实验研究
SuXiaolei,Wangkun,WuZuze,ZhangQinglin,JinJide
2018, 42(2): 0-0.
目的 观察牙髓干细胞来源的外泌体对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞急性肺损伤模型的作用及机制。方法 牙髓干细胞培养至第6代后,换无血清培养基处理24小时后收集上清液,采用超速离心法分离外泌体。取对数生长期的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383接种于12孔板,分别用1μg/mL的LPS或联合外泌体处理细胞。在细胞处理前(0小时)和处理后6小时、12小时、24小时收集细胞上清液,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)。裂解提取细胞蛋白,采用Western Blot方法测定细胞外调节蛋白激酶(p44/42)、转录因子NF-κB(p65)、IκBα蛋白的表达量及其磷酸化水平。结果 与对照组比较,LPS处理组的肿瘤坏死因子-α,白细胞介素-1β和白细胞介素-6水平显著增高(P<0.05),提示LPS诱导急性肺损伤细胞模型成功。与LPS处理组相比,高剂量外泌体处理后,TNF-α和IL-1β表达量明显降低(P<0.05);IL-6在低剂量和高剂量的外泌体处理后均有明显降低(P<0.05)。牙髓干细胞来源的外泌体能降低转录因子NF-κB(p65),IκBα以及细胞外调节蛋白激酶(p44/42)的磷酸化水平。结论 牙髓干细胞来源的外泌体对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用,机制可能通过抑制MAPK信号通路和NF-κB信号通路的激活有关。