军事医学

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某部新兵自杀意念相关唾液生化分析

李小健

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要] 目的探索早期筛查自杀高危人群无伤无害的生化指标。方法对某部2014年入伍第一个月的新兵727人，采用《自杀意念自评量表》（Self-rating idea of suicide scale, SIOSS），进行自杀意念普查，以≥12分为划界分，有25人（实际27人，两人因故未参加）入自杀意念组，从无自杀意念的新兵中随机抽取25人作为对照组；分别在进入新兵训练一个月和三个月后采集唾液进行生化分析，同时采用SIOSS再次自杀意念测试。结果新训一个月唾液生化分析显示：自杀意念组与无自杀意念的对照组唾液钙（Ca）、镁（Mg）、淀粉酶（Amy）、唾液酸（SA）存在统计学差异（P<0.05）；新训三个月唾液生化分析显示：按首次自杀意念普查分成的自杀意念组与对照组唾液Ca、Mg、Amy、SA已无统计学差异（P>0.05），三个月后再次自杀意念测试结果，原自杀意念组SIOSS评分≥12分者只有7人，<12分者18人，原对照组（无自杀意念组）SIOSS评分均<12分，将3组人唾液Ca、Mg、Amy、SA比较，无统计学差异（P>0.05）。结论新兵入伍第一个月，有自杀意念者存在唾液生化成分改变，可能与机体应激有关，唾液生化指标对于自杀意念者筛查还缺乏生物学特异性。

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含蓝莓花色苷的谷物发酵物抗疲劳作用的研究

王紫玉

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要] 目的观察含蓝莓花色苷的谷物发酵物（简称蓝禾）对小鼠的抗疲劳作用。方法雄性昆明小鼠80只，分2批进行实验，每批40只。（1）第1批实验：昆明小鼠随机分为对照组、低剂量蓝禾干预组、中剂量蓝禾干预组及高剂量蓝禾干预组，每组10只小鼠，其中对照组小鼠灌胃蒸馏水17.5ml/kg bw，蓝禾干预组小鼠灌胃剂量分别为8.75ml/kg bw、17.5ml/kg bw、35.08ml/kg bw。连续灌胃28天，测定小鼠负重游泳时间。（2）第2批实验：昆明小鼠随机分为对照组及高剂量蓝禾干预组，每组20只小鼠，分别灌胃蒸馏水和蓝禾，灌胃剂量均为35.08ml/kg bw。连续灌胃28天，测定小鼠血乳酸(LA)、血清尿素氮(BUN)、肝糖原的含量。结果（1）与对照组比较，蓝禾干预组小鼠负重游泳时间均显著延长（P＜0.01），高剂量蓝禾干预效果最好；（2）与对照组比较，高剂量蓝禾干预组小鼠游泳后20min，全血乳酸含量呈下降趋势、肝糖原储备量显著增高（P＜0.05），血清尿素氮含量明显降低（P＜0.05）。结论蓝禾具有显著的抗疲劳作用。

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缺氧响应网络结构化建模与动态演化分析

李健杰

2016, 40(7): 0-0.

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目的构建缺氧响应网络的可执行模型，基于计算机进行仿真分析，研究缺氧响应网络的随机性、并发性等动态演化机制。方法使用随机Petri网构建缺氧响应网络结构模型，在此基础上基于具体的演化规则和Gillespie算法对该结构模型的动态演化进行分析。结果得到缺氧响应网络的动态演化规律，在对缺氧响应网络切换行为的描述上，仿真结果与实验室结果反应出的规律具有一致性。结论基于随机Petri网方法可实现缺氧响应网络的可视化建模，通过对模型的执行和基于给定动力学参数下的随机仿真，可得到与传统实验室实验研究相得益彰的分析结果，有助于进一步分析缺氧响应网络的结构和功能特性。

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应用DNA四面体探针电化学生物传感器检测埃博拉病毒核酸

王金艳

2016, 40(7): 0-0.

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目的建立一种基于电化学生物传感器快速检测埃博拉病毒核酸的方法方法利用一步热变性法自组装成带有固定探针的DNA四面体后，通过Au-S键固定至金电极表面制备成新型核酸探针。与合成的埃博拉病毒核酸序列特异性结合后，引入Bio-ssDNA检测序列，通过生物素和链霉亲和素的特异性结合作用引入Avidin-HRP放大信号，利用计时电流法进行检测结果该传感器可以特异识别和定量检测人工合成的埃博拉病毒的核酸序列，通过实验条件优化，测定核酸的浓度范围在1.0×10-9-5.0×10-6mol/L呈良好的线性关系，检测下限为 5.2×10-10mol/L 。结论所构建的DNA四面体探针修饰的电化学生物传感器实现了对埃博拉病毒核酸的灵敏、特异检测

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研究报道

美海军航空医学研究现状分析

刘鹏年,王松俊

2016, 40(7): 0-0.

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目的：分析美海军航空医学研究现状，获取相关研究热点。方法：以美海军航空医学研究实验室1975年至2010年发表的科研文献为数据统计源，对发表的研究论文数量进行计量分析。结果：美海军航空医学研究的主题、发文去向、核心作者等有明显的规律。结论：发文规律对了解美海军航空医学相关研究进展具有重要的参考价值，美海军航空医学未来在向无人机操作员医学保障等方向发展。

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离子交换层析分离纯化人结合珠蛋白的研究

yanjingjing

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要]目的：探索通过离子交换层析从Cohn组分Ⅳ分离纯化人结合珠蛋白（Haptoglobin，Hp）的方法，并对纯化产物进行初步鉴定及活性分析。方法：组分Ⅳ沉淀溶解稀释后经利凡诺络合沉淀，收集上清并用50%硫酸铵进行沉淀，沉淀重溶后用Q Sephrose Fast Flow层析分离纯化得到目的蛋白。然后利用SDS-PAGE电泳及Western Blotting对目的蛋白进行鉴定，并利用Native-Page方法测定纯化产物的活性。结果：Cohn组分Ⅳ经过利凡诺络合及盐析处理后能够有效去除部分杂蛋白，并使目的蛋白富集。利用离子交换层析方法从Cohn组分Ⅳ中纯化得到产物的主要为Hp2-2，SDS-PAGE电泳显示Hp纯度较好，Western Blotting分析进一步证明利用该方法成功分离得到目的蛋白Hp，且利用Native-Page方法测得目的蛋白活性为2.8U/ml。结论：利用该方法从组分Ⅳ沉淀中成功分离得到人结合珠蛋白，该方法简单，易于放大生产，具有较好应用前景。 [关键词]结合珠蛋白Cohn组分Ⅳ纯化鉴定

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含银海藻酸盐敷料理化性能及其抗菌性能的研究

李小军

2016, 40(7): 0-0.

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摘要:目的: 目的: 探索含银海藻酸敷料的理化性能、生物安全性及抗菌活性。方法: 通过扫描电子显微镜(SEM)等实验方法对海藻酸盐含银离子敷料进行形貌及理化特征分析；通过MTT法，检测敷料的生物安全性；结合体外抑菌实验，研究敷料的抗菌效果。结果: 与海藻酸钙敷料相比，3种不同含量的银离子敷料透气率无显著差异（P＞0.05）；银离子浓度越高，其溶胀比率越高，吸水能力越强，降解愈慢；MTT实验结果显示细胞毒性较低；体外抑菌实验证实银离子敷料对革兰氏阳性菌、阴性菌均具有良好的抑菌作用，同时显示银离子浓度愈高，其抑菌效果愈好。结论：含银海藻酸盐敷料具有良好的生物相容性和抗菌活性，在创面愈合治疗中具有潜在的应用前景。

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基于表面增强拉曼散射的血清指纹谱检测方法研究

郭晶

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要] 目的对基于表面增强拉曼光谱检测血清指纹谱的实验条件进行优化。方法以正常人血清为例，银胶溶液为活性基底，分别检测不同血清用量（2.5-500 μl）、不同孵育时间（10-30 min）、不同孵育温度（4 ℃、室温、37 ℃）及不同血清处理方法（萃取、去蛋白）的增强拉曼信号。结果及结论血清用量不宜超过50 μl，与增强基底材料的比例1:1或5:1均可；孵育时间在10-30 min均可；孵育温度为4 ℃、室温、37 ℃均可；血清直接与增强基底混合信号效果极强，无需进行萃取、去蛋白等处理方法。 [Abstract] Objective To optimize the experiment condition of Surface-enhanced Raman spectroscopy detection of serum fingerprint spectrum. Methods Normal human serum is utilized as the sample and Ag nanoparticle is utilized as the active substrate. Then the enhanced signal of different serum dose(2.5μl to 500μl)，incubation time(10 minutes to 30 minutes) and temperature(4 ℃，room temperature and 37 ℃)，and different treatment(extraction and protein removal) is detected. Results and Conclusion Serum dose should not be more than 50 μl and the ratio is 1:1 or 5:1.The incubation time is from 10 minutes to 30 minutes and the incubation temperature is between 4 ℃and 37 ℃.The signal of samples mixed with active substrate directly is stronger than those of samples which were extracted or protein removed.

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睡眠时间对2型糖尿病患者心理状态与生存质量的影响分析

朱元媛

2016, 40(7): 0-0.

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目的睡眠时间可能是影响2型糖尿病患者心理状态和生存质量的因素之一。本研究分析2型糖尿病患者睡眠时间现状，探讨睡眠时间对其心理状态与生存质量的影响。方法采用便利抽样法于2014年4月至2015年4月在江苏省中西医结合医院抽取365例2型糖尿病患者，以睡眠时间6h为切点将患者分为两组，使用一般情况调查表、世界卫生组织生存质量测定量表简表（World Health Organization Quality of Life-BREF, WHOQOL-BREF）、中文版糖尿病痛苦量表（Diabetes Distress Scale, DDS）、一般自我效能量表（General Self-Efficacy Scale, GSES）开展横断面调查。采用两独立样本t检验、检验、Mann-Whitney U检验、一元线性回归进行统计分析。结果 365例2型糖尿病患者平均睡眠时间为7.03小时，其中睡眠时间<6h的有109例，与睡眠时间≥6h组患者相比，其生存质量、一般自我效能均较低，而糖尿病痛苦较高，差别有统计学意义（p<0.05）。回归分析显示：睡眠时间是生存质量（β=0.117,P=0.025）、糖尿病痛苦（β=-0.151,P=0.004）、一般自我效能(β=0.110,P=0.039)的影响因素，而睡眠时间对HbA1c无影响（β=-0.026,P=0.627）。结论睡眠时间对2型糖尿病患者的心理、生活方面有较大影响，医护人员应重视患者的睡眠情况，积极改善其心理状态和生存质量。

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实验研究

利用凝胶过滤层析技术分离人源γ-微管环形复合物

陶清萍,张部昌,曹诚,刘萱

2016, 40(7): 0-0.

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目的：分离人源γ-微管蛋白环形复合物（γ-tubulin ring complex, γTuRC）。方法：利用凝胶过滤层析技术分离人源293FT细胞裂解产物；利用免疫印迹检测γTuRC和γ-微管蛋白小复合物（γ-tubulin small complex, γTuSC）所在的洗脱组份，实现复合物与游离蛋白分离。结果：γTuRC复合物组成型组份γ-微管蛋白（γ-tubulin）、γ-微管蛋白复合物蛋白2（γ-tubulin complex protein 2, GCP2）、GCP3和GCP4蛋白在第4洗脱组份被洗脱富集，该组份分子量约为2,000 kDa；γTuSC复合物组成型组份γ-tubulin、GCP2、GCP3蛋白在第14洗脱组份被洗脱富集，该组份分子量约为310 kDa；未掺入的游离蛋白组份在第18洗脱组份后被洗脱下来。非变性凝胶电泳可在相应组份中检测到γTuRC和γTuSC复合物。结论：γTuRC复合物在凝胶过滤层析第4洗脱组份得到富集；γTuSC复合物在第14洗脱组份得到富集。上述复合物与游离蛋白成功分离，可用于后续复合物组装研究。

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综述

Docker技术在生物信息学中的应用

佟凡

2016, 40(7): 0-0.

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随着高通量测序、蛋白质组学等生物技术的迅猛发展，生物医学数据、生物信息学工具及分析应用需求均呈现出多样性和复杂性的特点。传统的生物信息计算环境如专用工作站、虚拟机等已无法较好地适应这一情况。Docker作为一种新兴的容器技术，具有轻量、开放和安全的优点，为分析和处理生物大数据提供了一种新的解决方案，得到越来越多生物信息学开发和应用人员的关注与使用。本文针对大数据时代下生物信息学工具开发、部署、应用的要求和特点，分析Docker技术在生物信息学中应用的优势，介绍了该技术在生物信息学中具体的应用案例，探讨其有待改进的方面以及未来发展趋势。

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细菌的噬菌体感染耐受机制研究进展

宋亚军,肖丽生,祁芝珍

2016, 40(7): 0-0.

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噬菌体是能够感染细菌的病毒，在自然界中分布十分广泛。随着发酵工业中的噬菌体污染和以及多重耐药菌株的出现，噬菌体越来越得到研究人员的关注。噬菌体感染细菌包括吸附、注入、复制、组装、释放等环节；细菌在与噬菌体的共进化过程中，针对这些环节产生了不同的抗感染机制。本文围绕抗吸附、超感染排斥、限制修饰系统、CRISPR系统、流产感染、组装感染等细菌的噬菌体感染耐受机制研究进行了简要综述。

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DNA依赖蛋白激酶催化亚基在电离辐射诱发HeLa细胞自噬中的作用

韩艳勤

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要] 目的了解DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）在电离辐射诱发细胞自噬中的作用。方法通过慢病毒载体（pSicoR）构建DNA-PKcs小干扰RNA（shRNA）表达载体，并转染HeLa细胞敲低DNA-PKcs表达。CCK-8实验检测细胞增殖活性及细胞放射敏感性，免疫印迹检测自噬相关蛋白表达，免疫荧光实验检测自噬标志物GFP-LC3的表达。结果成功构建shRNA敲低DNA-PKcs表达的HeLa细胞模型，通过该细胞模型观察到抑制DNA-PKcs蛋白表达导致细胞增殖能力降低、放射敏感性增高。P62和LC3蛋白表达变化，以及细胞内GFP-LC3免疫荧光斑检测结果显示，DNA-PKcs基因敲低后，明显增加X射线诱发细胞自噬。抑制DNA-PKcs导致哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR第2481位丝氨酸磷酸化水平降低。结论抑制DNA-PKcs增强受照射宫颈癌HeLa细胞的自噬及放射敏感性，mTOR信号通路可能参与DNA-PKcs对自噬的调节作用。 [关键词]DNA依赖蛋白激酶催化亚基；电离辐射；自噬；哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)； The Role of DNA-PKcs in Autophagy Induced byIonizing Radiation [Abstract] Objective To investigate the effect of DNA-PKcs on autophagy induction by ionizing radiation. Methods The cell model of knocking-down DNA-PKcs expression was constructed by transfecting HeLa cells with a pSicoR-based lenti-virus vector of expressing DNA-PKcs specific shRNA.Cellular growth activity andradiosensitivitywas detected by CCK-8 assay. The expression of autophagy related proteinswas detected by Westernblotting hybridization. Autophagy was alsodetected by monitoring the autophagic marker GFP-LC3 puncta per cell under immunofluorescent microscope. Results A cellular model of knocking-down DNA-PKcs expression was successfully generated by transfecting the specific shRNA against DNA-PKcs. Depression of DNA-PKcssignificantly decreased the growth activity of HeLa cells and increased the cellular sensitivity to ionizing radiation.Both the expression changes of P62 and LC3 proteins and immunofluorescent GFP-LC3 puncta observation indicated that knocking-down DNA-PKcs prompted the induction of autophagy by ionizing radiation. Moreover, inactivation of DNA-PKcs led toadecreased phosphorylation of mammalian target of rapamycin (mTOR) at S2481 site.Conclusion Depression of DNA-PKcs expression prompts the induction of autophagy by ionizing radiation and cellular radio-sensitivity. mTOR signaling may involve in the regulation ofDNA-PKcs on autophagy processing. Key words DNA-PKcs; ionizing radiation; autophagy; mTOR

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PM2.5通过诱导AP-1活化介导支气管上皮细胞中VEGF的诱导表达和炎性损伤效应

徐秀段

2016, 40(7): 0-0.

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［摘要］目的探讨细颗粒物（particulate matter 2.5, PM2.5）是否可通过诱导AP-1活化介导支气管上皮细胞（bronchial epithelial cell, Beas-2B）中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的诱导表达及炎性损伤效应。方法体外培养Beas-2B细胞，采用双荧光素酶报告基因法检测细胞中AP-1的诱导活化水平和和VEGF基因启动子的转录活化水平；Western法检测AP-1的两个组成亚基c-Jun、ATF2的诱导活化水平及VEGF的蛋白表达水平。结果 PM2.5可显著上调Beas-2B 细胞中转录因子AP-1的转录激活活性；同时诱导AP-1组成亚基c-Jun和ATF2活化。 Beas-2B细胞中转染c-Jun或ATF2 siRNA后，可抑制AP-1的转录激活活性，同时VEGF的转录活化和蛋白表达也显著下调。结论 PM2.5通过活化AP-1诱导支气管上皮细胞中VEGF表达及炎性损伤效应。

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人-裸鼠乳腺癌肿瘤移植模型的构建及其肿瘤浸润髓系细胞的分离

xingwang

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要]目的人-裸鼠乳腺癌肿瘤移植模型的构建及其肿瘤浸润髓细胞的分离方法将pHAGE-EF-ZsG-DEST质粒与病毒包装质粒pMD2.G和psPAX2首先通过磷酸钙转染方式包装带绿色荧光的慢病毒，再利用包装好的慢病毒感染BT474细胞，通过流式分选筛选阳性细胞，扩大培养后，种植于裸鼠乳腺脂肪垫，应用活体荧光成像仪和体外测量肿瘤大小对人-裸鼠肿瘤移植模型的构建效果进行评价；再通过机械法分离该小鼠模型的肿瘤浸润髓系细胞。结果筛选出了带绿色荧光的BT474稳定株，种植于裸鼠乳腺脂肪垫，构建了人-裸鼠肿瘤移植模型，并将其肿瘤浸润髓系细胞分离出来。结论成功分离出了肿瘤浸润髓系细胞，为后续研究肿瘤浸润髓系细胞的功能奠定了基础。

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综述

14q32 miRNA基因簇与肝细胞癌的发生发展

闫攀登

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要]肝细胞癌（简称肝癌；hepatocellularcarcinoma，HCC）是全球范围内发生率和高死亡率较高的恶性肿瘤之一。微小RNA（microRNA，miRNA）是一类内源性、非编码、高度保守的单链小分子RNA，主要在转录后水平抑制靶基因的表达。有些位置相近的miRNA基因在染色体上成簇排列，在一个多顺反子内形成miRNA基因簇，通常以共表达的形式协同作用。在人类14号染色体长臂端的14q32印记基因区域约215 Kb的基因组范围内，聚集了52个miRNA基因。已有研究发现此miRNA基因簇的异常表达与肝癌的发生发展密切相关。本文概括了14q32 miRNA基因簇的结构特点，并对其在肝癌发生发展过程中所发挥的作用进行了综述。

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颈椎后路单开门leverage钛板固定术治疗多节段脊髓型颈椎病的疗效研究

仲伟涛

2016, 40(7): 0-0.

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摘要：[目的]探讨颈椎管单开门椎管扩大成形术及leverage固定治疗多节段脊髓型颈椎病的临床疗效。[方法]回顾2011年03月至2015年5月期间，我科采用颈椎管单开门椎管扩大成形leverage固定术治疗多节段脊髓型颈椎病的患者25例情况，男性16例，女性9例，年龄60.6±9.9岁。所有病人随访时均行X线、CT及MRI检查，记录随访时患者临床症状及体征变化。和住院时手术前相应的资料分析研究，使用日本骨科协会（Japanese orthopaedic association，JOA）评分，颈肩疼痛视觉模拟评分 ( visual analogue scale，VAS ) 评分法，对术前、术后神经功能改善情况、颈椎曲度以及颈椎管的变化做了评分记录。[结果]随访6-24个月，随访时25例患者神经功能均得到明显改善，术前JOA评分（10.16±1.35）与术后评分（14.28±1.15）有明显差异（P＜0.05），有统计学意义，平均改善率61.24%。术前、后颈椎曲度无明显变化（术前17.15°±6.25°；术后17.93°±5.75°）变化无统计学意义（P＞0.05）。术前VAS评分（6.68±1.12）与术后（2.32±0.84）差异有统计学意义（P＜0.05）。术前及末次随访颈5椎管矢状径分别为（9.22±2.01）mm、（15.64±2.08）mm差异有统计学意义（P＜0.05），椎管平均扩大率为68%。随访期间，25例患者均未发现内固定松动、断裂及再关门现象。[结论]leverage微型钛板能有效维持椎管的扩大状态，和维持颈椎曲度。有利于改善患者的神经症状，leverage分节段固定的特点，影响颈椎运动功能较小，可减轻术后颈部轴性症状的发生率，临床应用疗效较好。

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鼻用皮质类固醇激素联合抗组胺药对变应性鼻炎疗效的系统评价

简洁君

2016, 40(7): 0-0.

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摘要目的系统评价鼻内喷雾皮质类固醇激素联合口服或局部喷雾抗组胺药对变应性鼻炎的疗效。方法计算机检索PubMed，EMbase，Google Scholar，The Cochrane Library，并手工检索相关期刊，全面收集鼻用皮质类固醇激素联合抗组胺药治疗变应性鼻炎的随机对照试验，检索时限均为建库至2015年4月。由2位评价员按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后，采用Revman 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入10个研究，共计6568例患者。定性分析显示：相对于口服抗组胺药组或安慰剂组，联合药物治疗在改善临床症状方面有着更好的疗效。Meta分析结果显示：2个研究合并结果后联合治疗和单独鼻内激素治疗在控制症状上无明显统计学差异[WMD=-0.20, 95%CI（-0.38，-0.01），P=0.04]；6个随机对照试验累积Meta分析显示在提高总的鼻症状评分方面联合治疗方案分别优于单独鼻内皮质类固醇激素治疗[WMD=-1.16， 95%CI（-1.49，-0.83）, P<0.00001]、单独鼻内抗组胺药治疗[WMD=-1.73， 95%CI（-2.08，-1.38），P<0.00001]及安慰剂组[WMD=-2.81, 95%CI（-3.16，-2.47）, P<0.00001]。结论对于变应性鼻炎，在减轻鼻部症状方面，鼻内皮质类固醇激素联合口服抗组胺药和单独鼻内皮质类固醇激素疗效无明显差异，但优于单独口服抗组胺药物和安慰剂组。鼻部皮质类固醇激素联合鼻部抗组胺药明显的优于其他单独给药的治疗方式，是控制变应性鼻炎鼻部症状的有效治疗措施。

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实验研究

利用CRISPR/Cas9系统构建H22细胞GP73基因敲除稳定株及功能鉴定

chen陈健康

2016, 40(7): 0-0.

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[摘要] 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除鼠源的肝癌细胞H22中的GP73基因，构建H22细胞GP73基因敲除的稳定细胞株。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则，设计两条特异性识别GP73基因启动子的上下游sgRNA，利用载体pX459质粒，构建两对重组真核表达质粒。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转染至H22细胞内，使用嘌呤霉素加压筛选稳定敲除GP73的H22细胞株，用免疫印迹检测重组质粒对内源GP73的敲除效果。用MTT实验检测GP73被敲除后对细胞增殖能力的影响，再利用划痕实验检测细胞的迁移能力影响。结果免疫印迹结果说明敲除GP73基因的鼠源H22细胞株内无GP73蛋白的表达；并且GP73被敲除后，H22细胞的增殖能力和迁移能力减慢。结论通过CRISPR/Cas9系统获得了靶向GP73基因的重组质粒，并且筛选出了稳定干扰GP73表达的细胞株，从而为探讨GP73在肝癌发生中的作用奠定基础。

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