军事医学

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实验研究

电镜探究脂肪移植后脂肪细胞及脂肪组织的转归

冯浩

2015, 39(11): 0-0.

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目的：通过透射电镜探究脂肪移植后脂肪细胞及脂肪组织的转归，为进一步改善临床移植效果提供理论基础。方法：取C57BL/6J小鼠腹股沟脂肪移植于另一只C57BL/6J小鼠背部；分别于0,1,3,5,7,14,30天取出移植物，运用透射电镜方法来观察脂肪移植后脂肪细胞及脂肪组织的转归。结果：大部分脂肪细胞于脂肪移植后3天死亡；移植5天时可见新生幼稚多房的脂肪细胞；移植后14天可见大量新生幼稚多房的脂肪细胞。脂肪移植后后原有血管基本坏死，将由新生毛细血管所替代。结论：脂肪移植后脂肪细胞仅少量靠近移植区周边成活，绝大部分脂肪细胞死亡，将由新生脂肪细胞成活；改善脂肪移植效果应促进脂肪细胞再生而不是促进脂肪细胞成活。

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双眼竞争下面孔感知的客观评价及梭状回相关性分析

赵晓波

2015, 39(11): 0-0.

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目的研究双眼竞争（BR）的客观检测方法并分析梭状回与视觉皮质的相关性。方法 6名受试者进行双眼竞争实验，受试者一只眼呈现8.57Hz闪烁的平静表情面孔图片，另一只眼分别呈现12Hz、15Hz闪烁的恐惧表情面孔图片并记录EEG信号。两个不同频率闪烁的刺激诱发稳态视觉诱发电位（SSVEP），通过短时傅里叶变换的时频分析方法，解析面孔刺激中双眼竞争的持续时间和交替频率，比较两侧梭状回面孔识别区（FFA）与视觉皮质的相关系数。结果双眼竞争下左眼观看平静表情面孔的时长平均411.6±73.8ms，右眼观看恐惧表情面孔的时长平均547.6±126.7ms，交替频率2.11±0.28Hz，左侧FFA与右侧相比对恐惧表情面孔的加工更敏感，两侧FFA对恐惧表情面孔的加工没有频率差异。结论 SSVEP能够作为双眼竞争中优势态感知的频率标记，成功对双眼竞争下视觉感知进行客观评价，BR和SSVEP结合的方法可用于视觉感知神经机制的研究。

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实验研究

我国东部沿海地区水产品中副溶血弧菌分离株的基于碱基序列和肽链序列的多位点序列分型研究

徐嘉良

2015, 39(11): 0-0.

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摘要：目的：了解2007-2012年来自我国东部沿海地区水产品中的副溶血弧菌分离株的毒力基因携带情况、菌株克隆群关系构成。方法：收集2007-2012年间来自我们东部沿海地区（广东省、福建省、上海市、江苏省、山东省、北京市），分离自水产品中的副溶血弧菌分离株，经基于tlh基因荧光PCR鉴定为副溶血弧菌共79株。采用荧光PCR方法对其进行了毒力基因耐热直接溶血素（tdh）、耐热直接溶血素相关溶血素（trh）及流行组标识基因（orf8）检测，采用国际推荐的MLST方法对菌株进行亚群分析和克隆复合体分析，并构建基于ST型和pST型的最小生成树，根据eBURST进行克隆群复合体分析。结果: 79株水产品分离株中，tlh均为阳性，8.86%（7/79）的分离株tdh阳性，orf8基因的携带率为8.86%。此79株副溶血弧菌分离株分属于69个ST型，3个克隆群复合体，62个单体。在基于肽链的多为点序列分型时，此79株副溶血弧菌分离株可分为23个pST型，包括1个克隆群复合体，2个单体。去重组后剩余363个SNP位点，以此363个SNP位点进行分型，可分为68个pattern型。结论: 来自我国东部沿海地区的水产品中分离的副溶血弧菌具有高度多态性，但毒力基因携带率较低，MLST分型时以ST3型为多，AA-MLST分型时以pST1型为主。

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富马酸二甲酯在多发性硬化中的应用及其机制研究进展

LiNa

2015, 39(11): 0-0.

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多发性硬化是中枢神经系统脱髓鞘疾病中最常见的自身免疫性疾病，其临床特点是病灶播散广泛，病程中常有缓解-复发的脑、脊髓炎，多伴有视神经损害。目前全世界患者约有250万人，以青、中年多见，女性居多。迄今这一疾病还无法治愈。富马酸二甲酯（DMF）是一种治疗MS的新型口服药物，2013年被FDA批准用于临床治疗复发-缓解型多发性硬化症。它可以降低疾病的活动度，同时能够减少复发-缓解型多发性硬化的复发。本文针对DMF在MS治疗中的应用及其作用机制进行简要阐述。

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实验研究

祛痹止痛凝胶质量标准研究

贾辉

2015, 39(11): 0-0.

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摘要：目的建立祛痹止痛凝胶的质量标准。方法采用HPLC法，以Welchrom C18柱，甲醇-水（体积比为45:55）为流动相，在274nm检测波长处，测定徐长卿中丹皮酚的含量，同时对徐长卿、姜黄和冰片进行薄层鉴别。结果丹皮酚在10～320 μg•ml-1浓度范围内线性关系良好，r=0.9998。平均加样回收率为97.42%，RSD为1.01%（n=6），薄层色谱斑点清晰，阴性对照无干扰。结论该方法可有效控制制剂的质量。

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称重法和化学分析法在武警某部膳食调查中的应用与比较

pulingling

2015, 39(11): 0-0.

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目的对天津某武警部队每日膳食摄入量进行调查，并通过两种方法对食物的营养成分进行分析比较，了解实际膳食营养素摄入状况。方法膳食调查采用称重法并参照《中国食物成分表2004》计算各食物营养素摄入量；营养成分分析采用双份饭法收集食物样品，应用化学分析法测定食物中各种营养素含量。结果分析测定的膳食中主要营养素（蛋白质、脂肪及碳水化合物）、矿物质（Na、K、Mg、Ca、Zn、Cu及Se）和维生素（β-胡萝卜素、维生素E、硫胺素、核黄素、维生素C、烟酸、维生素B6及维生素A）的摄入量与膳食调查计算值相比较均偏低。结论两种方法的差异性最终表现为食物的实际测定值小于膳食调查计算值，有必要改善食物的储运加工方式，以达到合理营养、提高官兵健康水平。［关键词］膳食摄入量；营养成分；膳食调查计算值；实际测定值

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力达霉素经肝动脉介入治疗兔肝癌VX2的实验研究

xuzhishan

2015, 39(11): 0-0.

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摘要：目的探讨力达霉素经肝动脉介入治疗和静脉化疗两种给药途径对VX2兔肝癌的影响。方法开腹方法将VX2瘤组织块分别植入12只新西兰大白兔的肝左叶，建立VX2兔肝癌模型，B超检测肿瘤生长情况后随机分为两组，A组为力达霉素肝动脉介入组和B组力达霉素静脉化疗组（6只/组），A组数字减影血管造影DSA下引导至肝固有动脉注入力达霉素，B组耳缘静脉注入力达霉素，给药10天后处死两组兔子，取肝脏肿瘤组织4%多聚甲醛固定，免疫组化方法测定CD34、PCNA蛋白的表达；应用Cobas 8000检测血清生化AST和ALT水平；计算并比较两种不同给药方式的肿瘤生长抑制效果。结果经给药10天后各组肿瘤均有增大，但与B组对比, A组肿瘤增长率明显减缓（P <0.05）；免疫组化结果显示介入途径给药更能下调CD34、PCNA表达水平。结论力达霉素经肝动脉介入治疗能提高经静脉化疗对兔肝癌VX2增殖抑制作用。 [关键词] 力达霉素；介入治疗；VX2肝癌；免疫组化

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综述

柔性传感技术及其在健康医疗领域中的应用

周学思,钟荣华,王天辉

2015, 39(11): 0-0.

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[摘要] 近年来以传统技术获取健康信息的方式制约着健康医疗服务进一步向高质量、低成本方向发展，无法满足人们不断扩展的需求。随着新材料、机械、工艺制造领域的进步而出现的柔性传感技术，使纺织品、饰物、人体表皮，甚至人体内部组织器官与柔性传感器的集成得以实现。这为监测健康水平、改进诊疗方法、研究疾病状态、构建人机交互界面等应用提供了新方法和思路。本文就柔性传感技术在健康医疗领域应用时所要解决的关键技术、常用材料与制造技术，及应用进展情况进行综述。 [关键词] 柔性传感技术；健康医疗；可穿戴设备

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试验研究

应用膜片钳技术检测药物对HERG通道抑制作用的试验过程及要点

夏静,彭双清

2015, 39(11): 0-0.

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目的：应用膜片钳技术检测药物对HERG通道的作用，探讨离子电流记录过程及试验要点。方法：选择稳定转染并表达人源心肌HERG（human ether-a-go-go related gene）离子通道的HEK293细胞，通过全细胞记录方式,记录HERG电流。结果：成功记录到HERG步阶电流和尾电流，步阶电流的I-V曲线表现为特征性的倒钟形结构，尾电流在去极化时迅速上升，在+10 mV时接近峰值。阳性药物E-4031能明显阻断HERG电流。检测的某化合物对HERG电流具有抑制效应，半数抑制浓度IC50为109 µM。结论：体外HERG试验可以直接检测药物对HERG电流的抑制作用，膜片钳的正确操作及电流记录是试验成败的关键因素。

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实验研究

临床少见丝状真菌的实验室诊断

TangXiuli

2015, 39(11): 0-0.

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［摘要］目的通过对临床少见丝状真菌的分离和分析鉴定，探讨尖端赛多孢子菌，裂褶菌，短帚霉菌，葡枝根霉菌，茄病镰刀菌等临床不常见丝状真菌的实验诊断方法，为临床明确诊断真菌感染种类，提供科学依据。方法从临床标本培养出的5株真菌，用形态学方法未能做出准确鉴定，通过采用真菌通用引物ITS3和ITS4扩增真菌核糖体转录间隔区（ITS2），对PCR产物进行测序，在NCBI网站应用blastn对获得的基因序列进行同源性分析，以确定丝状真菌的菌种。结果所有菌株均测序成功，测序结果与GenBank 中的序列比对，均可以鉴定到种水平，5株菌分别是：尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短帚霉菌、葡枝根霉菌和茄病镰刀菌。结论传统形态学方法，极易受检验人员经验水平影响，对于罕见菌株甚至不能做出鉴定，利用PCR技术和测序技术，可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种水平。

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我国携带NDM-1基因耐药菌流行病学分析

王盛书

2015, 39(11): 0-0.

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[摘要] 目的分析国内NDM-1阳性菌的流行病学特征，探讨携带NDM-1阳性菌的耐药机制。方法收集报道我国blaNDM-1流行情况文献，对NDM-1阳性菌株种类与地区分布、阳性菌株和感染来源、耐药谱和转移机制进行流行病学分析。结果我国共有25个省市发现blaNDM-1阳性菌株，其中广东地区最多39.49%（P<0.05），阳性菌以肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌最多（P<0.05）；感染阳性菌的患者年龄段主要集中在10岁以下、60~80岁之间（P<0.05），痰液标本分离blaNDM-1阳性菌最多，为40株（41.24%）（P<0.05），ICU、儿科和呼吸科分离blaNDM-1阳性菌明显高于其他科室（P<0.05），肺部疾病患者分离出阳性菌最多（P<0.05），blaNDM-1阳性菌对阿米卡星、替加环素的耐药率最低，分别为7.69%和2.33%。结论携带NDM-1基因的耐药菌感染已经成为一个全球性的公共卫生问题，需要深入研究其发生发展规律。

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甘肃省2778例肺癌患者住院费用影响因素分析

BAOXiaolei

2015, 39(11): 0-0.

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[摘要] 目的分析20102014年甘肃省肺癌患者的人口学特征、住院费用的构成情况及其影响因素，为减少肺癌患者的住院费用、减轻其经济负担找到有效的突破口。方法从甘肃省兰州市某三甲医院信息系统（HIS）数据库中提取20102014年主要诊断为肺癌的患者的基本信息、就医信息及费用信息。运用Wilcoxon秩和检验分析5年间及不同特征分组间的费用差别，分别用前进法、后退法和逐步法筛选自变量，运用多重线性回归分析探索影响肺癌患者住院费用的主要影响因素。结果共收集有效病例2778例。西药费和治疗费是过去五年间占费用比例最大的两项，分别占总费用的36.39%和22.46%；住院费用最大的影响因素为住院天数，其次为有无手术、年份、治疗结果、收费方式和有无输血。结论可通过规范合理用药、改进治疗方案、做好患者的心理疏导、健全医疗管理体制、完善医疗资源的配置等措施，减少住院天数和降低住院费用，从而减轻甘肃省肺癌患者的经济负担。关键词：肺癌；甘肃省；住院费用；影响因素

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问卷调查

宁夏汉族和回族乳腺癌发生的危险因素比较

石晓娟

2015, 39(11): 0-0.

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目的比较宁夏回族和汉族女性乳腺癌发生的危险因素的不同，为预防和控制乳腺癌的发生提供依据。方法将2013年5月至2014年7月于宁夏医科大学附属总医院就诊入院的新发宁夏女性乳腺癌患者作为病例，选取来源于同一医院同期入院的无乳腺癌的女性患者作为对照，对二者使用统一的调查表进行流行病学调查，调查内容包括一般人口学资料、月经史、生育史、生活习惯和肿瘤家族史等其他乳腺癌易感因素。并采用多因素logistic回归分析比较汉族和回族乳腺癌发生的危险因素。结果多因素logistic回归分析显示，直系亲属患肿瘤（OR=4.914，P=0.006）、流产总数（OR=1.592，P=0.001）和首次生育年龄（OR=1.173，P=0.001）是汉族女性乳腺癌发生的主要危险因素，体育锻炼（OR=0.465，P=0.003）是其保护因素；流产总数（OR=2.610，P=0.029）是回族女性乳腺癌发生的危险因素，体育锻炼（OR=0.181，P=0.045）是其保护因素。结论汉族和回族女性乳腺癌发生的危险因素在流产总数、体育锻炼上比较一致，与回族相比，汉族女性首次生育年龄和直系亲属患肿瘤在乳腺癌的发生中也起了作用。

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呼吸道微生物组与相关疾病研究进展

dengzenghua

2015, 39(11): 0-0.

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传统观念认为健康人体只有少量微生物存在于上呼吸道中。近些年，随着二代测序技术以及生物信息学的快速发展，人们已从整个呼吸道中检测出大量微生物的存在。其与疾病的关系成为新的研究热点，相关研究表明呼吸道微生物和多种呼吸道疾病存在密切关系，这为哮喘、肺的囊性纤维化 (Cystic Fibrosis, CF)、慢性阻塞性肺部疾病 (Chronic Obstructive Pulmonary Disease, COPD)以及肺癌等疾病的诊断与治疗提供了新的思路和研究方向。本文综述了呼吸道微生物与相关疾病之间关系的研究进展。

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IFN-λs真核表达载体的建立及其表达产物的生物学功能检测

李竞,齐义新,房桂英,李雅琪,周慧敏,胡洁,李全海

2015, 39(11): 0-0.

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目的构建IFN-λ真核表达体系，获得IFN-λ基因在真核细胞中的表达，确认IFN-λ在真核表达体系中的抗增殖和抗病毒生物学作用。方法克隆人IFN-λ1/2基因：从poly I:C刺激的HuH-7细胞mRNA 中克隆IFN-λ1/2基因全长，并进行DNA基因测序；构建pcDNA3-IFN-λ1/2载体，酶切鉴定，并将其转染 COS-7 细胞，应用Western blot检测 IFN-λ1/2 的在转染COS-7细胞中表达。利用COS-7细胞表达的IFN-λ1/2蛋白作用于食管癌YES5 和T.Tn 细胞株，CCK-8法检测细胞增殖，Western blot检测凋亡蛋白caspase-3的表达，实时荧光定量PCR检测ISG15及MxA抗病毒基因表达。结果经PCR，DNA 测序和酶切鉴定,克隆的IFN-λ1/2基因与GenBank公布的序列一致, IFN-λ1/2基因序列正确构建入pcDNA3载体中；在pcDNA3-IFN-λ1/2转染的COS-7细胞中检测到IFN-λ1/2蛋白表达；其表达产物可诱导人食管癌YES5和T.Tn细胞增殖抑制和凋亡蛋白caspase-3的活化，上调抗病毒ISG15及MxA基因。结论建立了IFN-λ基因真核表达体系，即通过pcDNA3-IFN-λ1/2转染的COS-7细胞实现了IFN-λ基因表达；经此体系表达IFN-λ具有抗增殖，诱导凋亡及上调病毒分子表达的生物学作用；此体系的建立为IFN-λ的生物学功能研究和临床应用奠定基础。

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侵及多脏器血管肉瘤18F-FDG PET/CT显像一例

孙美玲

2015, 39(11): 0-0.

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侵及多脏器血管肉瘤18F-FDG PET/CT显像一例

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应用环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森氏菌

冯娜

2015, 39(11): 0-0.

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目的建立LAMP简单、快速检测鼠疫菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物；应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测；通过对鼠疫菌和其它近源菌同时进行检测评价方法的特异性；通过对不同稀释浓度的鼠疫菌DNA模板进行LAMP和PCR检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的LAMP法对与鼠疫菌近源30种其它菌株进行LAMP扩增，均为阴性结果，表明本方法具有很高的特异性。LAMP法检测鼠疫菌DNA的灵敏度可达到20pg，比常规PCR法高10倍。检测反应在25min以内完成。结论本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点，有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。

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miR-17靶向调控MMP-2基因对人脑胶质瘤U87细胞侵袭性的影响

周青青

2015, 39(11): 0-0.

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目的: 探讨人脑胶质瘤U87细胞中miR-17和MMP-2基因的表达，阐明miR-17对MMP-2基因的靶向调控作用以及对U87细胞侵袭性的影响。方法: 培养U87细胞并应用免疫荧光化学技术检测MMP-2基因的表达；采用生物信息学方法对miR-17和MMP-2基因的匹配关系进行预测并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定；转染miR-17模拟物后，行Real-time PCR检测miR-17和MMP-2基因的表达，Western blot检测MMP-2蛋白的表达，Transwell小室检测癌细胞体外的侵袭性。结果：倒置相差显微镜下可见U87细胞分布均匀，多样性明显；细胞免疫荧光显示胞质内有MMP-2蛋白的表达，显示绿色荧光。靶基因预测软件miRanda和TargetScan显示miR-17和MMP-2基因匹配良好，双荧光素酶报告基因系统鉴定发现miR-17能够结合MMP-2 mRNA 3'UTR并有效抑制其表达。Real-time PCR和Western blot检测结果均表明miR-17的过表达能够下调MMP-2基因表达。Transwell实验表明miR-17的过表达能够抑制U87细胞的侵袭。结论：miR-17通过靶向作用于MMP-2 mRNA 3’UTR负性调控人脑胶质瘤U87细胞中MMP-2的表达，并能够抑制其侵袭。

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慢性放射性溃疡手术配合与护理

石卫青,付阳阳

2015, 39(11): 0-0.

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目的：探讨慢性放射性溃疡手术术中护理特点。方法：回顾30例慢性放射性溃疡修复术手术过程及护理特点。结果：36例中，一期于愈合26例，延期愈合9例，死亡1例。一期及延期愈合患者经1-5年随访，皮瓣修复处均无复发。结论：手术过程中，通过术前访视进行心理护理，术中紧密配合手术、无菌原则，术后固定、包扎。手术治疗的成功是术后愈合的关键环节。

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