军事医学

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丹参川芎嗪联合化疗对进展期胃癌凝血功能影响

赵玲俊

2017, 41(2): 0-0.

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【摘要】目的：观察丹参川芎嗪对进展期胃癌凝血功能的影响。方法：58例高凝状态的进展期胃癌患者，予以丹参川芎嗪14天，联合紫杉醇、替吉奥、奥沙利铂化疗，2周期后观察各项凝血指标变化。结果：治疗后血浆D-二聚体（D-D）、纤维蛋白原（FIB）明显下降，与治疗前比较具有统计学意义（P＜0.01）。结论：丹参川芎嗪联合化疗治疗进展期胃癌，改善患者高凝状态，改善患者预后，值得临床研究及推广。

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关节镜下Bankart联合SLAP损伤修复治疗复发性肩关节脱位的临床效果

jiangchangliang

2017, 41(2): 0-0.

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【摘要】目的考察Bankart合并SLAP损伤的复发性肩关节脱位患者采用关节镜修复手术治疗的临床效果。方法回顾分析2011年5月至2015年1月间因复发性肩关节脱位接受关节镜下Bankart联合SLAP损伤修复治疗的15例患者临床资料，将其作为实验组研究对象。患者的平均年龄为24.2岁（16-38岁）。术中首先采用可吸收缝合锚钉对不稳定的SLAP损伤进行修复固定，之后再修复Bankart损伤。另选取15例单纯Bankart损伤接受关节镜修复治疗的复发性肩关节脱位患者作为对照组研究对象，患者的平均年龄为24.6（18-35岁）。在术前及末次随访时，采用视觉模拟 (visual analogue scale, VAS) 疼痛评分，美国肩肘关节外科医师评分(American Shoulder and Elbow Surgeons, ASES)，Rowe肩关节评分以及肩关节活动度等对两组患者临床效果进行评估。结果实验组的平均随访时间为15个月（13-28个月），对照组的平均随访时间为22个月（21-34个月）。在实验组中，平均VAS评分从术前4.9降低到末次随访时的1.9，差异有统计学意义（P＜0.05）；平均ASES评分和Rowe肩关节评分分别从术前的33.7和56.4提高到末次随访时91.8和 94.1，差异均有统计学意义（P＜0.05）；在VAS疼痛评分，ASES评分以及Rowe评分方面，术前及术后随访时，实验组与对照组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。到末次随访时，两组所有病例均未再次出现复发性脱位，经物理检查亦未证实肩关节不稳存在。两组所有病例患侧肩关节的前屈、外展、内旋活动度均恢复至正常水平。但相比对照组病例，实验组术后的的肩关节活动恢复时间更长（P＜0.05）。结论关节镜下Bankart联合SLAP损伤可吸收缝合锚钉固定修复治疗复发性肩关节不稳临床效果满意。相比单纯Bankart损伤，Bankart联合SLAP损伤修复术后患者的肩关节活动恢复时间更长。

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实验研究

皮质抑素在人肾组织中及IgA肾病肾组织中的表达情况

宁小元,陈霞,焦晓静,张雪光,徐家云

2017, 41(2): 0-0.

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目的探讨皮质抑素（cortistatin, CST）在人肾组织中的表达情况及其在不同分级IgA肾病肾组织中的表达变化。方法收集5例肾癌切除术患者的癌旁正常肾组织，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法与Western印迹法分别检测人肾组织中CST mRNA与蛋白的表达情况，采用免疫组织化学（IHC）技术对CST于肾组织中的表达进行定位。根据Lee分级标准将IgA肾病分为三组：I～II级为A组、III～IV级为B组、V级为C组，每组分别收集5例IgA肾病患者的肾穿组织。取癌旁组织与肾穿组织切片行过碘酸-希夫氏（PAS）染色，观察肾组织病理形态改变；采用IHC技术，检测不同分级IgA肾病肾组织中CST的表达变化。结果与结论 RT-PCR与Western印迹结果均表明肾组织内表达CST，IHC结果显示CST表达于肾小管上皮细胞。IgA肾病中，病理分级越高，肾小管中CST表达越多，提示CST可能参与其炎症反应，起抗炎保护作用。

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短篇报道

Q热性心内膜炎患者抗I相和II相抗原IgG抗体的跟踪监测报道

于永慧

2017, 41(2): 0-0.

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Q热（Query fever，不明热）是由贝氏柯克斯体（Coxiella burnetii，简写为Cb）感染人导致的一种无特征性病症的发热疾病，临床上与流感等不易区分，误诊漏诊广泛。目前，微量免疫荧光技术是Q热血清学诊断的金标准，该方法敏感、特异、重复性好。我单位应用微量免疫荧光技术，首次对一例Q热性心内膜炎病例进行为期2年的血清学跟踪检测，结果表明：(1)了解患者的心脏瓣膜损伤史对诊断Q热性心内膜炎有帮助。首检时I相抗体效价高达1：3200，但低于II相抗体效价，不符合慢性Q热感染的血清学诊断标准，但后续三次检测结果与标准相符；（2）患者长期有高免疫球蛋白血症。从初检时的高效价I相和II相抗体，到24个月后两相抗体效价的大幅下降，患者的高免疫球蛋白血症有缓解，但I相抗体效价仍没有达到治愈Q热时要求的低于1：800。

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综述

高岭土的止血应用研究进展

干长姣

2017, 41(2): 0-0.

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高岭土是一种天然非金属矿产，具有良好的吸附性、可塑性、易分散性等优良性能，广泛应用在轻工业、石油化工、陶瓷、化妆、建筑等领域。研究表明，高岭土能够激活凝血因子Ⅻ，启动凝血级联反应，近年来，高岭土作为一种强效的内源性促凝血物质在医学领域的应用越来越广泛。本文在概述高岭土结构和止血机理的基础上，梳理了高岭土在止血应用的研究进展，并对其止血应用的现状及前景进行了总结展望。

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综述

应激生理指标研究进展

苏文君

2017, 41(2): 0-0.

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随着社会竞争的日益激烈，工作和生活节奏加快，人们所承受的压力和挑战越来越多，暴露于日常生活应激的频率和强度也愈来愈大。持续、过强的应激暴露能够破坏人体的生物学保护机制，并产生一系列生理、神经内分泌、神经生化、免疫功能及心理行为方面的变化，最终引发一系列危害人类身心健康的疾病。鉴于应激已经成为多种慢性疾病的重要病因或诱因，对应激生理指标特别是反映应激水平的客观检测指标的应用研究，将有助于为应激相关疾病的防治提供依据。文献报道有多种应激生理指标，如皮质醇、α-淀粉酶、儿茶酚胺、热休克蛋白、促炎细胞因子等，本文我们针对应激反应最主要的两条通路（HPA轴和交感通路），将代表性的皮质醇和α-淀粉酶作为应激生理指标作一综述。

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新兵军事体能训练对肝功能及相关生化指标的影响

吉英杰,吕令安,孙志强,蔡少平,张海燕,卜昕,史雪敏,王钱,张文瑾,范振平

2017, 41(2): 0-0.

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[摘要] 目的本研究通过对新入伍战士进行军事体能训练（MPT）前后肌酸激酶（CK）、肝功能(LF)、肾功(RF)和血常规(BRE)等生化指标的随访研究，目的在于阐明MPT对这些指标的影响，以早期预警MPT过程中可能出现的运动性横纹肌溶解（ER）和肾功能衰竭(RFF)等严重并发症，从而尽最大可能减少训练伤病，提高训练质量。方法某陆军新兵174名，均为男性，平均年龄18.46±1.17岁，分别于MPT前（D0）、第4天（D4）、第18天（D18）、第39天（D39）和MPT结束后第7天（D69）共5次采血，化验其CK、LF、RF和BRE等指标的变化。结果174名新兵在D0、D4、D18、D39和D69的CK的平均值分别为370、2617、657、536和212U/L(P<0.01)；谷草转氨酶（AST）的平均值分别为24、69、35、34和24 U/L(P<0.01)；谷丙转氨酶（ALT）的平均值分别为18、30、26、25和22 U/L（P<0.01）。在D4时间点，CK的峰值为17214U/L，升高率为100%，9.2%的新兵升高>50正常值上限的倍数（ULN）；AST的峰值为387U/L，升高率为47.7%，16.7%的新兵升高>3ULN；ALT的峰值为104U/L，升高率为18.4%，但无新兵的ALT升高>3ULN。MPT期间未见胆红素、白蛋白的变化。CK升高与AST和ALT升高呈正相关，相关系数分别是 0.94和0.68。MPT期间未发现士兵出现RH和RFF。结论新兵在MPT期间会出现CK、AST和ALT的升高，以早期最为明显，升高程度CK>AST>ALT，CK的升高与AST和ALT密切相关。

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综述

美军轻度颅脑战创伤诊治进展及启示

宁亚蕾,田华科,周元国

2017, 41(2): 0-0.

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在近年的阿富汗和伊拉克战争中，创伤性脑损伤已成为“现代战争的特征性损伤”，其中大部分为轻度伤，因发病隐匿、误诊漏诊而造成美军战后出现大量神经精神后遗症患者，给个人、家庭和社会带来深远的影响。本文综述了美军对创伤性脑损伤研究和防治的投入情况及战场中轻度创伤性脑损伤诊断、处理和治疗的进展，并提出了对我军的启示。

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实验研究

腺病毒分型基因芯片方法的建立和验证

陈晓飞

2017, 41(2): 0-0.

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[摘要] 目的基于化学发光基因芯片技术建立一种能快速、准确甄别3、7、14、11和55型腺病毒型别的方法。方法根据GenBank中查找腺病毒的特异性基因保守区，设计与合成用于分型的引物和探针，制备寡核苷酸基因芯片。运用多重不对称PCR法扩增特异性基因片段，将扩增产物与基因芯片上的特异性探针杂交，经过洗涤、化学发光显色后，进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交条件和化学发光检测条件下，对芯片的特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果建立的基因芯片方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性，检测质粒参考品最低检测限可达到103copies/反应，临床样本的灵敏度为97.36% ，特异性为95.45%, 总符合率为96.66%。结论建立了一种能快速、灵敏、特异区分五种腺病毒型别的基因芯片分型方法，为腺病毒分型提供一种新的高通量检测手段。

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广西一例HIV-1 G亚型毒株全长基因序列的测定和分析

张敏

2017, 41(2): 0-0.

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[摘要] 目的对广西一例HIV-1 G亚型毒株感染者体内病毒近似全长基因组进行序列测定，并进行系统进化分析。方法对前期鉴定的一例HIV-1G亚型毒株感染者进行背景信息收集，并采集其外周血，提取病毒RNA，利用RT-巢式PCR技术分两段扩增并测定病毒近似全长基因序列。利用MEGA6软件对全长序列进行系统进化分析。结果获得了病毒近似全长基因组序列，长度为8847bp。在系统进化树中，该毒株与G亚型参考株成簇，Bootstrap值为100%。系统溯源分析显示该毒株与广西首次报道的G亚型JN106043毒株关系最近（Bootstrap值100%，基因离散率5%）。结论此毒株可能是由广西毒株传播所致，提示G亚型毒株在广西地区可能存在一定的局部流行，需要进一步监测。该毒株序列的测定和分析对于广西地区HIV流行状况分析具有重要意义。 [关键词] G亚型， HIV-1；近似全长序列；系统进化树分析 [Abstract] Objective To sequence and phylogenetic analysis of the near full length genome of a HIV-1 subtype G strain identified in Guangxi, China. Methods Blood sample and demographic background were collected from a patient infected by HIV-1 subtype G strain. HIV genomic RNA was extracted and amplified in two halves with 100bp overlapping region by using RT-nest-PCR. The positive PCR products were sequnced. Phylogenetic analysis was fullfilled by using MEGA6 software with obtained near full length genome. Result The near full length genome of the strain was obtained in 8847bp length. In phylogenetic tree, the strain clustered with subtype G references with high bootstrap value (100%). Close phylogenetic relationship was found between the strain a subtype G strain (JN106043) previously identified in Guangxi. Conclusion The strain identified in the study might be transmitted by subtype G strains in Guangxi, which implied that subtype G might have been spreading in Guangxi. Further surveillance of subtpe G epidemic in Guangxi province will be necessary. The near full length genome of the subtype G strain will be helpful for the monitor of HIV prevalence in Guangxi. [Key words] G-subtype, HIV-1; Near full-Length sequence; Phylogenetic tree analys

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九种发热伴出疹病原体检测基因芯片方法的建立

徐胜平,刘琪琦

2017, 41(2): 0-0.

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[摘要] 目的建立一种能同时、快速、准确的检测九种发热伴出疹病原体的化学发光基因芯片的方法，即麻疹病毒、风疹病毒、肠道病毒71型、水痘带状疱疹病毒、登革热病毒、人类小DNA病毒B19、柯萨奇病毒A16型、A组β型溶血性链球菌、伤寒沙门氏菌。方法根据这九种病原体特异基因中的高度保守区序列设计引物与探针，进行多重不对称PCR扩增，将带有标记的扩增产物与带有特异性探针的芯片杂交，经洗涤，化学发光显色后进行结果分析。经过多重PCR体系、杂交反应和化学发光检测条件的优化，评价该芯片的特异性、灵敏度和重复性。用实时荧光PCR法与芯片法分别检测肠道病毒EV71梯度稀释的核酸，比较两种方法的灵敏度。结果共筛选出9对特异性扩增引物和11条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性、灵敏度和重复性。质粒参考品和体外转录RNA参考品的最低检测限为3×103copies/反应，芯片法比实时荧光PCR法灵敏度低10倍。34例临床样本的检测结果与实时荧光PCR法检测结果基本一致（31/34）。结论建立了一种可同时检测九种发热伴出疹病原体的化学发光基因芯片的检测方法，为发热伴出疹的临床诊断和流行病学调查提供了一种高通量的筛查手段。

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实验研究

基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的RIP1稳定敲除细胞模型的构建及功能研究

chenyao,liuqing,xingweiwei,chenhuihua,zhangdongdong,liuzhongcheng,xudonggang

2017, 41(2): 0-0.

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目的：利用CRISPR/Cas9技术构建RIP1稳定敲除的人永生化表皮细胞HaCaT细胞株，在此基础上对RIP1的功能进行探究。方法：首先针对GeneBank中RIP1的基因序列，设计靶向RIP1不同外显子的sgRNA，并将其克隆至SpCas9-2A-Puro V2.0（PX459）载体中，获得PX459-sgRNA基因敲除载体。将其转染HaCaT细胞并筛选后，免疫印迹和DNA测序技术鉴定RIP1敲除效果最佳的单克隆。通过CCK-8实验检测RIP1的缺失对细胞增殖能力的影响。分别用TNF-α处理HaCaTWT细胞和HaCaTRIP1KO细胞，流式细胞仪检测敲除RIP1对TNF-α诱导细胞死亡的影响，进一步通过caspase抑制剂Z-VAD-FMK判断细胞死亡类型。结果与结论：利用CRISPR/Cas9系统成功构建RIP1完全敲除的细胞模型，功能分析发现敲除RIP1导致细胞增殖能力减慢；HaCaTRIP1KO对TNF-α诱导的死亡异常敏感，这种死亡能够被Z-VAD-FMK显著抑制，为探究RIP1在皮肤损伤中的作用奠定基础。

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伊曲茶碱的合成研究

齐军阳

2017, 41(2): 0-0.

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目的优化抗帕金森病药伊曲茶碱1的合成工艺以适用于工业化生产。方法以碳酸二甲酯和乙胺经缩合、环合、亚硝化、还原得1，3-二乙基-5，6-二氨基尿嘧啶(6)，6与(E)-3,4-二甲氧基苯丙烯酸(8)进行缩合、闭环、甲基化反应制得伊曲茶碱1。8可由3，4-二甲氧基苯甲醛（7）和丙二酸经Knoevenagel缩合反应制得。中间体及目标化合物经过MS和1H-NMR确证。结果与讨论对各关键工艺质量控制点的工艺进行优化，使合成总收率达26.2%,产品纯度99.76%。改进后的工艺条件温和，操作简便，无需柱层析，适合工业化生产。

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管理研究

军队重症伤员空运后送管理的相关性研究与思考

zhangling

2017, 41(2): 0-0.

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【摘要】通过对我军及外军重症伤员空运后送管理的相关性研究分析，对我军重症伤员空运后送战略的管理模式、重症监护队伍建组、人员培训机制、后送标准化与操作流程规范化，以及重症后送新技术及设备应用5个方面进行探讨。

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实验研究

TGF-β3通过调控MMP-9/TIMP-1比例和VEGF表达延缓小鼠放射性肺纤维化

杨长爽

2017, 41(2): 0-0.

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摘要：目的观察经60Coγ 射线全胸照射后小鼠肺脏的改变，探究转化生长因子β-3（transforming growth factor-β,TGF-β3）对放射性肺纤维化的相关调节机制。方法 180只C57BL/6雌性小鼠随机分为对照组、照射组和TGF-β3组。照射组和TGF-β3组经60Co γ射线单次全胸照射，照射后每周分别腹腔注射0.5 ml 0.9%生理盐水和TGF-β3(1 μg/kg)一次。分别于照后1个月、3个月和6个月，观察小鼠的大体情况，活杀后进行常规病理检查和Masson三色染色观察，免疫组织化学法检测肺组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metallopeptidase-9, MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1, TIMP-1)的表达，检测肺灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)含量。结果对照组、照射组和TGF-β3组小鼠体重和肺脏指数无明显变化；病理切片和Masson三色染色结果显示与对照组相比，照射组小鼠肺组织结构有显著的纤维化病灶形成，而TGF-β3组肺组织纤维化发病程度与照射组相比病症明显减轻；免疫组化结果显示加入TGF-β3后，肺组织MMP-9/TIMP-1的比例显著升高，VEGF的表达水平明显降低。结论 TGF-β3可能通过调节肺内MMP-9/TIMP-1比例，降低肺内VEGF的表达水平，从而减轻或延缓小鼠放射性肺纤维化。

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实验研究

青藏公路沿线生活饮用水卫生学检测及风险评估

张熙遥

2017, 41(2): 0-0.

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摘要目的：通过对青藏沿线农村生活饮用水的卫生学检测分析和风险评估，了解掌握饮用水卫生状况，为饮用水安全管理工作提供科学依据和技术支撑。方法：现场查看水源基本情况并收集水样56份，按照国标方法对样品的理化和微生物指标进行检测评价，并对危害因素进行风险评估。结果：所检测的56份水样总合格率为75%；在不合格水样中，总大肠菌数和菌落总数、硫酸盐、浑浊度均超标达7份（占12.5%），其次是氯化物超标达6份（占10.7%）；在检测水样的超标项目中，总大肠菌群、菌落总数、浑浊度以及硫酸盐超标次数最多，均占总超标次数的11.1%；不同水源类型之间合格率无明显差异；影响青藏沿线农村生活饮用水的主要风险因素为总大肠菌数、菌落总数、浑浊度、氯化物和硫酸盐。结论：青藏公路沿线生活饮用水水质卫生合格率偏低，微生物和氯化物是主要风险因素，应加强水质消毒和完善水处理措施，保障青藏沿线村民生活饮用水的安全。

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基于BP神经网络的PID控制器在气体混合配比系统中的应用

王春晨

2017, 41(2): 0-0.

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目的设计一种应用在气体混合配比系统上的基于BP神经网络的PID控制器。方法将BP神经网络和PID控制相结合构成一种新型控制器。建立三层神经网络，设定性能指标函数，按照梯度下降法修正网络的权值，实现对PID参数的在线整定。另外进行模型识别构建系统模型，完成控制器的设计。结果将设计的新型控制器和传统增量式PID控制器分别应用到系统中进行仿真实验，新型控制器的控制超调量和达到稳定状态的时间均优于传统增量式PID控制器。结论设计的新型控制器具有更好的控制性能，对气体混合配比系统具有重要意义。

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泛素连接酶Smurf1促进Smurf2的Neddylation修饰

刘超

2017, 41(2): 0-0.

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目的探讨泛素连接酶Smurf2（Smad ubiquitination-related factor）Neddylation修饰的机制。方法梯度过表达Nedd8检测Smurf2的蛋白水平变化，免疫共沉淀（IP）和免疫印迹（Western Blot）分析Smur2的Neddylation修饰，GST-Pulldown实验验证相互作用，分析Smurf1 C426A Knock In小鼠体内Smurf2在淋巴、脾脏、肝脏和肺组织的蛋白表达水平。结果 Smurf2可以发生Neddylation修饰，过表达Nedd8可以导致Smurf2蛋白水平下调，Smurf1和Smurf2能够相互作用，并且Smurf1可以使Smurf2的Neddylation修饰增强。在Smurf1 C426A Knock In小鼠的组织细胞中Smurf2蛋白水平上调。结论Smurf1能够促进Smurf2的Neddylation修饰。

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SIRT1对肝癌细胞药物敏感性的影响

纪光红,阎新龙,王海洋,张彪,曾泉,岳文,裴雪涛

2017, 41(2): 0-0.

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目的：构建SIRT1的特异性shRNA慢病毒载体，获得敲低SIRT1的肝癌细胞系，以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用。方法：设计针对SIRT1 靶点特异性的干涉序列，连接到经HpaＩ和Xho Ｉ双酶切的pSicoR-GFP载体，慢病毒包装293T产生病毒，感染肝癌细胞，建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株。利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果；通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞的增殖能力的影响；通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达，考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响。结果：实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能够显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达，SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力，下调耐药基因的表达，增强肝癌细胞的药物敏感性。结论：SIRT1抑制肝癌细胞耐药敏感性。

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