军事医学

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装甲车辆乘员作业姿态测量系统的设计与实现

柴渭莉

2016, 40(4): 0-0.

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目的设计用于装甲车辆的乘员作业姿态测量系统。方法采用微机电系统（MEMS）传感器采集3名乘员头部、颈部、躯干、四肢等重要部位姿态参数，采用红外追踪辅助测量校准驾驶员双臂姿态参数，利用无线收发器将数据传输至控制单元进行预处理，然后发送至数据采集器进行存储，事后数据传输给后端计算机，利用软件系统进行人体姿态参数处理与显示。结果与结论系统可完成乘员作业姿态参数的测试，能够为下一步开展乘员运动学和动力学的分析提供手段。

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抗辐灵活性成分对微波辐射致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用研究

陈俊俊

2016, 40(4): 0-0.

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目的观察抗辐灵活性成分黄芪总苷、赤芍总苷和丹参酮对微波辐射致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。方法采用神经生长因子（nerve growth factor，NGF）诱导的PC12 细胞为模型，分别给予1μg/ml、3μg/ml、9μg/ml黄芪总苷、赤芍总苷、丹参酮作用48h后，经30mW/cm2微波辐射6min，于辐射后即刻采用倒置相差显微镜观察PC12细胞形态变化，四甲基偶氮唑盐比色（methylthiagolyl tetragolium，MTT）法测定细胞生存率, 活性氧探针（DCFH-DA）法测定细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平，硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid，TBA）法测定细胞脂质过氧化代谢产物丙二醛（malonydialdehyde，MDA）含量。结果黄芪总苷、赤芍总苷、丹参酮作用后经微波辐射各组PC12细胞形态未见明显差异。辐射后6h，辐射组PC12细胞较假辐射组生存率明显降低(P<0.01)；与辐射组比，3μg/ml黄芪总苷给药组PC12细胞生存率明显提高(P <0.01)。辐射后0h和48h，辐射组PC12细胞ROS、MDA水平明显升高(P<0.01)，与辐射组比，各药物预处理组PC12细胞ROS、MDA水平均显著降低(P<0.05)。结论抗辐灵活性成分黄芪总苷、赤芍总苷、丹参酮能改善微波辐射对PC12细胞的损伤，其保护作用可能是通过清除氧自由基和减轻氧化应激损伤来实现的。

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利用骨髓间充质干细胞膜片原位构建“三明治”样组织工程牙周膜的实验研究

LiuCui

2016, 40(4): 0-0.

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目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）膜片与胶原膜构建的“三明治”样结构植入体内后牙周膜的再生情况。方法：制备BMSCs细胞膜片，与胶原膜构建夹层结构复合于牙根表面，植入原位生长，分别于4w和12w取材，利用X片、HE和天狼星红染色观察牙周膜的再生情况。结果：相比单纯胶原膜组和空白对照组，实验组在牙根与牙槽骨间形成了清晰的软组织间隙，且有类Sharpey’s纤维存在，即形成了功能性牙周膜。结论：细胞膜片-胶原膜-细胞膜片的“三明治”样夹层结构可以较好地促进牙周膜再生。

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实验研究

人体着陆冲击安全性研究方法分析

李毅,王学友,贾海军,武海明,刘晓峰,柴渭莉,张伟

2016, 40(4): 0-0.

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分析了人体着陆冲击响应的特点和用于人体着陆冲击安全性研究的几种试验对象的特点，对比了选择不同人体着陆冲击试验对象的相应研究方法的优劣，分析了国内外与人体着陆冲击研究相关的试验结论和评价准则。结果表明：各研究结果在表达方式和量值上存在差异，几种研究方法所选的人体替代物在试验中存在一定不足，亟需对影响人体着陆冲击试验结果的载荷性质、个体特征、试验对象姿态和防护状况等做出规定，仍需针对不同载运工具的特点开展与之相匹配的作业人员冲击耐受性和防护方法研究。

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军队医院军人医疗经费SD模型研究

宁元宏

2016, 40(4): 0-0.

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目的：探索系统动力学模型在军队医院军人医疗经费研究中的应用；方法：依据系统动力学原理，筛选模型主要变量，确立主要函数关系式，建立军队医院军人医疗经费的系统仿真模型。结论：系统动力学模型应用于军队医院军人医疗经费系统研究的效果良好，可以为后期军队医疗系统改革提供理论依据。

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中国与美国临床研究资源的对比分析

康迪

2016, 40(4): 0-0.

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临床研究资源作为各国参与生物医药高科技领域国际竞争的重要资源，在开展多中心临床研究，将基础研究成果转化为临床实践的过程中发挥着重要作用。中国人口众多、疾病种类丰富，美国临床研究相关政策法规完善。本文通过对中美两国的疾病资源、平台支持、监管环境等进行对比分析，提出利用临床研究资源的几点建议，为我国的临床研究提供参考借鉴。

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实验研究

HCMV潜伏感染状态下编码microRNAs的研究

宋鑫,张艳宇,邓江,肖军,吕丽萍,高博,马平,毕静媛,周锡鹏,许金波

2016, 40(4): 0-0.

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目的探索潜伏感染状态下HCMV所编码microRNAs（miRNAs），为研究miRNAs在HCMV病毒学和潜伏感染机制奠定基础。方法通过HCMV感染THP-1细胞构建HCMV潜伏感染细胞模型，采用高通量Solexa测序平台对其深度测序，并利用RNAFold等生物信息学软件进行二级结构预测和命名。结果 HCMV在潜伏感染状态表达了miR-US25-2-3p、miR-US25-2-5p、miR-UL112、miR-US25-1、miR-UL22A以及长度为25bp的编号为PC-5p-148467的miRNA，对PC-5p-148467进行系列分析，将其命名为hcmv-miR-US33as-5p。结论在潜伏感染状态下，HCMV亦可编码多种miRNAs。

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实验研究

评价嗜麦芽窄食单胞菌灭活全细胞的免疫保护作用

钱垚

2016, 40(4): 0-0.

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目的：评价嗜麦芽窄食单胞菌灭活全细胞的免疫原性和对小鼠的免疫保护性。方法：本研究利用甲醛制备嗜麦芽窄食单胞菌灭活全细胞来免疫小鼠，检测其抗体效价达到要求后，通过体外健康人血调理杀伤试验以及体内攻毒试验评价灭活全细胞的保护作用。结果：免疫组在第二次加强免疫后血清中特异性IgG滴度显著增加，并且其抗血清在体外具有明显的调理杀伤能力；在体内的攻毒试验中也具有显著的保护作用。结论：灭活的嗜麦芽窄食单胞菌全细胞可以刺激诱导动物产生体液免疫应答，使小鼠产生有效的免疫保护作用，为进一步探讨嗜麦芽窄食单胞菌全细胞疫苗奠定了良好的实验基础。

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表面增强拉曼光谱在人类血清中的应用

郭晶

2016, 40(4): 0-0.

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表面增强拉曼光谱（Surface-Enhanced Raman Scattering, SERS）近几年来在物理、化学乃至生物医学方面应用广泛。由于其具有较高的灵敏度、特异性，可用来检测人体血清成分的改变。血清中的各种生物分子包括蛋白质、脂质、核酸等都有自己的特征拉曼光谱，因此不同的拉曼位移、谱带强度及宽度，在分子水平上反映了人体血清中不同的细胞代谢异常。本文对SERS的研究概况以及在多种疾病血清检测中的最新研究进展进行了总结和进一步的展望。

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“生物黑客”安全问题分析及对策研究

李洪军

2016, 40(4): 0-0.

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随着现代生物科技的发展和基因研究手段的改进，一些生物学业余爱好者具备了从事基因研究的条件，生物黑客现象逐渐进入人们的视野，并带来了新的安全问题。本文结合黑客的相关观点，在探讨生物黑客概念和产生根源的基础上，分析生物黑客对国家安全的影响，并提出防范生物黑客袭击的一些措施，为辩证客观地认识生物黑客提供理论参考和借鉴。

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美陆军前沿救治力量装备编配分析及启示

Zhangkai

2016, 40(4): 0-0.

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对美陆军前沿救治单位力量编配的模块化、网络赋能、全维防护、高度机动等特点进行了系统分析，对其编配的主要装备的作用和性能进行了简要陈述，提出借鉴性启示，以期对我军卫生装备建设提供参考。

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A型肉毒毒素轻链多步纯化及其酶活活性研究

卢晓雪

2016, 40(4): 0-0.

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［摘要］目的：利用基因工程方法原核表达N-His标签的BoNT-ALC蛋白，多步纯化获得高纯度蛋白，并对其金属蛋白酶活性进行鉴定。方法：以A型肉毒毒素为模板，构建重组表达载体pET22b-ALC，转化BL21(DE3)，诱导蛋白表达，采用镍柱亲和纯化、阴离子交换以及分子筛纯化获取高纯度目的蛋白；通过体外切割特异性底物SNAP-25实验进行酶活性研究。结果：获得高纯度的BoNT-ALC蛋白, 对金属蛋白酶活性进行了验证。结论：该纯化方法获得的蛋白纯度高、均一性好，且具有很好的酶活性，为后续研究奠定基础。

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实验研究

抗A型肉毒毒素鼠源性单克隆抗体的制备和鉴定

赵巧林,陆璐,毕波,景爱霞,汪建华,张惟材,熊向华

2016, 40(4): 0-0.

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[摘要] 目的制备与鉴定抗A型肉毒毒素重链C端（heavy chain of botulinum neurotoxin serotype A, BoNT/AHc）特异性鼠单克隆抗体。方法通过纯化BoNT/AHc抗原、免疫BALB/c小鼠并建立杂交瘤细胞来制备鼠单抗，用ELISA、Western实验和抗体分型试剂盒进行分析鉴定，并通过ELISA检测鼠单抗与BoNT/AHc突变体结合，初步鉴定其在BoNT/AHc的结合表位。结果得到纯度较高的BoNT/AHc抗原，制备了4株特异性鼠单抗1A4、3H3、3H7、5H8，间接ELISA结果显示单抗效价均高于3.0×103，Western结果显示单抗均能与BoNT/AHc特异性结合，抗体亚型鉴定结果为1A4、3H7属于IgG1(Κ)，3H3属于IgM(Κ)，5H8属于IgG2b(Κ)，叠加ELISA实验表明4株单抗抗原识别表位相近，用ELISA检测单抗与BoNT/AHc突变体结合实验结果初步确定了4株单抗与BoNT/AHc的结合表位。结论对抗A型肉毒毒素鼠源性抗体完成了制备和鉴定，为肉毒毒素中和抗体的开发与阐明中和抗体的表位奠定基础。 [关键词] A型肉毒毒素重链C端；单克隆抗体；中和抗体；突变体；表位

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实验研究

SM-1通过激活Procaspase-3诱导人胃腺癌BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用

yuanhongzhong

2016, 40(4): 0-0.

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目的探讨Procaspase-3激活剂SM-1体内外对人胃癌BGC-823细胞的抗肿瘤作用及初步机制。方法体外MTT法测定SM-1对BGC-823细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪分析不同浓度的SM-1对BGC-823细胞凋亡率的影响，分别用Western blot和RT-PCR测定SM-1对Caspase-3的蛋白和Procaspase-3 mRNA表达的影响，采用裸鼠皮下移植瘤模型评价SM-1体内抗肿瘤作用。结果 SM-1体外呈剂量依赖性的抑制BGC-823细胞增殖并诱导其凋亡；SM-1暴露48h后，Caspase-3蛋白和Procaspase-3 mRNA表达水平增加；在300mg/kg剂量下，SM-1对 BGC-823皮下移植瘤生长具有明显的抑制作用，其抑制率达到56.3%（P<0.05）。结论 SM-1体内外对BGC-823细胞及皮下移植瘤具有较好的抑制作用，其机制主要通过激活Procaspase-3诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。

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放疗介导的抗肿瘤免疫效应研究进展

刘超,吴世凯

2016, 40(4): 0-0.

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放疗作为恶性肿瘤的重要治疗手段之一，除细胞毒性杀伤作用外，它所介导的抗肿瘤免疫效应越来越被人们所重视。这种免疫效应不仅能对放疗野内病灶进行杀伤，对野外肿瘤细胞的消灭也具有一定作用。放疗联合免疫治疗已成为一种有效的全身治疗手段，具有广阔的应用前景。本文将对放疗单独应用及与免疫治疗联合应用所产生的免疫效应及相关机制作一综述。

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实验研究

高尔基蛋白73参与炎症反应的分子机制研究

王翠

2016, 40(4): 0-0.

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[摘要] 目的通过研究GP73对炎症反应的影响，揭示其参与肿瘤发生发展可能的机制。方法基于TCGA数据库中肝癌患者的GP73与炎症因子NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α等基因表达的相关性的分析，推测GP73可能参与了炎症反应。依据数据分析结果设计细胞实验，构建过表达GP73的质粒和敲低GP73的siRNA，通过检测野生型、过表达和敲低表达GP73细胞系中NF-κB的转录活性以及炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α等基因的表达，来验证GP73在炎症反应中发挥的作用。结果 TCGA数据库分析结果提示临床肝癌患者的GP73基因表达与NF-κB、IL-1β、IL-16及TNF-α的表达均呈正相关性；细胞实验结果显示过表达GP73细胞系与野生型相比，细胞内NF-κB转录活性升高，而敲低GP73细胞系内NF-κB转录活性降低；过表达GP73细胞系与野生型相比细胞内IL-1β、IL-6及TNF-α的表达均升高。结论 GP73能够参与炎症反应，可能通过参与炎症反应而促进肿瘤的发生发展。

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实验研究

BPOZ抑制乳腺癌细胞系增殖的初步研究

wangpenghao

2016, 40(4): 0-0.

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［摘要］　目的　研究BTB/POZ（Broad Complex, tramtrack and bric a brac）/( poxviruses and zinc finger) 基因对乳腺癌细胞系增殖能力的影响。方法　以人脾脏cDNA文库为模板，pCMV-HA-Vector为载体，构建真核表达载体pCMV-HA-BPOZ；免疫印记实验鉴定重组蛋白（pCMV-HA-BPOZ）的表达；细胞生长实验检测BPOZ对细胞增殖能力的影响；平板克隆实验检测BPOZ对细胞生长能力的影响。结果　免疫印迹实验结果证实，构建的真核表达载体pCMV-HA-BPOZ能正确表达；过表达HA-BPOZ可显著抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长。结论　成功构建了真核表达载体pCMV-HA-BPOZ，并在细胞中成功表达；BPOZ可明显抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长能力，为我们进一步研究BPOZ在乳腺癌的发生发展中的作用打下基础。

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HGF基因修饰的胎盘间充质干细胞治疗兔肢体缺血的实验研究

肖凤君,黄晓东

2016, 40(4): 0-0.

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目的: 研究重组腺病毒(Ad-HGF)修饰的胎盘间充质干细胞在兔肢体缺血模型中促新生血管生成的作用。方法:临床上取足月产妇的胎盘组织，无菌取胎盘胎儿面中心区域，酶消化法分离干细胞，体外培养传代，感染Ad-HGF48小时后收集细胞用于治疗兔肢体缺血实验。左侧治疗组后肢缺血肌肉组织内多点注射总细胞数5×106Ad-HGF修饰的胎盘间充质干细胞，右侧对照组后肢缺血肌肉组织内注射生理盐水。结果:治疗后第14天腹主动脉穿刺行DSA造影检查，可见左侧肢体缺血治疗后微血管生成数明显多于未治疗右侧肢体缺血的微血管数，血管形成能力明显增强。HE染色后置光镜下观察显示治疗组毛细血管密度明显大于未治疗组（P<0.05）。Q-PCR检测后肢肌肉组织中VEGF、bFGF、HGF的表达明显升高（P<0.05）。结论:经A-HGF基因修饰的胎盘间充质干细胞能明显促进血管新生，加快局部缺血组织血流循环的重建，是治疗肢体慢性缺血的有效手段。

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LC-MS/MS同时测定比格犬血浆中美托拉宗和缬沙坦

陈美玲

2016, 40(4): 0-0.

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[摘要] 目的建立同时测定比格犬血浆中美托拉宗和缬沙坦的高效液相色谱串联质谱法。方法分析柱为 Agilent Poroshell 120色谱柱（2.1×30mm×2.7μm）。质谱采用电喷雾离子源（ESI），采用多反应监测（MRM），检测离子为正离子，分别选择m/z 366.2/259、436.2/291和423.4/207作为美托拉宗、缬沙坦和内标（氯沙坦钾）的检测离子对。结果美托拉宗、缬沙坦的线性范围分别为0.5～100ng/ml，5～5000ng/ml，相关系数R2分别为0.9937和0.9939，批内精密度分别在2.09%～8.85%和2.36%～13.12%之间,基质效应分别在87.73%～98.62%和99.03%～137.35%之间，回收率分别在75.74%～81.82%和83.89%～95.64%之间。结论本法操作简单、方法准确可靠、检测灵敏度高，可以用于复方美托拉宗缬沙坦速释片比格犬体内的药代动力学研究。

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低氧预处理脐带间充质干细胞的旁分泌对成骨细胞功能的影响

徐晓丽

2016, 40(4): 0-0.

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目的研究低氧预处理人脐带间充质干细胞（UCMSCs）的旁分泌作用对人成骨细胞（MG-63）的增殖、迁移及成骨的影响。方法实验组分为三组，一组为低氧培养基组，用低氧预处理人脐带间充质干细胞，获取脐带间充质干细胞的条件培养基（UCMSCs-CM）培养MG-63；另一组为常氧培养基组，常氧条件培养人脐带间充质干细胞，获取脐带间充质干细胞的条件培养基培养MG-63；另设DMEM对照组，用DMEM培养基培养MG-63。分别于培养1、3、5天后用四氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖情况，记录各组的吸光度值进行统计学分析；用划痕法检测细胞在不同培养条件下的迁移能力；分别培养至细胞达80%融合时进行成骨诱导，于诱导21天后进行茜素红染色检测各组成骨钙结节的形成。结果 MTT法检测结果为低氧培养基组及常氧培养基组在培养1、3、5天后的吸光度值均大于DMEM对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），其中低氧培养基组大于常氧培养基组，差异有统计学意义（p＜0.05）；低氧培养基组及常氧培养基组细胞迁移速度大于DMEM对照组，划线72h后低氧培养基组细胞间隙基本合拢，常氧培养基组细胞间隙接近合拢；成骨诱导21天后低氧培养基组成骨钙结节形成最多，常氧培养基组次之，DMEM对照组最少。结论低氧预处理UCMSCs可增强其旁分泌功能，促进成骨细胞MG-63的增殖、迁移及成骨。

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实验研究

Apak稳定敲除细胞系的建立及其p53活性和凋亡水平的变化

梅兴沙

2016, 40(4): 0-0.

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[摘要] 目的利用CRISPR/Cas9慢病毒系统在人结肠癌细胞（HCT116细胞）中建立稳定及永久性Apak敲除细胞系，并检测Apak敲除后细胞部分生物学活性p53活性和凋亡水平的变化。方法构建lentiCRISPR v2-sgRNA Apak敲除质粒，进行慢病毒包装，感染HCT116细胞，嘌呤霉素筛选出阳性克隆。通过蛋白质免疫印记检测Apak蛋白水平，筛选得到Apak稳定敲除的细胞系。分别通过报告基因实验、流式细胞术和克隆形成实验测定Apak稳定敲除细胞系中p53活性、细胞凋亡率和克隆形成能力。结果通过测序证明lentiCRISPR v2-sgRN A Apak敲除质粒正确，蛋白质免疫印迹实验证实Apak敲除细胞系中Apak表达缺失。在Apak敲除细胞系中p53的转录活性增强，Apak敲除细胞凋亡增加、克隆形成能力增强。结论获得Apak稳定敲除细胞系，便于后期Apak功能的研究。

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