出良好的药物缓释效果，其释放速率与壳层厚度及载药量负相关，与致孔剂含量正相关。壳层不含致孔剂的载药纤维膜中TCA的释放符合扩散机制，而壳层含有致孔剂的纤维膜中TCA的释放遵循扩散与溶蚀相结合的双重机制。结论 芯层含有易挥发药物TCA的同轴纳米纤维膜不但增强了药物的包封率、载药量及稳定性而且可实现药物缓释；据此可按照释放要求构建TCA同轴纳米纤维膜缓释给药体系。
• Select
  articles

  牛血红蛋白应用于小鼠创面修复的初步研究

  马宁,李柄廷,舒珮琳,王瑛,尤国兴,王权,赵莲,周虹

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  目的 探究牛血红蛋白对小鼠创面修复的影响及其机制。 方法 建立糖尿病小鼠和昆明小鼠全层皮肤切割伤模型。将造模成功的小鼠按照治疗用药种类，随机分为2组，即生理盐水组（NS组）与血红蛋白组（Hb组）。给药后观察并计算各组小鼠愈合面积，计算创面愈合率，利用苏木精-伊红染色后光镜下观察分析组织的病理学变化；利用免疫组化法分析组织中白介素1（IL-1）、白介素10（IL-10）、血小板-内皮细胞粘附分子（CD31）、骨髓祖细抗原（CD34）蛋白表达水平。 结果 建模7天后， 糖尿病小鼠Hb组创面愈合率达到23%，显著高于NS组（P<0.01）；建模14天后，Hb组愈合率达到93%，显著高于NS组（P<0.05）。昆明小鼠建模并给药3，7，10天后，Hb组愈合率分别达到32%，73%，83%，显著高于NS组（P<0.01）。Hb建模7天后，糖尿病小鼠Hb组肉芽创面组织中CD31和CD34表达增强， Hb组肉芽创面组织中IL-10表达增加，显著高于NS组（P<0.01）。 结论 牛血红蛋白溶液促进糖尿病小鼠和昆明小鼠创面愈合，可能与增加血管新生、促进抑炎因子表达有关。
• Select
  articles

  肠道菌群调节神经递质影响抑郁症的研究进展

  HUANGmengli

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  近年来，肠道菌群对精神疾病的显著影响是医学和神经生物学研究的热点方向，肠道菌群-肠-脑轴的异常被证实在抑郁症发病与病理生理机制中起到重要作用，但精细机理仍需深入研究。本文从肠道菌群及其代谢产物对抑郁症相关神经递质（去甲肾上腺素、谷氨酸、5-羟色胺、多巴胺、γ-氨基丁酸等）的影响入手，综述文献探讨肠道菌群与抑郁症之间的相关性，梳理肠道菌群对抑郁症发病机制的影响与调节神经递质这一途径相关的科学线索。
• Select
  articles

  聚乙二醇修饰的多肽-阿霉素偶联物的合成及其性能

  刘祺,李松涛,赵桂琴

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  目的 合成聚乙二醇（PEG）修饰的多肽-阿霉素（DOX）偶联物，并评价其性能。方法 以异官能团双取代的PEG衍生物为交联剂，将转铁蛋白受体（TfR）特异性结合多肽类似物与DOX偶联，合成一种PEG修饰的多肽-阿霉素偶联物，MALDI-TOF MS予以表征。通过考察该偶联物的体外血清稳定性、体外HepG2肝癌细胞增殖抑制活性及其在不同浓度还原性谷胱甘肽（GSH）溶液中的降解特性等实验评价其性能。结果 PEG修饰的多肽-阿霉素偶联物的体外血清半衰期为1.92±0.13小时，其在5 mM GSH溶液中的降解效率高于5 μM GSH溶液。该偶联物对HepG2细胞的IC50值为68.47±4.99 μM。结论 合成的PEG修饰的多肽-阿霉素偶联物具有还原响应性降解特性，其对HepG2细胞具有一定的体外增殖抑制活性。
实验研究
• Select
  实验研究

  酵母菌中麦角固醇的提取和纯化工艺研究

  YuanLi,MengLi,Shuang-shuangLi,Yu-kuiYu,PengYu,Ming-yuanLi

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  目的 研究酵母菌中麦角固醇的提取以及纯化方法，探索提取高纯度麦角固醇的工艺 路线。方法 首先将 1.00 g 酵母粉浸入 20-30 ml 乙醇中进行超声破壁，再取沉淀进行皂化反 应：醇碱体积比为 1:2、物料皂化剂（m:V）比为 1:10、30% NaOH、70%乙醇、2.5 hrs 的皂 化时间、85 oC 的皂化温度。待反应液冷却，加入乙酸乙酯进行萃取操作，取乙酸乙酯相并 浓缩，经柱层析得到粗品，最后经重结晶纯化得到麦角固醇产品。结果 麦角固醇的提取率 为 1.63%且纯度高于 98%。结论 采用该方法提取和纯化麦角固醇，条件温和，纯度和提取 效率均提高，且易于工厂实现工艺放大，批量生产。
• Select
  实验研究

  安罗替尼对ACHN细胞增殖和迁移作用的研究

  张才

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  研究安罗替尼（anlotinib）对人肾癌ACHN细胞株增殖和迁移的影响，探析安罗替尼对ACHN细胞生长、迁移的作用机制以及在肾癌治疗领域的临床应用前景。 方法 体外培养肾癌ACHN细胞，采用不同浓度（0μmol/L、1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L）的安罗替尼处理ACHN细胞24h、48h和72h，用MTT检测安罗替尼对ACHN细胞增殖的影响，计算半数抑制浓度（IC50）；用划痕修复实验分析安罗替尼对细胞迁移的作用，计算迁移率；用克隆形成实验来观察细胞贴壁后细胞的成活能力，统计克隆集落的数目；用Western Blot实验研究安罗替尼对信号通路相关蛋白活性的影响，计算其灰度值。结果 安罗替尼显著抑制ACHN细胞的增殖，呈时间和浓度依赖性；和对照组相比，安罗替尼明显抑制ACHN细胞的克隆形成（P<0.05）、细胞的迁移 (P<0.05)和信号通路相关蛋白的活性（P<0.05）。结论 安罗替尼显著抑制人肾癌ACHN细胞的增殖、克隆形成和细胞迁移，其机制与信号通路蛋白活性的抑制相关。
• Select
  实验研究

  5-HT2A受体在腹外侧眶额皮质参与口面部疼痛的研究

  yuanshanshan

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  目的：探究腹外侧眶额皮质5-HT2A受体对福尔马林诱导的口面部炎性痛的影响，为临床治疗提供理论支持。方法：首先将6-8周的C57BL雄性小鼠随机分组，WT组为野生型，NC组为空载体组，KD组为5-HT2A受体敲减组。于腹外侧眶额皮质注射腺病毒建立小鼠5-HT2A受体敲减模型；4周采用Weston blot检测受体敲减效果；然后用微量注射器将30μL1%福尔马林溶液（或生理盐水）注射到小鼠触须垫，记录45分钟内小鼠前、 后爪摩擦触须垫时间。结果：Weston blot结果表明，KD组5-HT2A受体表达水平明显低于WT组、NC组（p<0.01，n=3），表明5- HT2A受体敲减成功。行为学结果表明在早期时相，KD、WT、NC组小鼠摩擦触须垫的总时间无统计学差异，且均高于生理盐水组；在晚期时相，KD组小鼠摩擦触须垫的总时间明显大于NC、WT组(p<0.01)，而WT组和NC组之间无统计学差异。结论：腹外侧眶额皮质5-HT2A受体可能在小鼠福尔马林炎性痛模型中通过影响晚期时相摩擦行为参与口面部疼痛调节。
• Select
  实验研究

  Epsin2蛋白质昆虫细胞纯化及液-液相分离功能探索

  zhaobing

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  [摘 要] 目的 利用昆虫杆状病毒表达系统得到Epsin2蛋白质并进行纯化后，探索Epsin2蛋白质能否在体外发生液-液相分离。方法 构建pmCherryC1-Epsin2载体，在HeLa细胞内过表达后观察在细胞内的状态。构建pFastBac HT-B-mCherry-Epsin2蛋白质纯化载体，转染昆虫细胞Sf9，获得His-mCherry-Epsin2融合蛋白质。进一步探索Epsin2蛋白质能否在体外发生液-液相分离以及不同蛋白质浓度、盐浓度等对其的影响。结果 PONDR数据库分析发现Epsin2 C端有明显的低复杂无序区域。HeLa细胞内过表达pmCherryC1-Epsin2后发现Epsin2蛋白质在细胞质呈点状聚集。pFastBac HT-B-mCherry-Epsin2蛋白质纯化载体构建成功后，通过转染Sf9细胞获得His-mCherry-Epsin2融合蛋白质。经过镍柱和液相色谱（FPLC）纯化获得高纯度的His-mCherry-Epsin2蛋白质，通过宽场荧光高分辨率活细胞成像系统观察并发现mCherry-Epsin2蛋白质发生了浓度依赖的液-液相分离，且可以被高盐及1，6-HD抑制。结论 成功纯化出His-mCherry-Epsin2融合蛋白质并发现其在体外可以发生液-液相分离，为后续探索Epsin2如何通过相分离参与CME调节生理功能奠定了基础。
articles
• Select
  articles

  胃癌患者血浆非编码RNA ENST000005688931.1 RNA片段异质性分析

  chenlu

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  目的 通过检测胃癌患者血浆中lncRNA ENST00000568893.1 RNA序列不同片段水平，探究RNA片段化分析作为筛选胃癌诊断标志物的可行性。方法 依据lncRNA ENST00000568893.1 RNA全长序列将其分为3个不同序列片段，分别设计对应各RNA片段的PCR扩增引物，采用qRT-PCR方法检测lncRNA ENST00000568893.1 RNA不同片段在健康者、胃癌前病变和早期胃癌患者血浆中的含量。结果 lncRNA ENST00000568893.1 RNA是以片段化形式存在于血浆中，其不同片段在同类型的血浆样本中含量不同，同一片段在不同类型的血浆中含量不同。结论 基于lncRNA ENST00000568893.1 RNA片段在胃癌患者血浆中存在异质性，提示血浆RNA片段异质性可以用于筛选胃癌标志物分子，并将为肿瘤标志物分子的发现提供一种新的思路。
• Select
  articles

  美国重要病毒性生物恐怖剂疫苗研发情况分析

  maoxiuxiu

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  生物恐怖问题由来已久，美国炭疽邮件事件之后更是引起了广泛的关注。疫苗是应对生物恐怖最经济有效的公共卫生方案，本文主要介绍了美国在天花病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒和马秋波病毒五种病毒性生物恐怖剂疫苗领域的研发情况，以期为我国生物恐怖剂疫苗研发提供参考借鉴。
• Select
  articles

  柑橘橘络提取物类黄酮成分分析及其抗缺氧作用研究

  于艺婧

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  [摘要] 目的 本实验主要分析柑橘橘络提取物中的类黄酮成分并探究其抗缺氧作用。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法分析和定量柑橘橘络提取物中常见类黄酮的含量。60只BALB/c雄性小鼠，按照体重随机分为空白对照组、柑橘橘络提取物组、3种类黄酮组、9种类黄酮组，灌胃15天后，进行小鼠常压密闭缺氧实验，观察各组溶液对小鼠抗缺氧能力的影响。结果 成分分析显示，柑橘橘络提取物中类黄酮以橙皮苷、槲皮素、柚皮芸香苷为主，其他含量较高的类黄酮为：橙皮素、柚皮素，新橙皮苷、柚皮苷、坎二菲酮、杨梅黄酮含量较低，川陈皮素、橘皮素、玉米黄酮、芹菜配基未检出。常压密闭缺氧实验结果显示，与空白对照组比较，15mg/kg的柑橘橘络提取物组、3种类黄酮组、9种类黄酮组分别使小鼠常压密闭环境下的生存时间延长15.3%、16.7%、21.4%，且结果都有统计学意义。结论 柑橘橘络提取物延长小鼠常压密闭环境下的生存时间可能主要与提取物中富含类黄酮特别是橙皮苷、槲皮素、柚皮芸香苷有关，且类黄酮之间可能存在协同作用。
• Select
  articles

  蚊虫驱避剂筛选用嗅觉风洞的研制与性能验证

  真毓谷,高赫廷,杨巧江,邢丹,赵彤言,赵腾,李春晓

  2021, 45(3): 0-0.

  摘要 ( ) PDF ( )   可视化   收藏

  ［摘要］ 目的 研制新型蚊虫嗅觉风洞并通过实验验证其性能，用于驱避剂的筛选。方法 探讨蚊虫驱避行为实验影响因素，归纳嗅觉风洞装置具体需求，采用相对简单的低成本、模块化方案对其进行设计实现，并通过调试风速、温度、湿度等关键因素，评价埃及伊蚊、致倦库蚊对四种商用驱避剂涂抹手臂和小鼠的引诱效果，验证新研制嗅觉风洞的性能。结果 嗅觉风洞装置主要分为气路控制系统和行为筛选系统两部分，满足了温度、湿度、风速调控和洁净实验环境需求。经测试，温度30±2℃，湿度40±3%，风速0.15-0.18m/s为蚊虫驱避剂筛选的适宜环境。不使用驱避剂时，风洞内手臂对埃及伊蚊的引诱率为44.1±23.1%，小鼠对致倦库蚊的引诱率为35.6±5.1%，明显高于空白对照（p<0.05）。四种商业化驱避剂对埃及伊蚊引诱率分别为4.4±0.4%、2.7±0.2%、3.6±1.2%、3.6±1.2%，对致倦库蚊的引诱率分别为0%、0%、3.8±3.3%、3.8±1.6%，与对照组相比明显降低引诱能力，均存在显著性差异（p<0.05）。结论 通过蚊虫对现有商业化驱避剂的行为观察，验证了新研制嗅觉风洞的性能，可满足测试要求。今后将应用于蚊虫驱避化合物的筛选和评价，为基层官兵形成系统有效的个人防护提供有力技术支撑。