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    唐枝
    2020, 44(7): 0-0.
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    目的:构建带Myc标签的人肾小管间质性肾炎抗原样蛋白1(Tinagl1)的真核表达载体,表达Myc-Tinagl1融合蛋白,检测其对人宫颈癌细胞生长的影响。方法:以人卵巢文库为模板采用PCR技术扩增出Tinagl1的编码区序列,双酶切后将其插入到Myc载体中,构建Myc重组质粒;将重组质粒与空载体分别转染人宫颈癌Hela细胞,Western blot鉴定目的基因蛋白表达,CCK-8法、克隆形成实验测定其对宫颈癌Hela细胞生长的影响,划痕试验检测Tinagl1对Hela细胞运动迁移能力的影响。结果:双酶切鉴定表明Myc-Tinagl1真核表达质粒构建成功;转染Hela细胞后融合蛋白表达,生长曲线、克隆形成及划痕实验结果表明Tinagl1可抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移。结论:携带Myc标签的人Tinagl1基因的真核表达载体能在人宫颈癌Hela细胞中表达,且能抑制该细胞的生长。本实验为进一步研究Tinagl1在肿瘤,尤其是妇科恶性肿瘤中的功能奠定了基础。
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    luofei
    2020, 44(7): 0-0.
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    [摘 要] 目的:构建带Flag标签的长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4) 基因的真核表达载体,并对其表达产物Flag-ACSL4的生物学功能进行初步鉴定。方法:通过PCR技术从人乳腺文库中扩增出ACSL4基因,并将其克隆到Flag载体中,经酶切和测序验证成功后,转染到乳腺癌ZR75-1细胞中,再通过Western blot检测其表达情况,并通过细胞增殖检测实验和铁死亡实验,测定细胞的增殖能力及ACSL4对乳腺癌细胞铁死亡的影响。结果:从人乳腺文库中扩增得大小为2136bp的DNA片段,成功克隆到Flag载体上,经测序与序列完全一致,转染乳腺癌ZR75-1细胞后基因表达成功。细胞增殖实验表明,转染Flag-ACSL4的乳腺癌细胞较空载体细胞增殖较快。铁死亡实表明,ACSL4可使RSL3诱导的细胞死亡敏感性显著增强。结论:成功构建了带Flag标签的人ACSL4真核表达载体,为进一步研究ACSL4 在脂肪酸代谢和在肿瘤发生发展中的功能打下了良好的基础。 [关键词] 人ACSL4基因;克隆;真核表达;乳腺癌细胞
  • 实验研究
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    任鑫鑫
    2020, 44(7): 0-0.
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    目的:克隆并构建GLUT1启动子的荧光素酶报告基因载体并检测其活性。方法:以ZR75-1细胞提取的基因组为模板进行PCR扩增,将获得的GLUT1启动子片段酶切后连接至荧光素酶报告载体pGL4-basic中,重组的质粒pGL4-basic-GLUT1经测序正确后与空载体分别转染293T细胞,并检测启动子活性;再将pGL4-basic-GLUT1同myc-HIF1α或对照质粒pXJ-40-myc转染ZR75-1细胞,探讨HIF1α基因对GLUT1启动子活性的影响。结果:DNA测序显示,扩增片段与GLUT1启动子片段的序列一致;荧光素酶活性实验表明,GLUT1启动子较对照组有较高的活性;与myc-HIF1α共转染后,GLUT1启动子活性明显大于对照。结论:成功构建了GLUT1启动子报告基HIF1α因载体,明确了HIF1α基因对于GLUT1启动子活性的增强作用,为深入研究GLUT1基因及肿瘤细胞的代谢奠定了基础。
  • 生物信息学分析
  • 生物信息学分析
    龙鼎新
    2020, 44(7): 0-0.
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    [摘要]:肌醇1,4,5三磷酸受体(IP3R)是一类Ca2+释放调节的重要离子通道,对人IP3R三种亚型蛋白的结构及其理化性质的分析能助于对其调控机制进一步了解和掌握。本研究利用生物信息学不同分析方法,对人IP3R三种亚型进行了生物信息学分析。结果显示人IP3R三种亚型均为亲水性蛋白,含有大量α-螺旋,定位于内质网,具有多个磷酸化位点和跨膜结构,无二硫键,有离子通道活性和钙释放通道活性,参与离子转运并与多种蛋白存在相互作用关系等。IP3R蛋白的结构和性质分析,为IP3R进一步的机制研究及生物学实验等提供重要的参考依据。
  • 实验研究
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    陈盟
    2020, 44(7): 0-0.
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    摘要:目的:通过测试ATP生物发光技术与菌落数的关系,研究ATP生物荧光检测技术在空气微生物监测中的应用。方法:首先,取适量细菌菌悬液10倍梯度稀释液于无菌离心管中,加入过量荧光素酶,消耗掉样本中的游离ATP,待其相对发光值(RLU)降低至本底水平后,加入细菌细胞裂解液,使用荧光光度计测定RLU,该值即为微生物细胞内ATP的相对发光值。将各稀释度菌液与RLU之间的关系进行分析,判定其相关性,并建立对应关系式;使用Coriolis μ生物气溶胶采样器采集空气中的生物样本,分别用平板培养法和ATP荧光检测技术测定细菌含量,并分析其相关性。结果:菌落计数对数值与RLU对数值呈高度线性相关。不同RLU值推算的菌数理论值与实际平板计数法检测值相比,差异无统计学意义。平板培养法和ATP荧光检测法对空气采样液的检测结果相关性高。结论:ATP生物荧光检测技术可以通过RLU值来判断被测样本中细菌含量,联合使用Coriolis μ湿壁气旋式生物气溶胶采样器,能准确快速判断空气微生物污染程度,是一种可即时监测空气微生物的有效手段。
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    付宗恒,于淼
    2020, 44(7): 0-0.
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    摘要:目地 本文研究了IL-5对CCl4诱导的急性肝损伤的保护作用。方法 采用CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型, 检测血清中的ALT、AST、IL-5的含量;通过回归分析计算血清中IL-5水平与ALT、AST之间的相关系数;在CCl4造模前给小鼠腹腔注射重组IL-5蛋白,并于损伤后24、36、48、72小时检测血清中ALT和AST水平以及肝脏组织中Caspase-3的活性;对肝脏组织进行免疫组化染色,统计肝组织坏死面积以及BrdU和Ki67阳性细胞比例。结果 在CCl4诱导急性肝损伤后,小鼠血清中IL-5水平升高,并与肝损伤程度呈正相关;在CCl4造模前给小鼠注射重组IL-5可以降低转氨酶水平、减少肝脏组织坏死面积以及肝细胞凋亡,增加肝组织中BrdU与Ki67阳性细胞比例。结论 IL-5能够改善CCl4介导的急性肝损伤以及促进肝脏的损伤修复过程。
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    秦巧臻
    2020, 44(7): 0-0.
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    人脑实验模型的构建有助于我们对人脑发育和疾病发展的深入了解,人脑类器官(Cerebral Organoids)在这方面有着巨大的潜力。类器官是一种微型人造器官,具有3D结构,通常来源于人的单个细胞,在实验室条件下经过长时间培养,具备对应器官的一些关键特性。发育中的大脑体外模型(例如3D大脑类器官)为研究人脑发育和疾病的各个方面提供了前所未有的机会。虽然类脑器官技术在脑发育和脑疾病模拟中的应用存在巨大挑战,但未来大脑类器官的发展仍然有极大潜力。本文对大脑类器官的构建、类脑器官芯片的制备及其在疾病治疗中的应用作简要综述。
  • 临床观察
  • 临床观察
    王奕璇,王建军,赵平
    2020, 44(7): 0-0.
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    目的:评估真实世界中不同直接抗病毒药物(DAAs)方案治疗基因1b型慢性丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染患者的疗效及安全性。方法:回顾性研究了2017年8月至2020年5月于我院就诊的226例基因1b型慢性HCV感染患者,患者均接受我国已获批上市的DAAs进行治疗。其中73例患者采用索磷布韦/维帕他韦±利巴韦林方案,21例患者采用索磷布韦/莱迪派韦±利巴韦林方案,5例患者采用索磷布韦联合达拉他韦±利巴韦林方案,11例患者采用格卡瑞韦/哌仑他韦方案,8例患者采用艾尔巴韦/格拉瑞韦方案,66例患者采用奥比帕利联合达塞布韦方案,29例患者采用阿舒瑞韦联合达拉他韦方案,13例患者采用达诺瑞韦/利托那韦联合PR方案。记录患者NS5A(L31,Y93)基因耐药相关突变检测结果以及病毒学、生化学检测资料。通过分析患者病毒学应答情况、生化学应答情况、APRI指数及不良事件发生情况来评估DAAs的疗效及安全性。结果:83例完成RASs检测的患者耐药突变率为16.9%。226例患者SVR12率为99.6%,ALT、AST、TBil复常率分别为91.2%、93.4%、94.7%,各方案患者SVR12率、ALT、AST、TBil复常率均无显著差异(P>0.05)。226例患者治疗前APRI指数为0.54(0.30,1.10),治疗结束时APRI指数为0.32(0.22,0.61),较基线显著下降(P<0.001)。治疗结束时226例患者不良事件发生率为27.4%,严重不良事件发生率为1.8%,各DAAs方案不良事件发生率无显著差异(P>0.05),但丙型肝炎肝硬化患者不良事件发生率显著高于无肝硬化的慢性丙型肝炎患者。结论:DAAs方案治疗基因1b型HCV感染均可实现极高的SVR率并显著改善患者肝功能,且严重不良事件发生率较低,对提高患者预后有重要意义,但特殊人群的安全性管理仍需重视。
  • 实验研究
  • 实验研究
    ZhangXiaoMin,LiDaWei,JiYunLong,NingJing,YuanYong,PanJie,XieXiangDong
    2020, 44(7): 0-0.
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    目的 为了研究便携式探测器是否可以用于核事故现场内污染快速筛查,需要对探测器的探头类型、探测效率、探测灵敏度、测量距离等技术参数与测量方法进行预先理论研究。方法 利用MCNP粒子输运模拟程序,建立包含肺组织的简易躯干数学模型,将均匀分布在肺组织的典型放射性核素作为模拟辐射源,模拟计算HPGe和NaI(Tl)两种探测器在不同胸壁厚度、不同测量距离下的探测效率,然后计算探测器的最小可探测活度,即探测灵敏度,最后通过比较分析,了解适用于现场便携式内污染计数器的技术参数与测量方法。结论 初步确定了现场内污染肺计数器的关键技术参数和测量规律,便携式探测器可以用于核事故现场内污染快速筛查。
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    葛华
    2020, 44(7): 0-0.
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    医疗产品的使用在突发性公共卫生事件的处置中具有重要作用。作为医疗产品的监管机构,美国FDA在评估其安全性、有效性、可及性方面,发挥着无可替代的作用。本文分析了FDA在COVID-19疫情中关于医疗产品的应对措施及其特点,为我国药品监督管理部门提供参考。
  • 文献调查
  • 文献调查
    yanfeng
    2020, 44(7): 0-0.
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    战斗应激控制是美军卫勤保障的重要组成部分,条令体系保证战斗应激控制实施的有效性和统一性。本研究简要分析美军战斗应激控制条令总体情况,重点研究各军种战斗应激控制条令的发展脉络和最新进展,并对重要内容进行评述。
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    jiangliyongjiang,Diaotianxitianxi,gehuahua,liushushu
    2020, 44(7): 0-0.
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    新冠疫情蔓延全球,美军深受波及。为消解疫情对作战能力带来的影响,美国陆军医学研究与发展部和美国国防高级研究计划局密集部署多项科研项目,调整现有研究布局以开发新冠疫情医疗对策。该文分析了美军紧急科研部署的情况及特点,以备参考借鉴。
  • 综述
  • 综述
    WeiZhou,YueGao
    2020, 44(7): 0-0.
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    高原低压、低氧、高寒的特殊环境,对长期驻防、短期驻训高原官兵的睡眠质量产生巨大影响。高原睡眠障碍已成为重要军事高原医学难题,严重制约影响高原驻防驻训官兵生理机能和作业效能。本文从高原环境影响睡眠因素、高原睡眠障碍特点和机制、高原睡眠障碍的防治等方面,综述国内外最新研究进展,为制定科学合理的高原官兵睡眠保障策略提供理论依据。
  • 情报研究
  • 情报研究
    陈婷
    2020, 44(7): 0-0.
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    2020年4月22日,美国国立卫生研究院国家过敏和传染病研究所发布《2020—2024财年新冠肺炎研究战略计划》,对未来5年新冠肺炎研究进行了全面部署。本文系统梳理了该计划的内容,分析其主要特点,并结合实际提出启示和建议。
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    Kangwen
    2020, 44(7): 0-0.
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    摘要:目的:对比环乳晕切口及经肿瘤表面弧形切口切除乳腺良性肿瘤的临床效果,总结两种切口的适用范围。方法:将61例有手术指征的乳腺良性肿物患者根据手术方式随机分成环乳晕切口组31例,经肿瘤表面弧形切口组30例。比较两组手术时间,术中出血量;术后72小时切口周围有无皮肤瘀斑、水泡及皮下积液;术后6个月手术瘢痕评分。结果:经肿瘤表面弧形切口组平均手术时间及术中出血量均低于环乳晕切口组,差异有统计学意义(P < 0.05);术后72小时切口周围并发症的发生率也低于环乳晕切口组,差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月环乳晕切口组和经肿瘤表面弧形切口组温哥华瘢痕量表评分(VSS)无统计学差异(p>0.05)。结论:环乳晕切口能达到美学要求,但术后并发症较多,有一定的适用范围。对于无环乳晕切口适应症的患者,可考虑行经肿块表面弧形切口,瘢痕较小且不影响乳腺形体外观。