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    单浩洋,赖西南,赖西南,赖西南,郑然,郑然,郑然
    2017, 41(3): 0-0.
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    未来海战中,反舰导弹将作为交战双方的主要作战武器。掌握反舰导弹打击舰船后的伤亡情况及伤员伤情分布对卫勤保障建设有着重要意义。本文通过历史数据收集及文献查阅,对二战以来的有关资料进行了整理分析。统计结果显示反舰导弹造成的伤亡比例增高,受打击舰船沉没的几率减小;在未来的医疗救治中,要着重关注炸伤、烧伤、吸入伤、贯通伤的救治,同时,也应警惕海水浸泡伤对伤员的危害。
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    赵润州,徐卸古
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的 从技术管理和情报研究角度评估经颅磁刺激技术的研究活跃度、技术成熟度以及发展现状,以期为该技术的研究与临床应用、技术评估实证研究提供参考和借鉴。方法 选取经颅磁刺激技术的文献和专利数据作为研究样本,综合采用统计分析、社会网络分析等方法,运用Bicomb、Loglet Lab和UCINET软件,进行数据统计分析、网络图谱绘制等。结果 经颅磁刺激技术当前具有较高的研究活跃度,技术发展处于第2阶段由成长期向成熟期的过渡时期。技术的研究方向分散、深度不足,核心主题仍然缺乏。现阶段研究热点将为经颅磁刺激技术的临床应用提供支持。结论 在下一发展阶段,经颅磁刺激技术机理机制的解析、神经生物效应研究等主题有望成为研究热点。技术评估实证研究中,应加强多维度数据的挖掘与分析,引入专家咨询法。
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    张娜娜
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的:制备含有圣路易斯脑炎病毒prM基因片段的假病毒颗粒,提供安全、可靠、稳定的核酸阳性质控品。方法:根据Armored RNA技术原理,构建携带含有圣路易斯脑炎病毒prM基因片段的重组质粒pSE380-MS2-SLEV,转化大肠杆菌后,利用IPTG进行诱导表达,三氯甲烷法纯化后利用透射电镜观察重组假病毒颗粒形态。通过DNase I和RNase A双酶消化实验评价重组假病毒颗粒的核酸酶耐受性,并结合温度敏感性实验分析假病毒颗粒中核酸片段的稳定性。最后,利用建立的荧光定量 RT-PCR法对该假病毒颗粒进行验证。结果:PCR扩增和测序分析显示,prM基因片段正确克隆至载体pSE380-MS2。经大肠杆菌表达可形成直径约为25nm的均一的球形重组假病毒颗粒。核酸酶消化实验和温度敏感性实验表明假病毒样颗粒包装的病毒核酸能够耐受核酶的降解,37℃条件下存放20天仍保持稳定。荧光定量RT-PCR检测该假病毒颗粒检测限可达1.8×103 copies/ml,且与同属的其他病毒无交叉反应。结论:本研究成功构建了含有圣路易斯脑炎病毒prM基因片段的假病毒颗粒,具有良好的核酸酶耐受性和稳定性,可作为核酸阳性质控品对核酸提取与检测过程进行全程监控。
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    王静
    2017, 41(3): 0-0.
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    摘要:目的 探讨rs6788895、rs10941679、rs889312、rs13387042、rs6504950、rs17530068和rs2284378,7个位点的单核苷酸多态性与回汉族女性乳腺癌易感性的关系。方法 采用以医院为基础且以年龄和民族为频数匹配条件的病例-对照研究方法,研究对象来源于宁夏医科大学附属总医院的患者。结果 1.本次研究共收集研究对象450人,其中病例组与对照组研究对象在年龄(病例组:48.27±9.27,对照组:48.48±9.36;t=0.238,P=0.812)和民族(病例组中汉族181人,回族44人;对照组中汉族184人,回族41人;χ2=0.131,P=0.718)间的分布无统计学差异。2.研究对象符合Hardy-Weinberg平衡定律。3.回汉族中rs6788895、rs10941679、rs889312、rs13387042、rs6504950、rs17530068和rs2284378位点的基因型频率及等位基因频率在病例组与对照组间的分布差异均无统计学意义。4.回汉族7个位点的不同基因型间的乳腺癌发病风险之间均无统计学差异。结论 rs6788895、rs10941679、rs889312、rs13387042、rs6504950、rs17530068和rs2284378,7个位点的单核苷酸多态性与回汉族女性乳腺癌的发生可能不相关。
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    叶向阳
    2017, 41(3): 0-0.
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    摘要:目的 探讨髂腰固定治疗合并骶骨骨折的骨盆后环损伤的临床疗效。方法 回顾性分析2011年1月-2013年12月期间我院骨科收治的合并骶骨骨折的骨盆后环损伤患者21例,均采用后路髂腰固定术。结果 21例均获得随访,时间6-18个月,X线片提示骨折愈合良好。术后Gibbons评分为1. 4 --2.56分。其中10例神经功能完全恢复(术前2. 9分,术后1. 2分),3例明显改善(术前3.5分,术后1. 9分,1例效果差(术前3.9分,术后2. 59分)。均无切口感染、钉棒断裂、退钉、骨折再移位等并发症。结论 髂腰固定可有效复位、固定合并骶骨骨折的骨盆后环损伤,达到三维固定,恢复骨盆本身及脊柱-骨盆的稳定性,对于合并腰骶神经根损伤者宜同时早期行减压手术。
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    王朋
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的 分析原发性闭角型青光眼术后发生恶性青光眼危险因素,以期为临床诊疗提供参考。方法 回顾性分析2013年1月至2016年6月在我院接受抗青光眼手术的PACG患者的临床资料。依据患者术后是否出现恶性青光眼将患者分为2组,其中出现恶性青光眼的患者作为观察组;未出现恶性青光眼的患者作为对照组。结果 共纳入患者238例315眼,其中观察组共17例22眼;对照组共221例293眼。观察组患者的眼轴长度、前房深度、晶体厚度均显著小于对照组患者(P<0.05)。单因素分析显示:年龄<50岁、术前持续高眼压、眼轴长度<22mm、前房深度<2mm、晶体厚度<4.5mm、房角完全关闭、慢性闭角型是影响患者术后并发恶性青光眼的可能危险因素(P<0.05)。Logistic回归分析发现:年龄<50岁及眼轴长度<22mm是PACG术后出现恶性青光眼的独立风险因素(P<0.05)。结论 年轻患者、术前眼压较高,眼轴较短、前房较浅、晶体较薄、房角关闭、慢性闭角青光眼的PACG患者在术前易出现恶性青光眼并发症。尤其是年轻患者及眼轴较短患者应予以重视。
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    段临林
    2017, 41(3): 0-0.
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    无线通讯技术的迅猛发展使人们暴露在几乎无处不在的射频(RF,100 kHz ~300 GHz)电磁场中,引发了人们对其可能产生健康风险的担忧。流行病学调查发现长期的手机使用与脑肿瘤发生之间存在相关性。肿瘤形成与遗传信息改变存在着密切联系,因此手机辐射以及其他射频设备辐射能否导致遗传物质的损伤成为当前研究重点。许多研究发现射频不会导致遗传物质损伤,同时也有人得出了相反的结论。本文综述了射频电磁辐射遗传学毒性的研究进展,并提出了其造成遗传物质损伤一种可能的机制。 The public are exposed to the ubiquitous radiofrequency(RF,100 kHz ~300 GHz) electromagnetic fields because of the mushroom development of wireless communications. Along with it, concerns about the possible hazards of RF radiations have being growing. Epidemiological investigation showed that long-term use of cellphones increases the risk of brain tumors. Since genetic damages are closely related to tumors, researchers have being focusing on finding if cellphones and other RF devices are genotoxic. But the investigations have yielded both negative and positive results. This review summarizes the recent researches about genotoxicity of RF radiations and brings a possible mechanism of how RF radiations cause genetic damages.
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    王兰东
    2017, 41(3): 0-0.
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    [摘要] 目的 获得靶向人Her2的纳米抗体。方法 使用重组人Her2蛋白免疫羊驼,分离免疫后羊驼的淋巴细胞提取总RNA,利用PCR技术扩增羊驼IgG的可变区(VHH)基因片段,构建噬菌体表面展示的纳米抗体文库,采用Her2抗原对文库进行亲和筛选,将筛选到的克隆转化大肠杆菌BL21 ( DE3 ),IPTG 诱导表达重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体并用ELISA技术和Biacore检测其与抗原Her2的亲和力,采用免疫组化的方法检测Her2阳性乳腺癌组织中Her2的表达。结果 第二轮筛选后得到两个抗体H3和H5,ELISA结果显示两者都具有抗原结合活性,其中H5的亲和力达到了8.106×10-10M。H5可以识别乳腺癌组织中Her2抗原的表达。结论 从Her2免疫的羊驼体内,通过噬菌体展示技术筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗Her2纳米抗体,可用于乳腺癌的病理诊断。 [关键词] Her2;纳米抗体;噬菌体展示技术;乳腺癌诊断。
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    洪一平
    2017, 41(3): 0-0.
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    [摘要]:目的构建炭疽芽胞杆菌sigF基因缺失株,分析缺失株表型特点并明确sigF基因对芽胞形成的影响,为后续的研究提供基础。方法采用同源重组技术在炭疽芽胞杆菌A16D2(pXO1+pXO2-)菌株sigF基因处插入壮观霉素抗性基因,取代sigF基因,构建了sigF基因缺失突变株。通过生长曲线测定、糖代谢能力比较、显微镜观察芽胞形成及微流控实验实时观察细胞生长等方法分析了突变株的特点。结果获得了炭疽芽胞杆菌A16D2菌株sigF基因缺失突变体,生长曲线测定表明,突变株较出发菌株在繁殖体阶段生长状态没有明显差异;糖代谢实验表明,突变株与出发菌株在对碳水化合物的利用上差异不大;显微镜观察显示,突变株丧失了形成芽胞的能力;微流控实验观察显示,缺失株细胞保持在不对称分裂的状态。结论成功的获得了炭疽芽胞杆菌A16D2sigF基因缺失突变株,本研究证明sigF基因为炭疽芽胞杆菌形成芽胞所必需,但不是细胞生长所必须的因子。 [关键词] 炭疽杆菌;芽胞;sigF;突变体 Construction of sigFDeletion Mutant of Bacillus anthracis and the effect on formation of spore [Abstract] Objective Construction of sigF deletion mutant of Bacillus anthracisand analyzing theeffect of losing sigF on formation of spore. Methods The spectinomycinadenyltransferase gene(spc) was inserted to replace sigF of Bacillus anthracis by the homologous recombination. Analysis the characters of mutant by measuring growth curves, comparison of ability of carbohydrate metabolism, and observation of spore formation with a microscope. Results The sigFdeletion strain A16D2△sigF was constructed from A16D2. Compared with the wild type A16D2, A16D2△sigF had a similar growth rate in logarithmic phase; A16D2△sigF had no significant difference with the initial strain on the ability of using carbohydrates. A16D2△sigF was lack of ability to form spore. The strain was found maintaining the state of asymmetric division by microfluidics experiment. Conclusion It is showed by this studythatsigFwas the essential gene of Bacillus anthracis for spore formation, but not necessary for vegetative growth. [Key words] Bacillus anthracis; spore; sigF; mutant
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    ChenXing
    2017, 41(3): 0-0.
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    昼夜节律使机体生理、生化、行为等生命现象表现为以大致24小时为周期的振荡规律,受一系列生物钟基因(bmal1、clcok、cry、per)和钟控基因(rev-erb?、ror?、dbp、tef、hlf等)调控。生物钟基因广泛存在于机体各免疫器官、组织和细胞中,使得免疫细胞功能(迁移和趋化,吞噬、杀伤活性等)及多种免疫参数(循环免疫细胞及其亚群的相对和绝对数量、细胞因子水平等)呈现显著的昼夜节律性变化,从而在维持免疫稳态中发挥重要作用。此外,一些免疫相关疾病也与昼夜节律和生物钟系统异常密切相关。本文将着重阐述昼夜节律及生物钟系统对免疫细胞功能的影响及其在一些免疫相关疾病中的作用。
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    刘雯辉
    2017, 41(3): 0-0.
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    近年来,随着全基因组关联研究在全球范围内热度的不断攀升,人们逐渐把目光聚焦于疾病的遗传和基因多态性。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism SNP)是人类基因中最常见的基因变异,可影响基因的表达、转录、翻译、修饰,是疾病易感性的重要原因之一。尿酸相关基因的SNP不仅易感于高尿酸血症及痛风,并在循环、呼吸、神经等各系统疾病中扮演着重要的角色。因此,本文主要对尿酸相关基因单核苷酸多态性与临床疾病之间的关联性研究作一系统阐述,以为人们提供一个新的预防及治疗视角。
  • 实验研究
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    顾晔,邢陈,宋伦,黎卫平
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的 探讨36小时连续睡眠剥夺对大鼠肝脏、肾脏生物钟基因表达水平及大鼠尿液中肝损伤标志物TBA含量的影响。方法 将12只大鼠随机分为正常对照组、睡眠剥夺组。睡眠剥夺组大鼠使用睡眠剥夺仪进行睡眠剥夺,连续36小时后,暴露腹腔取肝脏、肾脏,用RT- PCR方法检测大鼠肝脏和肾脏组织中生物钟基因转录表达水平的变化情况,并对生物钟基因的蛋白表达产物进行免疫印迹分析;暴露盆腔取尿液,用ELISA试剂盒检测大鼠尿液中肝损伤标志物TBA含量的变化情况。结果 与对照组相比,睡眠剥夺组大鼠肝脏生物钟基因clock, bmal1的mRNA表达水平明显下调(p<0.05),肾脏中同种生物钟基因表达水平在睡眠剥夺前后无明显变化。肝脏生物钟基因的蛋白表达水平与转录水平一致。同时,睡眠剥夺组大鼠尿液中TBA含量明显上调,且与对照组大鼠相比具有统计学差异。结论 36小时连续睡眠剥夺可导致大鼠肝脏生物钟基因表达和胆固醇代谢紊乱,TBA可作为昼夜节律紊乱致肝损伤效应的无创性生物标志物。
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    徐茂凯
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的:构建铜绿假单胞菌凝集素PA-IL基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并评价其生物学活性。方法:以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模版设计引物,构建pET-28a (+)-PA-IL重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用镍亲和层析的方法对目的蛋白进行纯化。流式细胞术评价重组表达的PA-IL蛋白对细胞表面Gb3/CD77的结合活性,菌落平板计数方法评价重组蛋白在细菌粘附宿主细胞过程中的功能。结果:SDS-PAGE电泳显示纯化后的PA-IL蛋白具有较高的纯度,重组表达的PA-IL蛋白能够与细胞表面的糖鞘脂Gb3/CD77结合,且呈浓度依赖性抑制铜绿假单胞菌PAO1对宿主细胞的粘附。结论:纯化的凝集素PA-IL重组表达蛋白能够与细胞表面鞘糖脂Gb3/CD77结合,并且具有生物学活性。
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    崔慧敏
    2017, 41(3): 0-0.
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    摘 要:目的 寻找过路黄Lysimachia christinae Hance抗肿瘤活性成分。方法 采用AB-8大孔吸附树脂色谱、硅胶层析柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱和制备HPLC等技术方法进行化学成分分离,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。用MTT法检测化合物在体外抗肿瘤细胞生长的活性。结果 从过路黄干燥全草70%乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为:3,3'-dimethoxy-6,6'-di((Z)-pentadec-10-en-1-yl)-[1,1'-bi(cyclohexane)]-3,3',6,6'-tetraene-2,2',5,5'-tetraone(1)、大黄素甲醚(2)、1,3-二羟基-2-羧基蒽醌(3)、9,16-二羰基-10,12,14-三烯酸(4)、西克拉敏A-3-O-{β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)]–α-L-吡喃阿拉伯糖苷}(5)、lysikoianoside(6)、槲皮素-3-O-吡喃葡萄糖苷(7)、异鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷(8)、3′,4′,5′,5,7-五羟基黄酮(9)、芦丁(10)、槲皮素(11)。化合物5对人宫颈癌细胞株Hela、人骨肉瘤细胞株U20S、人肺腺癌细胞株PC-9、人结肠癌细胞株CT-26的生长均有一定的抑制作用,其IC50值分别为2.29µg/mL、1.22µg/mL、1.43µg/mL、1.29µg/mL。结论 化合物1为新化合物,化合物2~4为首次从该属植物中分离得到。化合物5在体外具有显著抗肿瘤细胞生长活性。 关键词: 过路黄;化学成分;抗肿瘤;新化合物;西克拉敏糖苷
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    李忠秋忠秋
    2017, 41(3): 0-0.
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    摘要:目的 观察人PIF1解螺旋酶敲低对电离辐射致细胞生长及细胞周期阻滞的影响,以探讨人PIF1在电离辐射致DNA损伤应答中的作用。方法 采用慢病毒系统建立PIF1敲低稳转细胞系,实时荧光定量PCR及Western blot检测PIF1敲低效果。细胞计数法观察PIF1敲低对4 Gyγ射线照射下细胞增殖的影响,流式细胞术观察PIF1敲低对8Gyγ射线照射下细胞周期阻滞的影响。结果 建立了PIF1敲低的稳转细胞系,4 Gy γ射线照射后,PIF1敲低细胞系的生长受到明显抑制,在照后第2、3、4天几乎没有任何增殖,直到第5天才开始缓慢增殖。8 Gyγ射线照射后,PIF1敲低细胞系的S期阻滞与G2/M期阻滞相对于对照细胞发生明显延迟。结论 PIF1敲低后显著增加了细胞的辐射敏感性以及电离辐射所致的S期阻滞与G2/M期阻滞延迟。 ABSTRACT: Objective To observe the effects of PIF1knockdown on cell growth and cell cycle arrest induced by ionizing radiation. Methods HeLa cell lines consistently down-regulating PIF1 was prepared by the lentivirus granules interfering technology and confirmed by real-time PCR and Western blot. The effects of down-regulating of PIF1 on cell growth and cell cycle arrest induced by inonizing radiation was judged by cell counting and flow cytometry. Results The HeLa cell lines consistently down-regulating PIF1 was established. The growth of HeLa down-regulating PIF1 was inhibited greatly after 4 Gy of γ ray irradiation. There was almost no cell proliferation at the days of 2nd ,3rd, 4th post 4 Gy γ ray, and till the 5th day there started a slow cell growth. Moreover the S phase block and G2/M phase block of PIF1 knockdown cell line was significantly delayed post 8 Gy γray. Conclusions Knockdown of PIF1 helicase significantly enhanced the radiation sensitivity and delayed the S phase block and G2/M phase block induced by ionizing radiation.
  • 实验研究
  • 实验研究
    XiaoLisheng,Qizhizhen
    2017, 41(3): 0-0.
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    [摘要]目的构建鼠疫耶尔森氏菌中基因组无痕修饰的技术平台,以利于深入研究鼠疫耶尔森氏菌相关基因的功能及作用机制。方法通过不对称PCR扩增抗性盒片段(含修饰靶标区域上下游同源臂),将其导入含pKD46质粒的鼠疫菌中。在阿拉伯糖的诱导下,pKD46质粒可表达与同源重组相关的3个酶,分别是Exo, Beta, Gam蛋白,诱导重组;再导入pKSI-1质粒与目的基因的重组载体与抗性盒进行第二次同源重组。通过加入阿拉伯糖和IPTG诱导pREDTKI表达重组酶和I-SceI酶,可对未发生重组的抗性盒片段和pKSI-1质粒上的I-SceI位点酶切,从而起到消除抗性盒与质粒作用,达到无痕修饰的目的。结果成功构建了鼠疫耶尔森氏菌201菌株的两株基因突变株,分别是ΔwaaA、waaA(△9nt)菌株。结论根据不同的实验目的选择不同的基因敲除方法,得到的无痕修饰菌株更有利于基因功能的研究。
  • 实验研究
    GUOXiaohua
    2017, 41(3): 0-0.
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    [摘要] 目的筛选能够识别多种属来源的间充质干细胞的核酸适配体,并对其进行鉴定。方法从幼兔股骨骨片分离间充质干细胞并进行成骨、成脂诱导分化鉴定。以分离得到的兔来源间充质干细胞为筛选靶标,利用细胞SELEX 技术筛选核酸适配体。将第五轮富集文库进行克隆、测序,利用RNA structure、MEME软件分析获得候选序列,利用流式细胞仪鉴定候选适配体与兔、大鼠、人来源的间充质干细胞的结合。结果从兔股骨骨片分离得到的间充质干细胞可诱导向成骨、成脂分化。经过五轮SELEX筛选获得兔间充质干细胞的富集文库。候选适配体5-1-12不仅结合兔的间充质干细胞,也识别大鼠和人来源间充质干细胞。结论活细胞SELEX筛选获得与多种属来源间充质干细胞结合的核酸适配体5-1-12。
  • 临床观察
  • 临床观察
    zhangweijing
    2017, 41(3): 0-0.
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    急性脑梗死 药物治疗 临床疗效
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    吴洁
    2017, 41(3): 0-0.
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    摘要:神舟十一号载人航天飞行任务举世瞩目,此次任务与往次神舟保障任务相比,有航天员在轨时间长,返回舱返回时主着陆场气候寒冷等特点,导致航天员产生空间运动病和其他伤病的概率增高,对医疗救护保障任务提出更高要求。救护人员要有充分的技术上和心里上、体能上的准备。本文对参加主着陆场医疗救护的护理人员存在风险进行评估,并提出相应对策,有效杜绝非战斗减员,提升极端条件下参试能力,保证了任务圆满完成。
  • 实验研究
  • 实验研究
    徐伟刚
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的 探讨线粒体呼吸链在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)诱导细胞活性氧产生中的作用。方法 采用特异性荧光探针DHE和Mito-SOX分别标记全细胞和线粒体内超氧阴离子(O2•−),以荧光显微技术检测HBO暴露后HUVEC内O2•−的生成。结果 HBO暴露后全细胞O2•−升高(31±8)%(P< 0.01),线粒体内O2•−升高(137±19)%(P<0.01);给予呼吸链复合体II抑制剂TTFA后,全细胞内及线粒体内O2•−的增长分别被抑制(55±11)%(P< 0.05)和(61± 8)%(P< 0.01)。结论 HBO主要通过线粒体呼吸链增加HUVEC活性氧生成。
  • 报道
  • 报道
    王晔炜,徐伟刚
    2017, 41(3): 0-0.
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    目的 根据梯度因子在潜水减压算法中起到的调整方案保守度的作用,研究其作用规律并提出优化应用原则。 方法 取各理论组织的饱和数值,列表计算减压上限进行分析。从减压安全和效率的方面对梯度因子所可能产生的效应进行评价。对梯度因子的锚定点进行修改。 结果和结论 对于浅而短的潜水,梯度因子的设定数值宜高;对于深而长的潜水,梯度因子的设定数值宜相对较低,并建议采用吸氧减压法;修改梯度因子的锚定点可能会增大减压病的风险,须慎用。