军事医学

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中医针灸在军事医学中的应用

丁秀芳,洪远凯,张嵘,李维,柳皋隽,唐李斐,杨建茹,朱峻涛,杜鹏,韩鸿宾

2018, 42(10): 0-0.

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中医针灸在军事医学中的作用日益受到重视。本文回顾针灸在缓解疼痛、损伤康复、心理应激干预等方向的最新研究，在综述针灸和穴位研究的最新进展的同时，结合针灸在军事应用研究中存在的瓶颈问题，探讨未来发展趋势。

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综述

炎症因子在癫痫中的研究进展

吴海洋,张新定

2018, 42(10): 0-0.

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癫痫是一种神经元异常放电引起大脑功能障碍发作为特征的神经系统疾病，其病因多样，其中炎症反应与癫痫的发生发展关系密切。已有大量研究证实受损神经元组织中炎症细胞和分子调节机制紊乱是癫痫发生的关键因素。因此炎症因子如白介素、前列腺素、血小板活化因子、CD40与44、基质金属蛋白酶-9、toll样受体、趋化因子等可能通过不同的机制来创造有利于癫痫发作的微环境，使癫痫发作易感性增加。这些指标在癫痫发作过程中有着不同的变化。本文综述了可能参与癫痫发展的炎症因子，了解癫痫发生中炎症的生物学指标，以助于开发新的生物标志物，更好地筛选具有癫痫风险的患者，为预防和治疗癫痫提供新的选择。

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北京某大型军事集训任务疾病谱分析和防病建议

DongDerong

2018, 42(10): 0-0.

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目的分析部队官兵在北京某大型集训任务期间疾病发生情况，为遂行类似任务卫生保障工作提供参考依据。方法回顾2018年任务期间官兵的发病人次、疾病种类及构成等资料，对其进行统计分析，并比较发病率最高的六种疾病在任务两个不同阶段的变化情况。结果整个任务期间官兵昼夜发病率为48.1‰。呼吸系统疾病、损伤类疾病、消化系统疾病、皮肤病、口腔疾病是发病率最高的五大系统疾病；上呼吸道感染、咽炎、软组织损伤、变应性鼻炎、足癣、口腔溃疡是发病率最高的6种疾病，其中前4种疾病在集训任务两个不同阶段的发病率具有显著性差异（P<0.01）。结论室内集训任务发病以上呼吸道感染、咽炎、变应性鼻炎等疾病为主，呼吸道疾病是卫生防病保障工作的重点。

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实验研究

一种新型无标记白细胞计数检测系统设计

吕蒙

2018, 42(10): 0-0.

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目的白细胞总数是人体重要的生理指标，是临床检验的核心依据。针对基层医疗和灾害应急救援伤/病等条件下对设备便携和操作简便的要求，本文提出一种基于微流控芯片的“无标记”白细胞总数检测方法。方法以微流控芯片为检测载体，芯片内预封装溶血剂，将约10 μL新鲜血液注入芯片微腔中进行溶血处理；针对样本特性设计了前向散射光细胞成像光学系统，对于无染色标记的白细胞可获得高质量对比度图像；基于边界跟踪算法和分水岭算法原理优化了图像目标识别算法，实现黏连细胞分割和准确计数。结论实际血液样本测试表明，该系统与Sysmex XE-5000血液分析仪的结果一致性可达98.6%，在白细胞浓度≥3.0×109/L的重复性测试结果中CV值＜4.0%，线性相关系数R2=0.9996，主要技术指标均满足临床检验使用要求。

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基于情景模拟的生物恐怖事件预警能力需求评估

张斌

2018, 42(10): 0-0.

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能力需求评估是应对生物威胁能力体系设计的重要科学问题。从城市生物恐怖事件监测预警的能力需求出发，建立了中尺度生物气溶胶大气扩散模型，生物粒子沉降衰亡模型，吸入性炭疽感染的疾病状态转移模型，以北京市为例开展了情景模拟, 评估了不同预警延迟时间下开展医学救治对危害后果的减控效果。结果显示：事发后2天内发出预警并积极开展医学救治可有效减控大部分危害，而超过6天以上的预警延迟对危害控制作用较小，说明目前以病例监测为主的生物监测方式难以满足生物恐怖防御的需求，需要发展以环境监测为主的高效快速的预警手段。研究结果对于我国生物安全能力体系构建具有参考价值,研究思路对其它“小概率—高危害”型突发事件的应急能力评估具有借鉴意义。

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全球埃博拉应对及其对我国应对烈性传染病的启示

黄翠,马海霞,梁慧刚,袁志明

2018, 42(10): 0-0.

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始于2014年西非的的埃博拉疫情是一次全球关注的重大烈性传染病疫情，给人类造成了巨大的生命财产损失。疫情发生的过程中，国际组织及各国纷纷采取响应措施，积极预防和控制疫情的传播，主要包括发布指导性文件、援助西非疫情严重的国家、加强本国防范及开展检测、诊断和治疗方法研究等。文章分析全球应对埃博拉疫情的经验教训，由此提出我国未来应对烈性传染病疫情的建议。

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实验研究

基于遗传算法的弥漫大B细胞淋巴瘤识别深度网络模型自动压缩

任怀胜

2018, 42(10): 0-0.

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[摘要] 目的基于遗传算法，设计弥漫大B细胞淋巴瘤识别深度神经网络模型的自动压缩。方法鉴于目前深度神经网络的训练和模型压缩过程中涉及过多人为经验因素，我们提出根据已有数据集使用遗传算法自动迭代生成最适合的网络模型，自动去除原有网络模型冗余的节点和连接，使优化后的模型更加精简。本自动压缩算法在DLBCL数据集上进行了测试，通过计算进化后的最新一代的种群适应度，选择最大适应度的个体进行结构解析，得到最适合的网络结构。结果经过自动压缩算法的优化迭代，在基本保证原有网络模型识别精度的前提下得到了大幅度精简后的网络模型。通过解析适应度最高的网络模型可以看到，模型层数较最初模型更加精简，模型参数数量显著降低。结论该自动压缩方法使用遗传算法自动压缩并生成最适合的模型，简化了模型体量，提升了模型的运行速度，使之更加适合临床应用。

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基于Loxp-Cre系统的去泛素化酶OTUD4基因敲除小鼠模型的构建

QINshuxia

2018, 42(10): 0-0.

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[摘要] 目的应用Loxp-Cre系统构建去泛素化酶OTUD4基因敲除小鼠方法利用Loxp-Cre系统原理，将Otud4基因中的4号外显子选为打靶序列，将两个LoxP位点分别设在E4的两端，经打靶载体转入ES细胞、阳性克隆筛选、囊胚注射等过程，得到嵌合体小鼠，再将嵌合体小鼠与C57BL6小鼠交配进行繁育，最终得到杂合子小鼠并进行自交得到新生F1代小鼠。然后利用PCR进行基因型鉴定，使用免疫印迹（WB）技术从蛋白水平检测OTUD4在各组织器官中的表达，以明确基因敲除小鼠是否构建成功。对各基因型小鼠进行数目统计分析明确其是否符合孟德尔遗传定律，是否具有胚胎致死表型。解剖小鼠分析主要组织器官有无明显发育异常，利用HE染色分析是否具有自发的病理改变。通过葡萄糖耐受实验分析基因敲除小鼠是否具有代谢异常等。结果基因型鉴定和WB检测结果显示OTUD4基因敲除小鼠模型建立成功。杂合子小鼠自交后各基因型比例符合孟德尔定律，提示OTUD4基因敲除小鼠非胚胎致死。各组织器官大小无显著性差异，HE染色并无异常，且OTUD4基因敲除后不影响小鼠的血糖稳态。

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2016-2018年某海滨城市军队疗养院暑期餐用具消毒效果及食品安全风险监测结果分析

冯华,张传福,刘雪林

2018, 42(10): 0-0.

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摘要目的调查某海滨城市军队疗养院近三年暑期餐用具消毒及采购食品安全状况，为加强军队疗养院的有效监督管理提供依据。方法依据全军统一制定的监测计划，采用现场抽样的方法对疗养院的餐用具和食品原料进行检测。结果 2016～2018 年10家疗养院餐厅共抽检餐用具792件，合格735件，总合格率为92.80%；共抽检食品安全风险监测样品4012件，合格3912件，总合格率为97.51%，餐用具和食品安全风险监测样品的年合格率呈逐年升高的趋势。结论该部疗养院餐厅的餐用具消毒及食品安全风险监测样品的合格情况较好，三年间的合格率总体呈上升趋势，但仍存在不同程度的安全隐患，应进一步加强监管力度。

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软坚散结方对氟尿嘧啶在小鼠体内药动学影响及其抗肿瘤作用

赵秀梅

2018, 42(10): 0-0.

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目的探讨软坚散结方（RJSJ）对5-Fu药动学参数的影响，并考察RJSJ或/和5-Fu对艾氏(EAC)荷瘤小鼠生命延长的作用。方法建立小鼠血清中氟尿嘧啶（5-Fu）的HPLC分析方法，将小鼠随机分为5-Fu组和RJSJ+5-Fu组，按时间点采集血样处理并计算5-Fu的药动学参数。小鼠腹腔接种EAC细胞，建立移植肿瘤模型。将动物分为对照组、5-Fu组、RJSJ组和RJSJ+5-Fu组，记录动物的存活情况，计算中位生存期(MST)和生命延长率(ILS)。结果与5-Fu单独给药组相比，RJSJ能降低了Cmax，显著增MRT(0-∞) (P<0.05)。各给药组动物MST较模型对照组明显增加，5-Fu组、RJSJ组及RJSJ+5-Fu组动物ILS分别为31.82%、34.14%、45.45%。结论 RJSJ能影响5-Fu在小鼠体内的药动学过程，二者单用或合用均能抑制小鼠EAC腹水瘤的生长。

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实验研究

新型S1P1受体激动剂BAF-312的合成

左宗超

2018, 42(10): 0-0.

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目的：新型S1P1受体激动剂BAF-312的合成。方法以3'-溴-4'-甲基苯乙酮为原料，经过溴化、醇化、还原氢化等反应，得到化合物（4）;另4-氯-3-三氟甲基溴经过溴原子的取代，得到N-（4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基）-乙酰亚氨酸乙酯(5),化合物经过Friedel-Crafts 酰化反应后得到中间体（6），最后中间体（5）和（6）在酸性条件下生成中间体（7），继而与二氧化锰、氰基硼氢化钠等作用制得BAF312. 结果：经过一系列反应，合成出BAF312，其最终产率为19.2%。结论：本文合成方法原料廉价易得，合成出BAF312，成本较低，产率较高

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基于血液的3基因表达特征作为胃癌筛查的生物标志物

邵勇,郑越,马秋玲,林莉,周喆,王升启

2018, 42(10): 0-0.

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背景分析胃癌患者外周血细胞基因表达谱特征，筛选用于胃癌筛查的生物标志物。方法对21名胃癌患者和21名健康对照者的外周血样本进行RNA测序，利用生物信息学方法获取胃癌的基因表达谱特征。从胃癌的差异表达基因中筛选候选基因，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术在25名胃癌患者和48名健康对照者的外周血样本中进行验证。使用受试者工作特征曲线和二元逻辑回归分析评估差异表达基因筛查胃癌的潜力。结果在胃癌患者与健康对照者外周血测序样本中检测到1258个差异表达基因（642个基因上调，616个基因下调）。经过过滤后选择差异最显著的30个基因在新样本中进行qRT-PCR验证，其中3个基因（C1QB、MMP9和SMIM1）仍然具有差异性。二元逻辑回归分析显示3个基因联合鉴别胃癌的灵敏性为92%，特异性为72.92%，受试者工作特征曲线下面积为0.8717。结论我们的研究为胃癌筛查提供了一种有前途的非侵入性qRT-PCR检测方法，并筛选出3个差异表达基因作为潜在的标志物。

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实验研究

长链非编码RNA LINC00657作为ceRNA促进肝癌细胞的增殖和迁移

叶蓓玮

2018, 42(10): 0-0.

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目的研究长链非编码RNA（lncRNA）LINC00657在肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC；简称肝癌）中所发挥的生物学功能，明确LINC00657在肝癌中的表达情况及其与预后的关系。方法通过慢病毒包装的方法将稳定干扰LINC00657的短发夹RNA（Short hairpin RNA，shRNA）转染进肝癌细胞株Bel-7402和HepG2细胞系，筛选得到稳定干扰LINC00657的肝癌细胞系；采用瞬时转染pcDNA3.1(+)-LINC00657质粒的方法建立过表达LINC00657的Bel-7402细胞系；采用CCK-8、平板克隆和细胞迁移（Transwell）实验检测敲低和过表达LINC00657对细胞生长和迁移能力的影响；利用RNA pull-down实验确认LINC00657是否可以直接吸附miR-194；采用qRT-PCR和Western blot实验检测敲低LINC00657后miR-194靶基因的mRNA和蛋白水平变化；采用Log-rank检验比较LINC00657高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异。结果 LINC00657可显著促进肝癌细胞的增殖和迁移能力；与LINC00657的突变体序列相比，其野生型序列可显著富集miR-194；在敲低LINC00657的细胞中，miR-194的靶基因THBS1的mRNA和蛋白表达水平均显著下调；来自TCGA的数据分析显示，LINC00657高表达与肝癌患者的不良预后显著相关。结论 LINC00657可通过吸附miR-194上调THBS1的表达，从而促进肝癌细胞的生长和迁移。

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WDR12对胶质瘤干细胞的增殖和自我更新的影响

lida

2018, 42(10): 0-0.

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[摘要] 目的研究WDR12对胶质瘤干细胞（Glioma Stem Cell，GSC）增殖和自我更新的影响，从而为治疗这一恶性疾病提供新的思路和方法。方法构建pLKO-Tet-On-shWDR12慢病毒质粒，并借助慢病毒感染细胞的操作方法，使用2个不同的干涉序列在GSC中干涉该蛋白的表达。随后通过western检测WDR12蛋白干涉效果；通过测定干涉后细胞活力以反映敲低WDR12蛋白对GSC增殖能力的影响；通过sphere形成实验来观察敲低WDR12蛋白对GSC自我更新能力的影响。结果成功构建了pLKO-Tet-On-shWDR12慢病毒质粒，2条干涉序列均能在GSC中显著降低WDR12蛋白的表达。并且在敲低WDR12蛋白后，GSC的细胞活力和sphere形成能力均受到显著抑制。结论敲低WDR12蛋白能显著抑制GSC的增殖和自我更新。

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实验研究

Bacteroides coprocola菌β-葡萄糖苷酶基因的表达纯化及活性测定

HanYang

2018, 42(10): 0-0.

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目的：构建Bacteroides coprocola(B. coprocola)菌β-葡萄糖苷酶基因的原核表达载体，纯化该β-葡萄糖苷酶，检测其水解不同底物的能力。方法：以NCBI中提供的B. coprocola菌β-葡萄糖苷酶基因序列为参考，合成出该基因的全长序列，测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-4T-1中；以IPTG诱导表达，并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白；SDS-PAGE和Western印迹检测β-葡萄糖苷酶基因的表达情况，并通过不同底物检测其活性并比较方法的优劣。结果：PCR扩增结果与双酶切实验表明原核表达载体构建成功；Western印迹结果显示β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中特异表达；酶活性实验表明B. coprocola菌β-葡萄糖苷酶在对硝基苯-β-D-葡萄糖苷 (pNPG)和京尼平苷中均有活性。结论：用两种底物成功检测出纯化的B. coprocola菌β-葡萄糖苷酶的活性，为进一步研究其功能奠定基础。

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敲除ABRO1不影响小鼠肝脏巨噬细胞的重建

wangyu

2018, 42(10): 0-0.

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摘要: 目的建立一种高效清除并重建肝脏巨噬细胞的方法，检测敲除ABRO1对肝脏巨噬细胞重建的影响。方法 8周龄CD45.1亚型的C57BL/6J小鼠，尾静脉注射氯氟松清除肝脏巨噬细胞，钴源照射后，移植Abro1+/+ 或Abro1-/-小鼠（CD45.2）骨髓，8周后分离小鼠肝脏非实质细胞，流式分析检测肝脏巨噬细胞的重建效率。结果常规骨髓移植后，肝脏中单核来源巨噬细胞（CD11bhiF4/80lo）重建率高达90%，但kupffer细胞（CD11bintF4/80hi）的重建率只有约10%；提前注射氯氟松后再进行骨髓移植，肝脏中单核来源巨噬细胞和kupffer细胞的重建率都达到90%以上。利用氯氟松清除肝脏巨噬细胞后再进行骨髓移植的方法，检测发现敲除ABRO1并不影响肝脏巨噬细胞的重建。结论通过采用尾静脉注射氯氟松联合骨髓移植的方法，成功建立了一种安全、高效清除并重建肝内巨噬细胞的方法。利用该方法明确了敲除ABRO1并不影响肝脏巨噬细胞的重建。

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