军事医学

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电针足三里对术后腹腔粘连形成早期炎症因子水平的抑制作用

张立俭

2016, 40(9): 0-0.

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目的：1.观察电针足三里穴对术后腹腔粘连形成早期组织炎症因子水平的影响，探讨足三里穴发挥抗炎的作用机制。方法：雄性Wistar大鼠48只，随机分为：A组（对照组）、B组（模型组）、C组（电针足三里组）、D组（电针非穴组）、E组（造模后注射α-银环蛇毒素组）和F组（造模后注射α-银环蛇毒素+电针足三里组），每组8只。A组开腹后不做任何处理，其余各组采用Chiang方法制作大鼠腹腔粘连模型，C组和F组术后持续电针双侧足三里穴1h，D组采用相同频率和时间刺激非经非穴，E组和F组术后腹腔注射α银环蛇毒素（α-BGT）。各组大鼠于术后第3d处死，剪取磨损盲肠组织，测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）含量。结果：1.术后第3d，磨损盲肠出现炎性水肿，局部组织未发生明显粘连。2.与A组比较，其余各组TNF-α，NO和 NOS含量明显升高（P均<0.01）；C组上述指标显著低于行手术处理的其余各组（P<0.01或P<0.05）。3.和B组相比较，D组、E组及F组炎症因子水平无明显降低或升高（P>0.05）。结论：电针足三里穴可有效降低腹腔粘连形成早期组织TNF-α、NO和NOS含量，减轻组织炎性水肿；阻断胆碱能受体α7亚基后给予电针足三里处理，组织炎症因子水平无明显降低。足三里穴发挥抗炎机制可能与胆碱能抗炎通路有关。

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脂多糖诱导大鼠脓毒症脑内的氧化损伤及相关信号通路的研究

chenfeng

2016, 40(9): 0-0.

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[摘要] 目的：探讨脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的脓毒症造成大鼠脑内氧化损伤的作用及JNK和Nrf2发挥作用的机制。方法：将大鼠随机分为对照组、低剂量造模组（LPS 5mg•kg-1）和高剂量造模组（LPS 10mg•kg-1）。模型组中大鼠腹腔注射LPS建立内毒素脂多糖炎症模型，对照组大鼠腹腔内注射等量的生理盐水。模型组造模成功后6小时，处死大鼠，将脑组织完全取出后，剪碎并研磨成脑匀浆，检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢（H2O2）、琥珀酸脱氢酶（SDH）的变化。qRT-PCR、Western blot法检测JNK与Nrf2蛋白在脑组织亚细胞中的表达水平。结果：在LPS诱导脓毒症大鼠模型中，模型组大鼠脑组织中，MDA、SOD、GSH-Px、T-AOC、H2O2、SDH水平明显增加，且JNK与Nrf2表达增高，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：成功构建LPS诱导脓毒血症后大鼠脑内氧化损伤的病理模型，并进一步发现，这一过程是通过Nrf2和JNK信号通路发挥作用。

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亚洲副溶血弧菌临床菌株的基于碱基序列和肽链序列的多位点序列分型研究

徐嘉良

2016, 40(9): 0-0.

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摘要：目的：了解来自亚洲的副溶血弧菌临床菌株的群组结构和克隆复合体构成。方法：在来自pubMLST公共数据的数据中，筛选具有完整ST型及pST型的来自亚洲的副溶血弧菌临床菌株数据，进行亚群分析和克隆复合体分析，并分别构建基于ST型和pST型的最小生成树。结果从数据库中共筛选到具有ST型及pST型的来自亚洲的副溶血弧菌临床菌株数据341条，共含有157个ST型，以ST3型为最多。其中有214条菌株数据来自中国（包括大陆、香港和台湾），覆盖了133个ST型，其中仍以ST3型为最多。利用eBURST软件对数据进行分析，共发现了17个组，94个单体。STRUCTURE软件分析显示来自亚洲的副溶血弧菌临床菌株的适宜亚群数为7，各亚群内的样品平均距离为0.9113。结论来自亚洲的副溶血弧菌临床菌株具有高度多态性，可更细分为7个亚群，MLST分型时以ST3型为多，AA-MLST分型时以pST2型为主。

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多重环介导等温扩增快速检测沙门氏菌、副溶血性弧菌和单增李斯特菌方法的建立

刘宁伟

2016, 40(9): 0-0.

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为进一步满足食源性致病菌的快速检测需求，本研究分别针对沙门氏菌bcfD基因、副溶血性弧菌tlh基因和单增李斯特菌iap基因以环介导等温扩增法（LAMP）进行单重LAMP检测。以实时浊度监测判别扩增结果，优化反应体系，进而建立此三种食源性致病菌的多重LAMP检测体系，并进行特异性和灵敏性分析。实施浊度监测表明该多重LAMP法具有较好特异性，能够在45min内一次性检测出以上三种致病菌，且无非特异扩增产生，沙门氏菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌的检测最低限分别为300fg/ul、4.2pg/ul、4.5pg/ul，与PCR法检测灵敏度相当。该多重LAMP法可同时检测食品中的沙门氏菌、副溶血性弧菌和单增李斯特菌，操作简单，尤其可作为一种初筛方法，快速判定食品中是否含有这三种致病菌。

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部队高原驻训的饮食饮水卫生安全保障措施研究

孙如宝,李利忠,王强

2016, 40(9): 0-0.

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目的了解部队高原驻训的饮食饮水卫生安全需求，探索提升部队卫生保障能力的途径。方法随机抽取7家参演单位，通过实地查看和现场检测相结合的方法，调查演习地域宿舍内外环境变化以及参演部队的饮食、饮水卫生安全状况。利用内标和外标校准方法对仪器测量的稳定性进行测试。结果演习地域宿舍内外环境的昼夜温差以及湿度变化大。2家野战部队单位的食品原料均为统一采购、采购点固定，但5家卫勤保障单位则是独立采购，并且7家单位均缺少食品储运的保藏设施设备。抽检的53份食品样品中，有1份样品的农药残留不合格。3份水样的浑浊度、氨氮、硝酸盐氮3项指标符合卫生要求，但未检测出游离余氯和总氯。高原环境下对分光光度计测量无显著影响，但对酶联免疫检测仪有显著影响。结论部队高原作训存在饮食饮水卫生安全隐患，应当从增强个人防护、完善管理流程以及强化装备适应性来提升野外卫生保障效能。

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实验研究

blaCTX-M-55介导的宋内氏志贺菌耐药机制研究

蒋晓圆

2016, 40(9): 0-0.

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目的研究blaCTX-M-55介导的宋内氏志贺菌#1083的耐药机制。方法双纸片协同扩散法验证#1083是否为产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株，PCR方法鉴定其耐药基因，接合转移实验验证质粒介导的耐药基因的转移特征，VITEK 2仪器检测菌株对多种抗生素的MIC值，基因组测序鉴定介导耐药基因转移的移动元件，引物延伸实验鉴定耐药基因转录起始位点。结果 #1083为blaCTX-M-55介导的ESBL菌株，携带blaCTX-M-55的耐药质粒可以通过接合转移的方式进入受体菌EC600，并使受体菌具有相应的耐药谱；介导blaCTX-M-55转移的转座单元为ISEcp1-blaCTX-M-55-orf477，且其上游的插入序列ISEcp1为耐药基因提供强启动子区，促进耐药基因表达，且此表达为恒定表达，不受抗生素的诱导作用。结论质粒携带的blaCTX-M-55为#1083的主要耐药基因，插入序列ISEcp1介导此基因的表达与传播。

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基于SERS标记免疫检测的研究进展

李敏

2016, 40(9): 0-0.

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[摘要]：随着表面增强拉曼光谱技术（SERS）的发展，SERS与标记免疫技术的结合已经成为一种新的医学研究技术。本文从SERS标记免疫检测技术的原理、研究进展、存在问题等方面叙述了SERS标记免疫检测及其最新发展。归纳了目前提高SERS标记免疫检测灵敏度的研究技术及消除SERS免疫标记研究中非特异性吸附的方法,对SERS标记免疫技术未来的研究方向与发展前景进行了展望。

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实验研究

小鼠肾小管发育中AQP-7的表达

薄双玲

2016, 40(9): 0-0.

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摘要:目的探讨水通道蛋白7(aquaporin-7, AQP-7)在小鼠肾小管发生发育过程中的表达和作用。方法采用免疫组织化学、免疫印迹技术结合体视学方法，测定胚龄(E) 12、14、17、18d胎鼠及生后 (P) 1、3、7、14、24、40、70d仔鼠肾中肾小管AQP-7 的表达及含量变化。结果免疫组织化学结果： AQP-7在 E14d表达在发育中的肾小管，之后主要定位在皮质和外髓部近直小管的刷状缘，生肾区与內髓则无阳性表达；体视学测量：随着胚（日）龄的增加, AQP-7 在肾小管表达逐渐增强后趋于稳定；免疫印迹结果：AQP-7在肾脏的表达量P24d达到高峰后趋于稳定。结论 AQP-7对肾小管的发育成熟及功能维持起重要作用。

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重症监护型救护车空气净化系统设计与防护效果评价

LIUYAJUN

2016, 40(9): 0-0.

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目的研制一种重症监护型救护车空气净化系统，用于救护车病员室空气中悬浮微生物的过滤净化和消毒灭菌。方法综合TiO2光触媒与高效空气过滤材料，设计一种救护车空气净化装置，通过光触媒实现对车厢内空气微生物的氧化分解，通过高效过滤器实现对空气尘埃粒子的高效过滤，通过空气洁净度和消毒效果测试对空气净化系统的作业效果进行评价。结果在空气净化系统正常运行状态下，救护车病员室内空气洁净度达到了万级，细菌菌落总数不大于1 CFU/(皿•15min)，满足重症监护作业对车厢卫生学环境的要求。结论救护车空气净化系统能有效实现对救护车病员室空气的消毒灭菌和过滤净化，满足运送途中对伤病员实施紧急救治和重症监护等作业的需求。

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双孔钾离子通道TREK-1功能性串联二聚体载体的构建

彭鹏

2016, 40(9): 0-0.

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【摘要】目的：探讨在双孔钾离子通道TREK-1（TWIK Related K+ channel 1）分子间加入柔性linker构建串联二聚体载体的可行性。方法：用PCR技术，在两个单体TREK-1分子之间加入一个linker，构建串联二聚体载体(pGH19-tdTREK-1)。将上述载体体外转录成cRNA显微注射至爪蟾卵母细胞，培养24-48小时，采用双电极电压钳技术记录电流。观察胞外钡离子和不同pH值外液对该串联二聚体通道表达的影响，并与天然二聚体通道的反应相比较。结果：串联二聚体TdTREK-1可在爪蟾卵母细胞中高效表达，该通道形成的电流可被胞外钡离子抑制，也可被胞外液酸化所抑制。并且，该串联二聚体通道对这些胞外刺激因素的反应程度与天然二聚体相似。结论：人为加入柔性linker序列构建串联二聚体TREK-1通道并不影响通道的表达及门控特性，证明该实验方案可行。这将为我们将来操作单个亚基，进而深入研究TREK-1的结构与功能打下良好的基础。

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实验研究

含五种烈性出血热病毒的假病毒阳性参考品的制备

caoxuefengxuefeng

2016, 40(9): 0-0.

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目的：利用慢病毒载体系统，制备含有马尔堡病毒(Marburg virus)、扎伊尔型埃博拉病毒(Zaire Ebola virus)、苏丹型埃博拉病毒(Sudan Ebola virus)、拉沙热病毒(Lassa fever virus)和黄热病毒(Yellow fever virus)五种烈性病毒核酸片段的假病毒，为该五种病毒的核酸检测提供一种通用的阳性参考品。方法：体外合成该五种病毒的目的基因片段，通过融合PCR技术将5个片段连接成一条基因，然后克隆到慢病毒表达载体上，并与其辅助载体共转染293T细胞。转染后分别于48h、72h收集培养上清，用DNase和RNase进行消化处理，然后纯化浓缩,最后提取核酸，利用普通PCR和实时荧光定量PCR鉴定假病毒是否包装成功。结果：测序结果表明体外合成的该五种病毒的目的基因片段已正确连接并插入慢病毒载体中；载体转染293T细胞后收集上清中的假病毒，提取核酸经过普通PCR和实时荧光定量PCR鉴定，均可特异检测到靶基因，表明已成功包装出含该五种出血热病毒靶基因的假病毒颗粒。结论：本研究所获得的假病毒颗粒，可作为以上五种出血热相关烈性病毒核酸检测的通用阳性参考品。

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急性心肌梗死致电风暴的抢救与护理

jiangjing

2016, 40(9): 0-0.

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心脏电风暴又称交感风暴，是指24小时内自发2次或2次以上的室性心动过速或心室颤动，引起严重血流动力学障碍，从而需要立即电复律或电除颤等救治的急性危重性症候群。急性心肌梗死是导致心脏电风暴发作的常见原因，其发病急，也是心源性猝死的重要原因。在电风暴发作期间，尽快进行电复律是恢复血流动力学的首要措施。2016年3月我科收治1例急性心肌梗死致电风暴的男性患者，经反复电除颤抢救成功。

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早期乳腺癌无创腋窝淋巴结分期的临床初步观察

常振宇

2016, 40(9): 0-0.

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目的：探讨超声检查评估乳腺癌腋窝淋巴结转移状态的临床应用价值。方法：入组我院2013年12月至2015年9月期间连续收治的282例新发Tis-T2期乳腺癌患者，指定2名高年资超声医师行腋窝超声检查，根据淋巴结声像学参数，将患者分为转移组、未转移组或可疑组。腋窝淋巴结分期以病理学结果作为金标准，分析超声检查评估乳腺癌腋窝淋巴结转移的准确性，比较各组腋窝淋巴结转移负荷；单因素及多因素Logistic回归分析各个声像学参数对判断腋窝淋巴结转移状态的预测价值。结果：超声判断腋窝淋巴结转移组+未转移组的灵敏度、特异度、阳性及阴性预测值、准确度分别为85.6%、87.1% 、86.4%、86.3%和86.3%，Kappa值为0.727（P＜0.001）。病理证实腋窝淋巴结转移患者中，超声判断未转移组的平均淋巴结转移负荷明显低于超声转移组（1.2/6.9枚、P＜0.001），超声判断为未转移而病理结果证实为转移的患者共16例，其中14例患者腋窝淋巴结转移负荷仅为1枚，其余2例患者分别为2枚和3枚。单因素Logistic回归分析显示，最大皮质厚度预测腋窝淋巴结转移诊断效能最佳（ROC曲线下面积为0.872）；多因素Logistic回归分析显示，最大皮质厚度、髓质与皮质厚度比值与腋窝淋巴结转移相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归模型ROC曲线下面积为0.879，灵敏度及特异度分别为77.0%、85.1%。结论：超声检查评估腋窝淋巴结转移具有较高的准确性；超声判断假阴性的患者腋窝淋巴结转移负荷较低。最大皮质厚度是判断腋窝淋巴结转移最主要的声像学参数。在早期乳腺癌患者中，超声检查无创评估可能是潜在的替代前哨淋巴结活检行腋窝淋巴结分期的手段。

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定量蛋白质组学提示CDC42通过调控细胞骨架建成参与HBx介导的肝细胞恶性转化

徐永茹,齐英姿,李湘萍,徐锋,徐平

2016, 40(9): 0-0.

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目的寻找在HBx诱发肝细胞恶性转化过程中CDC42信号通路中发挥作用的介导因子。方法利用基于质量亏损的准等重二甲基标记的定量蛋白质组学方法，检测CDC42基因敲除前后HBx转基因细胞蛋白质组的差异。筛选差异蛋白并对差异蛋白进行基因功能分析（Gene Ontology，GO）。结果与结论我们共定量到3409个蛋白，共筛选到220个差异蛋白，通过基因功能分析发现与细胞骨架组织相关的palladin、FMNL1和Keratin-19均发生显著下调。本研究为CDC42在HBx介导Huh7细胞恶性转化的机制研究提供了候选基因和蛋白。

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艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原区段的表达及抗原性分析

王建霞,杨锡琴,王宏伟,冯晓燕

2016, 40(9): 0-0.

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[摘要] 目的：构建艰难梭菌谷氨酸脱氢酶（GDH）的原核表达载体，表达重组蛋白并鉴定其抗原活性。方法：以ATCC43255菌株基因组DNA为模板，设计引物，PCR扩增获得GDH全长基因片段，构建原核表达载体并转化到大肠杆菌中，IPTG诱导表达GDH，并用Ni柱进行纯化。利用艰难梭菌抗原检测试剂盒对GDH抗原区段的抗原性进行鉴定。结果：成功构建了艰难梭菌GDH抗原的原核表达载体pET-28a/GDH，并获得了能够被相应的特异性抗体所识别的GDH抗原。结论：原核表达的艰难梭菌GDH抗原具有很好的抗原活性，为进一步制备相应抗体并建立艰难梭菌GDH抗原的免疫检测方法奠定了基础。

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紫外线对大肠杆菌的损伤机制研究

李静

2016, 40(9): 0-0.

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[摘要] 目的观察紫外线消毒对水中大肠杆菌的损伤情况及其损伤机制。方法选择大肠杆菌ATCC 25922为试验菌，用平板计数法研究不同紫外线照射剂量下大肠杆菌的灭活率及损伤情况，用拉曼光谱和透射电子显微镜分别观察紫外线消毒后大肠杆菌的膜通透性和细胞形态的变化。结果紫外线消毒后大肠杆菌细胞膜通透性增加4.87倍，拉曼光谱测量显示损伤状态的大肠杆菌存在蛋白质、脂质及糖类的结构变化；透射电镜观察显示损伤状态的大肠杆菌质壁出现一定程度的分离。结论紫外线消毒对大肠杆菌的损伤表现在蛋白质、核酸、糖类等多种生物活性分子的不同程度损伤，而不是某种结构的单一损伤。

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便携式给氧复苏呼吸器的设计

李斯伟,范晓逶,刘学,黄传伟,王洁

2016, 40(9): 0-0.

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目的：设计一款具有复苏和吸氧双重功能的便携式呼吸器。方法：采用正压式、气动气控的设计方案，对关键部件进行了理论计算，利用三维设计软件Solidedge进行了虚拟样机的构建、结构的校核，最后对样机进行了加工装配和测试。结果：经过实验测试，所研制的呼吸器在3-5.5bar气源压力下能够实现急救复苏和辅助吸氧功能，给氧流量10-12L/min，达到预期技术指标。结论：便携式给氧复苏呼吸器具有体积小、重量轻、操作简单、便于携带、无需电源等特点，具有广阔的应用前景。

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疝疾病在中美飞行学员医学选拔中的对照实证研究

lihao

2016, 40(9): 0-0.

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目的通过分析我国空军招飞定选中疝疾病谱，对比中美招飞医学选拔标准，为完善我国招飞医学选拔体系提供参考。方法回顾分析空军医学选拔中心近4年招飞定选受检者疝疾病数据并将其适用于美军招飞标准再次分析，对比中美招飞医学选拔标准差异。结果2012-2015年共检出43名疝疾病者，淘汰29人（22人腹股沟疝，3人脐疝,5人食管裂孔疝）；疝疾病淘汰人数占外科总淘汰人数4%，2012-2015年每年疝疾病占外科淘汰人数比例较为固定（p=0.1539）；腹股沟疝、脐疝、食管裂孔疝的中美医学选拔实证研究显示美疝疾病医学标准存在明显差异。结论中美招飞医学选拔疝疾病标准存在差异，美军招飞医学标准重视功能，修改目前疝疾病医学选拔标准有利于保障我空军战斗力。

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基于Agent的抗震救灾伤员医疗后送建模研究

李文豪

2016, 40(9): 0-0.

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目的研究构建抗震救灾伤员医疗后送相关模型。方法根据抗震救灾伤员医疗后送卫勤理论，结合Agent建模思想，确定医疗后送系统的研究边界，建立Agent模型体系架构。利用基于Agent建模的方法，对关键Agent模型的结构、属性、相关行为及作用进行研究，提出模型结构。结果与结论构建了包括业务 Agent 模型、辅助Agent 模型和环境 Agent 模型共3类11种Agent模型的模型体系架构，提出了6种关键模型的模型结构，并建立了各类Agent模型的交互和协调机制。

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SET7的原核表达及纯化鉴定

刘刘

2016, 40(9): 0-0.

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[摘要] 目的原核表达并纯化组蛋白甲基转移酶SET7。方法以乳腺文库为模板，PCR扩增SET7基因，克隆到pGEX-KG载体，构建pGEX-KG-SET7；经酶切鉴定后转化进行小量诱导，通过SDS-PAGE检测融合蛋白GST-SET7的纯化效果。结果 DNA测序结果表明，pGEX-KG-SET7原核表达载体构建成功。SDS-PAGE检测显示获得相对分子量为72kD的融合蛋白。结论纯化得到原核表达的GST-SET7融合蛋白，为进一步研究SET7在乳腺癌中的功能奠定基础。

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