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    朱亚芳
    2015, 39(10): 0-0.
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    摘要:目的:探讨川芎嗪联合顺铂对抑制小鼠Lewis肺癌血管生成的作用机制并观察各组中90K、VEGF的表达及相互关系,初步探索90K抑制肺癌血管生成的机制。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,40只小鼠按随机数字表随机分为4组:生理盐水组(NS组)、川芎嗪组(TMP组)、顺铂组(DDP组)、川芎嗪联合顺铂组(TMP+DDP组),每组10只,于接种后14天给予药物干预,每日测量瘤体长短径计算肿瘤体积,连续用药14天后处死小鼠,处死后剥离皮下肿瘤称重并计算抑瘤率。采用免疫组化、Western blot方法检测VEGF、90K的表达。结果:与NS组相比,TMP组、DDP组、TMP+DDP组的瘤体增长均减慢,TMP+DDP组瘤体增长减慢最明显。TMP组、DDP组、TMP+DDP组抑瘤率分别为25.57%、45.24%、66.5%。NS组中,VEGF与90K表达成正相关(免疫组化r=0.653,p=0.041,Western blot r=0.713,p=0.021)。与NS组相比,VEGF、90K在TMP组、DDP组、TMP+DDP组表达均降低(P<0.05),TMP+DDP组表达明显低于TMP组和DDP组(P<0.05)。两种试验方法结果一致。结论:川芎嗪可抑制Lewis肺癌移植瘤生长,抑制其血管生成,与顺铂联合可提高化疗效果并改善小鼠生存状态,其作用机制可能是通过抑制90K、VEGF表达抑制肿瘤血管生成。
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    温亮,范顺良
    2015, 39(10): 0-0.
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    本文通过对我军疫情监测发展历程和现状进行梳理分析,指出当前我军疫情监测工作存在监测内容不够全面、监测方式较为单一、监测技术不够先进、疫情发现不够敏锐、疫情预测能力薄弱、疫情报告受到行政干预六大问题,疫情监测的发展方向在于开展综合监测,拓展疫情监测内涵;加强主动监测,完善疫情监测方式;加快信息化建设,创新疫情监测技术;提高诊断水平,提升疫情识别能力;完善制度建设,强化疫情报告意识。
  • 实验研究
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    张山锋,刘珍星,叶志伟,杨钟华
    2015, 39(10): 0-0.
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    目的 建立一种多报告基因稳定标记的骨肉瘤细胞株,并利用该细胞株建立骨肉瘤原位移植裸鼠模型,用于监测体内肿瘤的生长以及药物的评价。方法 用慢病毒作为载体,将同时携带荧光蛋白和荧光素酶的基因转到U2-OS骨肉瘤细胞中,筛选稳定细胞株,将细胞原位移植到裸鼠的胫骨,通过活体成像观察骨肉瘤在裸鼠体内的生长转移。结果 荧光标签能够稳定的在细胞中表达,通过活体成像能够观察到骨肉瘤在裸鼠体内的生长转移。结论 成功建立了一种实时监测骨肉瘤在小鼠体内生长转移的模型,为骨肉瘤的机制研究和体内药物评价提供了一种理想的平台。
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    孙魁
    2015, 39(10): 0-0.
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    重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),是Piepenburg等于2006年首先提出的一种新型的恒温核酸扩增技术,它最显著的优势就是可以在25℃-43℃的恒温下实现特定核酸序列的扩增,并且能够在5-20分钟内观察结果。RPA技术设备要求低,扩增过程不仅可以采用传统的反应管,而且可以在纸片等反应载体上进行。通过结合探针或横向流动试纸条等方法,可实现扩增产物的定量分析或可视化判别。RPA作为一种操作简便,反应快速,灵敏度高,特异性强,无需精密仪器的检测技术,是目前最有潜力成为快速分子诊断的工具,其在床旁诊断及防疫现场检测中都具有良好的应用前景。
  • 论著
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    李健杰
    2015, 39(10): 0-0.
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    目的 推进高原军事医学技术向卫生勤务应用的转化。方法 借助先进的信息技术构建高原军事医学数字资源库。结果 在分析高原军事医学数字资源库的功能需求和关键技术的基础上,系统整合Web3.0相关技术,提出了高原军事医学数字资源库设计原则,设计了资源库的层次化软件架构模式并提供了相关软件支撑技术,讨论了高原军事医学领域本体的构建方法。结论 通过相关技术的整合应用,实现高原军事医学数字资源利用的智能化和内容管理模式的社会化。
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    袁新春
    2015, 39(10): 0-0.
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    [摘要] 目的:应用实时三维超声心动图(real-time three-dimensional echocardiography,RT-3DE)技术,探讨经胸实时三维超声心动图(RT-3DE)在诊断心脏病中的应用价值。方法:选取2009年10月-2014年2月在我院住院的92例心脏病患者,全部患者进行RT-3DE 检查,通过对感兴趣区病变结构三维图像进行切割及旋转后处理,对病变作出诊断,并与常规二维超声心动图检查图像进行对比,评价其准确性和优越性。结果:RT-3DE对92例心脏病患者均成功采集三维图像,对病变结构能立体、直观地从各个角度得到显示,正确诊断病变的部位、范围和程度及与邻近组织结构的空间位置关系,获得常规二维超声无法得到的切面观,较二维超声提供了更直观、准确、丰富的信息。本组92例患者均已行磁共振或手术治疗得到证实。结论:RT-3DE操作简便,成像速度快,提高了诊断正确率,可作为二维超声心动图的有益补充,在临床对心脏病的诊疗中具有广阔的应用前景。
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    徐婷婷
    2015, 39(10): 0-0.
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    【摘要】目的:构建enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 T3SS效应蛋白NleF敲除菌株和回复菌株,研究其对细菌生长和细胞死亡的影响。方法:利用λ-Red同源重组的方法构建NleF基因敲除菌株ΔNleF;将pET-24a(+)-NleF重组质粒导入敲除菌感受态细胞中构建回复菌株ΔNleF/NleF。将野生株、敲除株和回复株分别用LB和DMEM(10%FBS)培养,每隔一小时测定OD600,绘制生长曲线;分别用三种菌株感染Hela细胞,用细胞毒性试剂盒检测上清中LDH的释放量,计算细胞毒性。结果:成功构建NleF敲除菌株ΔNleF和回复菌株ΔNleF/NleF;野生株,敲除株和回复株三者的生长速率无明显差异;与野生株相比,ΔNleF感染Hela细胞后,细胞毒性增加,ΔNleF/NleF感染后Hela细胞毒性与野生株相当。结论:肠出血性大肠杆菌O157:H7 T3SS效应蛋白NleF对细菌的生长无明显影响,但可能抑制由细菌感染引起的宿主细胞死亡。
  • 综述
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    张耀
    2015, 39(10): 0-0.
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    白细胞介素24(IL-24)能够在体内外特异性抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有影响,在肿瘤治疗方面具有诱人前景。以腺病毒为载体的基因工程疗法自身的局限性限制了IL-24的临床应用,而蛋白药物与之相比具有无可比拟的优势。本文阐述了IL-24基因工程蛋白的研究进展。
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    徐聪
    2015, 39(10): 0-0.
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    为全面把握慢性疲劳综合征(CFS)的发展历程,探测研究热点及前沿,本文以 Web of Science 数据库中2000-2014年发表的3723篇CFS研究论文为对象,以文献计量学的理论为指导,借助图谱可视化技术软件CiteSpaceⅢ绘制图谱,获得研究国家和核心作者的合作图谱、文献被引及聚类图谱、高频主题词的共现及词频变动趋势图谱。分析显示CFS的学术群体主要分布在美国、英国等西方发达国家;研究热点经历了病例特征、影响因素、发病机制及治疗方法的探索历程。目前,其研究前沿为病原体感染的病因学说,以及CFS相似性慢性疾病的症状、病理生理学机制的分析。
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    YuZhoulong
    2015, 39(10): 0-0.
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    肠道微生物对人体健康有着重要的作用,与营养物质吸收和肥胖、糖尿病等代谢性疾病关系密切[1]。从肠道微生物的角度研究疾病发生及防治方法已成热点。高等动物为模型存在个体差异大、肠道微生物种类繁多、数量庞大、影响因素多变等弊端。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称线虫)是研究肠道微生物和宿主之间相互作用的良好模式生物,其以大肠杆菌为食物,具有生长周期短、表型易于观察、可实现药物的高通量筛选等优点。本文就秀丽线虫在肠道微生物与宿主共生关系方面的研究阐述相关进展。
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    wangrong
    2015, 39(10): 0-0.
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    真核生物的蛋白质翻译后修饰是蛋白质质量控制和稳定性调控的重要因素。其中由泛素和类泛素蛋白介导的修饰广泛参与到亚细胞定位、细胞周期和细胞代谢等多方面调控中,经典的修饰蛋白包括Ub、Sumo、Nedd8、FAT10等。近几年来,由类泛素蛋白SUMO介导的翻译后修饰动态平衡调控逐渐成为研究热点。本综述系统总结了整个SUMO系统的催化反应动态机制和平衡调控原理,并对去SUMO酶SENP1与肿瘤发生、免疫调控和发育稳态维持的关系进行总结。
  • 实验研究
  • 实验研究
    LUYuming
    2015, 39(10): 0-0.
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    目的:研究TGFβ-smad信号通路在阿司匹林抑制大鼠心肌成纤维细胞增殖中的作用机制。方法:0.08%胰酶消化1~3d SD新生大鼠,差速贴壁法纯化SD新生大鼠原代心肌成纤维细胞。正式实验采用培养的2~3代成纤维细胞,分为4组,空白对照组为DMEM培养液,模型组为醛固酮1×10-8 mol/L,阿司匹林组为1.11×10-6 mol/L,阳性对照组螺内酯1×10-6 mol/L。HE染色法观察各组心肌成纤维细胞形态学变化;Western blotting分析Smad2、3、4的蛋白的表达。结果:HE染色结果显示,与对照组相比,醛固酮1×10-8mol/L可使细胞增生活跃,分裂相细胞显著增多(P<0.01);与醛固酮组相比,阿司匹林1.11×10-6 mol/L使细胞分裂显著减少(P<0.01)。Western结果显示,以醛固酮1×10-8mol/L刺激心肌成纤维细胞后,Smad 2、Smad 3及Smad 4蛋白水平明显增高,以阿司匹林1.11×10-6mol/L及阳性对照药物螺内酯 1×10-6mol/L 干预后,Smad2、Smad 3及Smad 4蛋白水平表达较醛固酮组明显降低,均有显著性差异(P<0.01、P<0.05)。结论:阿司匹林可以抑制心肌成纤维细胞的增殖,其作用与抑制Smad2、3、4的蛋白表达相关。
  • 实验研究
    崔海洋
    2015, 39(10): 0-0.
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    [摘要] 目的 探讨短时间内反复冷空气吸入刺激对活体动物肺内TRPA1通道相关炎性因子的影响。方法 雄性Wistar大鼠20只,随机分为4组,每组5只。分别为:大鼠气管插管冷空气吸入组、气管插管暖空气吸入组、TRPA1通道激动剂丙烯醛雾化吸入组、正常组。采用PCR方法明确肺脏TRPA1的表达情况后,观察反复短时间冷空气吸入刺激对大鼠肺内TRPA1通道相关炎症细胞炎性因子白介素1β(IL-1β)、白介素5(IL-5)、中性粒细胞趋化因子(CXCL-1/KC)mRNA表达的影响。结果 TRPA1在大鼠肺组织中有表达,短时程冷空气刺激组大鼠肺组织中的IL-1β、IL-5、CXCL-1/KC mRNA的表达量均较暖空气吸入组及正常对照组升高(P<0.05,n=5),TRPA1通道阳性激动剂丙烯醛吸入组也出现相似结果。结论 在活体动物层次上,我们推测,当肺部受到短时间的有害低温(低于17℃)刺激后,使TRPA1活化,致使肺内一些炎性因子表达增加。TRPA1通道可能是冷刺激诱发气道高反应乃至哮喘病预防及治疗的潜在靶点。
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    李瑞花
    2015, 39(10): 0-0.
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    目的 利用CRISPR/Cas9技术建立人RNase L基因稳定敲除的细胞株。 方法 根据GenBank中RNase L基因序列,设计RNase L敲除的sgRNA序列,将其克隆到pCas-Guide真核表达载体中,获得pCas-gRNA载体;设计供体 DNA 的同源臂序列,通过搭桥PCR将左同源臂、潮霉素B抗性基因和右同源臂扩增成为一条片段作为同源重组的修复模板,并将其克隆到pBackZero-T表达载体上,获得pBackZero-T-RNase LK载体。将上述两个载体共转染HEK293细胞,用潮霉素B筛选,通过western blot和DNA测序等技术验证RNase L从基因组上敲除。 结果与结论 成功构建了pCas-gRNA载体和pBackZero-T-RNase LK载体,western blot和DNA测序结果表明,成功获得5株RNase L缺失的细胞株,为探讨RNase L的生物学功能和研究其分子机制奠定了基础。
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    高哲
    2015, 39(10): 0-0.
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    [摘要] 目的 通过给予糖耐量正常受试者不同类型脂肪酸饮食,探讨其对肠促胰岛素、胰岛β细胞功能的影响。方法 健康受试者经标准饮食洗脱1周后,随机接受高饱和脂肪酸饮食、高不饱和脂肪酸饮食作为早餐摄入,每组饮食间隔期采用标准饮食洗脱1周。分别测定进餐后0分钟、30分钟、60分钟、120分钟、180分钟、240分钟血糖、血脂、游离脂肪酸、胰岛素、抑胃多肽(gastric inhibitory polypeptide, GIP)和胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)水平。评估不同类型脂肪酸对肠促胰岛素、胰岛β细胞功能的影响。结果 1.曲线下面积分析。进餐后HSF组、HMF组血糖水平无明显改变,两组间无统计学差异(P>0.05)。HSF组与HMF组相比AUCins240min增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HSF组与HMF组相比AUCTG30min及AUCTG240min均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HSF组与HMF组相比AUCFFA240min增高,差异有统计学意义(P<0.05)。进餐后HSF组与HMF组相比AUCGIP30min、AUCGIP240min均减低,差异有统计学意义(P<0.05)。HSF组与HMF组相比AUCGLP-1 30min、 AUCGLP-1 240min均减低,差异有统计学意义(P<0.05)。胰岛β细胞功能指数分析。两组间ΔI30/ΔG30无统计学差异(P>0.05)。HSF组与HMF组相比AUCI/AUCG增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1. 不同类型脂肪酸饮食可影响GIP、GLP-1分泌及胰岛功能变化。2.高不饱和脂肪酸饮食促进GIP、GLP-1分泌作用最明显,但高饱和脂肪酸饮食可促进更多胰岛素的分泌,胰岛β细胞功能指数也明显增高。 [关键词]胰高血糖素样肽-1;抑胃多肽;饱和脂肪酸;不饱和脂肪酸 Effects of dietary fat acids on incretin and islet function Gao Zhe, Yan Xiaolu, Song Guangyao, Ma Huijuan, Dong Chunxia [ABSTRACT] Objective To explore the effect of dietary fat acids on incretin and islet function in healthy adults. Methods Before each test, healthy subjects received a 1-week pre-experiment eucaloric diet. In a randomized order each subjects consumed the two meals containing different fat acids, including high saturated fat acid (HSF) and high monounsaturated fat acid (HMF), on two separate occasions with a minimum 1-week washout among meals. At 0,30,60,120,180 and 240 minute following meal intake, plasma concentrations of gastric inhibitory polypeptide(GIP), glucagon-like peptide-1(GLP-1) and serum concentrations of glucose, insulin, triglyceride(TG) and free fatty acid (FFA) were measured. Results Analysis of the areas under the curve of glucose, inslulin, TG, FFA, GIP and GLP-1. Postprandia glucose did not increase significantly following HSF and HMF meals (P>0.05). Comparing with HMF meal, significant increase in AUCins240min was observed following HSF meal (P<0.05). AUCTG30min and AUCTG240min were significantly higher following HSF meal as compared with HMF meal (P<0.05). And AUCFFA240min was significantly higher following HSF meal as compared with HMF meal (P<0.05). Compared with HMF meal,a significant decrease in AUCGIP30min and AUCGIP240min was found following HSF meal (P<0.05). Compared with HMF meal, significant decrease in AUCGLP-1 30min and AUCGLP-1 240min was found following HSF meal (P<0.05). 2.Additionally,the empirical indexes of postprandial βcell function were assessed. No significant difference was observed inΔI30/ΔG30 following HSF and HMF meals (P>0.05). AUCI/AUCG was significantly lower following HMF meal as compared with HSF meal (P<0.05). Conclusion 1.In conclusion, this study demonstrates that circulating GIP,GLP-1 andβcell function are affected by the dietary fat acids in healthy adults.2.HMF meal may stimulate GIP and GLP-1 secretion to a higher extent than HSF meal.But HSF meal promotes postprandial elevations in insulin and indexes of postprandial βcell function. [Key words] glucagon-like peptide-1, gastric inhibitory polypeptide, saturated fat acid, monounsaturated fat aci
  • 技术方法
  • 技术方法
    吴金龙,杜耀华,陈锋,乔龙学,韦婧,李辰宇,吴太虎
    2015, 39(10): 0-0.
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    生物战剂的快速检测在生物反恐体系中具有重要意义。基于聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)的核酸检测技术可通过检测生物战剂基因组中特定的DNA片段确定其种属,该技术具有高灵敏度、高特异性的优点,是生物检测的“金标准”。然而PCR技术在现场应用中常受到核酸扩增系统的反应速度、便携化程度等问题的限制。该文研究设计一种小型化核酸扩增系统其体积参数为80mm×40mm×20mm(长×高×宽),通过热力学仿真和温度循环实验验证核酸扩增系统内部温度均匀度为0.8℃,平均升温速度为10℃/s,平均降温速度为5℃/s;与标准PCR仪进行对比实验得知该系统扩增效果良好,满足初步设计需求。
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    wangYQ
    2015, 39(10): 0-0.
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    大剂量甲氨蝶呤能通过血脑屏障,已成为目前治疗原发中枢神经系统的淋巴瘤及存在中枢神经系统侵犯的侵袭性淋巴瘤的主要化疗方案[1]和最为有效的化疗方法[2] ,但由于化疗周期较长,剂量大,患者个体等存在差异,其毒副反应也较常见,严重者可危及生命 [3,4]。常见的不良反应有骨髓抑制、胃肠道反应、皮肤黏膜损害及肝功能损害,但是发生在手指的皮肤不良反应较少见。现报道1例甲氨蝶呤治疗淋巴瘤致罕见皮肤不良反应及其护理。
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    蔡亚娜亚娜
    2015, 39(10): 0-0.
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    乳腺淋巴瘤
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    王先文
    2015, 39(10): 0-0.
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    流式数据分析的主要过程是对样本数据中的细胞进行类群划分。由于传统人工分析数据方式的缺点,提出了一种快速自动数据分析方法。不同于人工二维逐次投影设门分析方法,该方法基于冗余的K-means聚类结果,通过同类细胞亚群合并方式实现多维流式数据直接分析。针对流式数据的特点,提出核密度估计初始化类群数目和k-d树优化算法效率。对冗余的聚类结果,提出两段回归拟合算法确定最优分类。实验结果表明,相比基于概率聚类方法和非概率聚类方法,该方法不仅能够快速对多维流式数据进行直接分析,而且分析结果更准确,误判率更低。
  • 短篇报道
  • 短篇报道
    董建光
    2015, 39(10): 0-0.
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    氨氯地平是长效二氢吡啶钙通道阻滞剂。目前临床广泛应用于治疗高血压、心绞痛等循环系统疾病。在药理作用方面,氨氯地平可以选择性地阻止心脏及血管平滑肌细胞外的钙离子进入细胞内,从而可以松弛心脏及血管的平滑肌。常规剂量下使用,对肾小球系膜有保护作用,可保护肾功能。过量中毒时主要通过扩张外周血管平滑肌,心功能抑制,致机体出现相对或绝对的循环容量不足,进一步可以出现顽固性低血压,并可导致肾功能损伤。该病例为一例口服大量苯磺酸氨氯地平片致休克、尿崩症,经保守治疗痊愈。