军事医学

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基于“和谐使命-2018”任务南太平洋四国实践探讨海外医疗服务中的围手术期管理特点

LiYonghua

2018, 42(11): 0-0.

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分析与总结“和谐使命-2018”任务南太平洋地区巴布亚新几内亚、瓦努阿图、斐济和汤加四国医疗服务中手术与麻醉的完成情况。本阶段共计完成各类手术与操作143例，其中局麻监护129例，全身麻醉12例，臂丛神经阻滞1例，闭孔神经与股神经阻滞1例。所有手术与操作均顺利完成，获得了积极的国际影响。该阶段任务具有手术需求多，社会期望高，患者差异大等特点。成功保障与配合“和谐使命-2018”任务顺利完成的经验包括但不局限于：合理配备麻醉医生，完善物资准备，强化术前评估，重视舒适化医疗和践行快速康复等，对海外医疗服务和应急医疗援助具有一定的参考价值。

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大蒜油对肺癌和肝癌细胞增殖与凋亡的调控作用研究

苏文文

2018, 42(11): 0-0.

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[摘要] 目的鉴定大蒜油对非小细胞肺癌细胞（H1299）和肝癌细胞（HepG2）增殖与凋亡的影响。方法利用MTT实验和克隆形成实验检测大蒜油对H1299和HepG2细胞细胞生长、增殖及克隆形成的调控作用。利用流式细胞术检测大蒜油对H1299和HepG2细胞周期进程及凋亡的影响。结果 MTT实验与克隆形成实验结果表明大蒜油能够浓度依赖性和时间依赖性的抑制H1299和HepG2细胞的增殖，并阻断两种肿瘤细胞的克隆形成。流式细胞术检测结果表明大蒜油能够浓度依赖性的阻断两种肿瘤细胞的周期进程，使细胞发生G2/M期阻滞。同时，流式细胞仪检测结果显示大蒜油能够剂量依赖性的诱导H1299与HepG2细胞凋亡。结论大蒜油能够阻断肝癌及非小细胞肺癌细胞的周期进程，抑制肿瘤细胞增殖，并诱导肿瘤细胞凋亡，从而发挥抗癌活性。

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我国海军官兵战（现）场急救技能掌握现状及分析

陈楚琳

2018, 42(11): 0-0.

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目的分析2018年群众性战伤救治技术练兵活动开展以来，我国海军官兵战（现）场急救技能掌握现状。方法采用分层抽样法，抽取全海军五大兵种不同类别官兵，督导组成员进行止血、包扎、通气、心肺复苏、胸腔穿刺、初次伤情评估等项目的考核。结果共508名官兵参加战（现）场急救技能考核，总平均分为（86.3±4.7）分。海军各兵种的总平均分存在差异（P＜0.001），海军岸防兵部队最高（P＜0.05）。海军官兵的各项技能得分也存在差异（P＜0.001），其中初次伤情评估得分显著低于其它五项技能（P＜0.05）。结论 2018年群众性战伤救治技术练兵活动的开展在一定意义上推动了海军部队官兵战（现）场急救训练水平的提升，但在结合战场急救新理念、推动实战化训练等方面仍有提升空间。

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美军《生物医学研发总体战略》解读分析

张音

2018, 42(11): 0-0.

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《生物医学研发总体战略》由美国武装部队生物医学研究评估与管理中心编制，是美国国防部发布的首个针对军事医学领域的总体战略，对推动美军军事医学发展及确保部队在未来联合作战环境中顺利履行国防部任务职责具有深远影响。本文对美军《生物医学研发总体战略》的战略目标、主要内容及特点等进行全面解读和系统分析，提出对我军的启示借鉴，为推动我军军事医学科技发展，全面提升军事医学保障效能提供有价值的参考。

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实验研究

Tim-3对神经小胶质细胞极化的调控作用及机制研究

LIUYiQiong

2018, 42(11): 0-0.

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目的：神经小胶质细胞在神经功能稳态调控及免疫防御中发挥关键作用，其功能的发挥与其极化状态密切相关，本研究旨在探究免疫检查点分子Tim-3对小胶质细胞极化的调控作用及机制。方法：借助流式细胞术检测神经小胶质细胞BV-2上Tim-3及其配体的表达情况；利用ELISA 、实时定量PCR方法检测阻断Tim-3的功能对BV-2细胞因子表达的影响，进而明确Tim-3对小胶质细胞M1/M2极化的调控作用；通过western 印迹阐明Tim-3调控小胶质细胞极化的分子机制。结果：1、Tim-3及其配体分子Gal-9组成性表达在小胶质细胞上；阻断Tim-3信号显著增强了小胶质细胞M1极化相关的促炎性细胞因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-12的表达，抑制了M2极化抗炎性细胞因子TGF-β、IL-10的表达，提示Tim-3参与了小胶质细胞极化的调控。2、分子机制研究发现Tim-3 可能通过抑制小胶质细胞中RIG-I和NF-κB 信号分子的表达及活化发挥极化调控功能。结论：免疫检查点分子Tim-3参与了神经小胶质细胞的极化调控。该发现为通过Tim-3探索脑损伤及脑功能障碍性疾病的治疗新策略提供了新的实验依据。

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A型肉毒毒素轻链抑制剂CPI-1的衍生物的合成及活性评价

戴秋云,沈锦涛,余硕,周良燚,余云舟

2018, 42(11): 0-0.

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目的在A型肉毒毒素轻链多肽抑制剂CPI-1引入穿膜序列，提高其抑制活性。方法基于CPI-1的序列，在N端或C端增加穿膜序列Angiopep-2（Ang）或多聚精氨酸（R8），固相合成线性肽，空气氧化折叠形成目标产物，经RP-HPLC纯化得纯肽。表达A型肉毒毒素轻链截短体LC424，合成含荧光基团与淬灭基团的肉毒毒素轻链水解底物SNAPtide，采用荧光共振能量转移法（FRET）测定各多肽对肉毒毒素轻链的抑制活性，小鼠攻毒测定各肽体内活性。结果将Ang接在CPI-1的N端或C端后，Ang-CPI-1、Ang-GG-CPI-1、CPI-1-Ang以及CPI-1-GG-Ang的IC50值分别为148.2、251.9、88.1、90.9 nmol/L，相比于CPI-1（IC50=411.9 nmol/L）活性提升1~3倍；多聚精氨酸接入CPI-1的N端后导致抑制活性丧失。结论在CPI-1的N端和C端增加Ang肽能提升其对肉毒毒素A轻链抑制活性，但不能增加体内活性。

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我国3个主要民族HIV感染者基因组中HERV-K113和K115基因分布研究

裴志超

2018, 42(11): 0-0.

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目的分析HERV-K113、HERV-K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的分布，为进一步研究其与HIV感染和复制的关系奠定基础。方法收集我国广西、云南、四川和河南HIV感染者的血液样本，提取基因组DNA，通过PCR扩增及核酸电泳检测，判断样本基因组中HERV-K113/K115基因插入状况。采用卡方检验和Fisher Exact Test等统计学方法分析HERV-K113/K115基因在不同民族、地区的HIV感染者中的分布是否存在差异。结果收集我国汉、彝、壮族3个民族共504份HIV感染者血液样本(汉族238例,彝族175例,壮族91例)，基因组中HERV-K113和HERV-K115的插入率分别为30.0%和4.8%；不同民族HERV-K113的插入率分别是39.6%（壮族）、30.3%（汉族）、24.6%（彝族）；HERV-K115 的插入率分别是7.7% (壮族)、5.0%（汉族）、2.9%（彝族）。HERV-K113在不同民族的分布存在显著性差异（p<0.05）。结论首次阐明HERV-K113和K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的频率分布，为进一步研究其与HIV感染及疾病进程的相关性奠定了基础。

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临床观察

经皮扩张气管切开术用于中毒危重患者的探讨

董建光,高萌,鲁晓霞,彭晓波,王春燕,刘燕青,白丽丽,韩丽梅,王浩春,邱泽武

2018, 42(11): 0-0.

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目的探讨经皮扩张气管切开术在中毒危重症患者的应用价值。方法对2015年1月至2018年8月，我院中毒救治中心20例中毒危重患者应用经皮气管切开术（Perculaneous dilational tracheostomy，PDT）患者的临床资料进行回顾性分析。结果 20例患者手术成功，出血量少，操作时间短，住院期间无导管脱位、皮下气肿、纵膈气肿等并发症，1例患者并发切口感染，回访2例患者出现气管前壁肉芽组织过度生长致气管狭窄。结论 PDT是一项可以在中毒救治ICU床旁实施的微创技术，由中毒ICU医师独立完成，预计短期内不能拔除气管中毒患者及神志不清者应尽早行PDT。

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电磁混响室搅拌器不同工作状态对局部场强影响的初步研究

MINXIA

2018, 42(11): 0-0.

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[摘要]目的通过改变电磁混响室内搅拌器的不同工作状态，研究其对有效工作区域中场强的影响，为深入研究电磁辐射的生物效应和医学防护研究提供参考。方法在固定频率900MHz、功率绝对值为-27dBm下，将直流稳压电源分别设置为0A、0.4A、0.8A、1.2A等不同档位，采用微波检测设备对电磁混响室有效工作区内72个测试点进行场强测量并分析。结果在搅拌电流为0A状态下，有效工作区域场强为（187.44±46.94）V/m；0.4A状态下，有效工作区域场强为（194.61±36.84）V/m；0.8A状态下，有效工作区域场强为（197.05±36.09）V/m；1.2A的状态，有效工作区域场强为（177.92±73.12）V/m。此外，在0、0.4、0.8和1.2A四种搅拌状态下，其有效工作区域的平均场强变异系数（CV）分别为25.04%±5.43%、18.93%±5.94%、18.31%±6.61%和41.10%±5.01%。结论在相同频率、相同功率绝对值和不同搅拌状态下，电磁混响室内有效工作区场强分布均匀性都较好，综合比较可见当搅拌器设定在0.8A档位状态下，有效工作区域场强分布更加均匀，可用于后续动物实验以便获得更加稳定的研究结果。

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小分子线性肽的合成及体外抗炎活性研究

chentingting

2018, 42(11): 0-0.

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[摘要] 目的合成小分子线性肽并在其序列中引入两个具有α-双取代的非天然氨基酸，通过证实该氨基酸的引入对抗炎活性无显著影响，为进一步制备订书肽提供参考。方法采用标准Fmoc-固相肽合成方法，合成4条线性肽底物，并用设计合成的Fmoc-丙烯基丙氨酸替换肽链i及i+4位点疏水性氨基酸残基，制备出结构改造的线性肽，并用HPLC及MS进行分析鉴定及纯化。采用CCK-8法评价线性肽结构改造前后对RAW264.7细胞活力的影响，用酶联免疫吸附法评价线性肽改造前后对LPS诱导RAW264.7细胞释放TNF-α的影响。结果成功合成了4个线性肽，对其结构改造得到8个新结构肽。12条肽的抗炎活性评价结果表明，丙烯基丙氨酸的引入对4条线性肽底物针对RAW264.7细胞活力无明显影响；与LPS刺激组比较，12条肽对RAW264.7细胞产生的TNF-α均有明显的抑制作用(P < 0.001)，但丙烯基丙氨酸的引入前后相比对抑制TNF-α释放影响作用无显著性差异。结论本文采用同为疏水性的丙烯基丙氨酸替代线性肽中处于螺旋同侧的氨基酸，发现对线性肽底物的抗炎活性无显著影响，为进一步制备线性肽底物的订书肽提供了参考并奠定了基础。 [关键词] 线性肽；Fmoc-丙烯基丙氨酸；结构改造；固相合成；抗炎活性

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日本小笠原群岛血液供应模式解析与借鉴

yanshaoduo

2018, 42(11): 0-0.

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血液保存时间短、技术标准高、储运条件严，通常需要在人口稠密的大城市设立专门机构负责血液的采集与供应，以满足本区域内医院的临床用血需求。远海岛屿等人口稀少地区存在明确的临床用血需求，但一般不会设立采供血机构，血液供需矛盾突出。小笠原群岛远离日本本岛，日本东京都红十字血液中心为其建立的血液轮转供应模式有效解决了血液供需矛盾，值得解析借鉴。

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一种集成深度神经网络和正则表达式的基因变异命名实体识别算法

罗哲恒,佟凡,赵东升

2018, 42(11): 0-0.

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基因变异命名实体的自动化正确识别是从生物医学文献中挖掘基因-变异-疾病关系知识的重要基础。本文提出一种以深度神经网络为主、结合维特比解码和正则表达式的组合算法，用于识别基因变异命名实体。受单词分布式表示的启发，我们提出一种深度分词策略，即以字母的大小写、数字和特殊符号将单词分开来捕捉变异名称中各部分的结构信息，其中最小的分词单位定义为token；使用GloVe训练深度分词的token向量，一个单词的全部token向量用于训练该单词的词向量。以句子的词向量序列为输入，利用一个Bi-LSTM网络学习变异名称的一般形式并捕捉上下文信息，后接一个全联接层以提高拟合能力，得到词的标签概率序列作为初步输出；随后采用维特比算法对初步输出进行优化，最后增加正则表达式匹配的结果完成识别。该算法经在NCBI tmVar语料库上训练和测试，取得了91.59%的F1值，高于目前国际上已公开报道的识别系统。

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DNA损伤反应相关lncRNA的筛选及初步功能分析

唐晶,郑晓飞,杜彩素,付汉江

2018, 42(11): 0-0.

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[摘要] 目的阿霉素处理诱导细胞DNA损伤，筛选出与DNA损伤相关的lncRNA分子。方法阿霉素处理宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌MCF-7细胞诱发DNA损伤，lncRNA芯片筛选与DNA损伤相关的lncRNA分子。实时荧光定量PCR验证这些长链非编码RNA在DNA损伤应激反应中表达量的变化。双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA对p53转录活性的影响。结果与结论发现部分lncRNA的表达量在DNA损伤反应过程中发生显著改变，而且这些lncRNA表达变化具有一定细胞类型特异性。DNA损伤反应中部分lncRNA的表达变化依赖于p53，同时发现lncRNA HG512439对p53的转录活性具有一定调控作用。

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利用CRISPR/Cas9文库全基因组筛选HCT 116细胞增殖相关基因

潘冰心

2018, 42(11): 0-0.

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[摘要]目的 CRISPR/Cas9 高通量筛选技术已被应用到各种领域，本文利用CRISPR/Cas9全基因组文库大规模筛选与细胞增殖相关的基因。方法将HCT 116细胞大规模培养至1×108，将CRISPR/Cas9全基因组慢病毒文库大规模感染，加入嘌呤霉素筛选6天后收集部分细胞，剩余细胞继续培养10天，收取全部细胞，提取基因组DNA，扩增sgRNA序列、建库并进行深度测序，比较前后两组sgRNA序列数据，根据sgRNA序列数量筛选出与细胞增殖相关的基因。结果与讨论筛选出了一批与HCT 116细胞增殖相关的蛋白编码基因及miRNA基因，获得了增殖相关miRNA及其靶基因的调控网络。为进一步验证分析这些基因在HCT 116细胞中的功能奠定了基础。

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SRF通过诱导肝癌细胞的EMT增强其迁移能力

冯岚

2018, 42(11): 0-0.

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［摘要］目的探讨血清应答因子（Serum response factor，SRF）对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721增殖与迁移能力的影响及其作用机制。方法在肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721中瞬时转染SRF重组质粒过表达SRF；通过慢病毒包装将特异敲低SRF的shRNA（Short hairpin RNA）重组质粒转染Bel-7402和SMMC-7721细胞系，筛选稳定敲低SRF的细胞系；蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）法检测细胞中SRF蛋白的表达水平，验证SRF的过表达或敲低效果；CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测SRF对肝癌细胞系增殖能力的影响；Transwell法检测SRF对肝癌细胞系迁移能力的影响；实时定量PCR法检测受SRF调控的下游靶基因的mRNA表达水平；采用Log-rank检验比较SRF高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异。结果过表达或敲低SRF对肝癌细胞的增殖能力无明显影响；然而，过表达SRF可显著促进肝癌细胞Bel-7402和SMMC-7721的迁移能力，而敲低SRF则显著抑制其迁移能力；过表达SRF可显著促进肝癌细胞上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）过程，而敲低SRF则显著抑制其EMT过程；临床相关性分析显示，SRF在肝癌组织中上调表达，且与肝癌患者的不良预后显著相关。结论 SRF可通过促进细胞EMT而增加肝癌细胞的迁移能力，从而发挥促癌基因的功能。

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多miRNA分子调控氧化应激相关基因DUSP1

杨玫

2018, 42(11): 0-0.

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目的筛选分析调控氧化应激相关基因DUSP1的miRNA分子，确定调控位点，探讨miRNA通过抑制DUSP1表达参与氧化应激调控的机制。方法本文通过荧光素酶报告基因方法筛选出能够调控DUSP1的miRNA，通过点突变及Western印迹等手段确定miRNA对DUSP1及下游靶分子的调控作用。结果发现miR-101、miR-133、miR-144可调控DUSP1的表达，确定了调控位点，并发现这些miRNA可通过抑制DUSP1蛋白表达水平提高氧化应激条件下ERK1/2的磷酸化水平。结论表明miR-101、miR-133和miR-144能够通过调控DUSP1，在氧化应激过程中发挥作用。

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实验研究

鼠疫耶尔森菌201菌株中重要代谢相关基因特定突变与其小鼠毒力的关系研究

宋凯,吕瑞辰,冯欢,肖丽生,颜焱锋,谭亚芳,崔玉军,杨瑞馥,宋亚军

2018, 42(11): 0-0.

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目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）201株aspA和glnK的单核苷酸多态性位点（SNP）及fyuA三碱基缺失与小鼠毒力的关系。方法通过基于自杀载体pDS132同源重组的无痕突变技术，分别构建了鼠疫菌201株的aspA和glnK两个基因的SNP位点突变株（201-aspATTG和201-glnKCCA）以及fyuA的GCA突变株（201-fyuAGCAdel），随后采用腹股沟皮下注射方式对小鼠攻毒，通过生存曲线确定以上基因中的突变对小鼠毒力是否有显著影响。结果生存曲线结果显示，201-aspATTG和201-glnKCCA 两株突变菌与野生型对小鼠毒力无明显差异；201-fyuAGCAdel 突变株在2周内不能对小鼠致死，与野生型毒力存在显著差异，且其质粒回补株对小鼠毒力恢复到野生型水平。结论该研究中所涉及的aspA和glnK的SNP突变不能使鼠疫菌201株对小鼠明显减毒，aspA和glnK的特定位点突变导致的蛋白活性差异可能与鼠疫菌201株对小鼠毒力无关，而fyuA的GCA缺失可导致鼠疫菌对小鼠的毒力明显下降，有必要对其内在机制进行深入研究。

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