本期目录

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• 2024年, 第48卷, 第5期
  刊出日期：2024-05-25

    

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  论著
  综述
  
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论著
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  论著

  国外军人日晒伤防护保障及启示

  邹赢锌, 桑文娟, 马丽, 陈伟

  2024, 48(5): 321-324. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.001

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  针对军队特殊作业环境官兵皮肤易晒伤的情况,通过国外文献资料查阅和情报检索,系统梳理并研究国外军人日晒伤防护现状和保障能力及国外军队的防护理念、关注方向和优势经验等,为军队日晒伤保障能力的生成和提高提供参考依据。军队日晒伤防护保障应充分借鉴外军优势经验,加强官兵日晒伤防护健康教育、拓展军队已有的防晒制剂产品的可获得渠道、促进军队极端特殊环境适用的防晒装具和制剂产品研发等。
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  论著

  基因修饰的干细胞外泌体水凝胶治疗放射性皮肤损伤的实验研究

  任博媛, 李强, 靳嘉岩, 王一晨, 丁泓帆, 靳继德

  2024, 48(5): 325-333. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.002

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  目的 研究肝细胞生长因子修饰的牙髓干细胞外泌体水凝胶对放射性皮肤损伤的促愈合作用。方法 利用超速离心法分离提取外泌体,分别通过纳米颗粒跟踪分析法、扫描电镜和Western印迹法对外泌体的粒径、形态和标志蛋白进行分析。采用CCK-8、划痕实验和流式细胞术评估外泌体对辐射损伤皮肤细胞的作用。制备温敏型泊洛沙姆水凝胶,采用CCK-8法测试其生物相容性。建立小鼠放创复合伤模型,应用外泌体水凝胶进行治疗,通过创面愈合情况、创面组织HE染色和Masson染色评价创面愈合效果和治疗效果,通过Tunnel染色检测创面细胞凋亡情况,通过丙二醛含量和过氧化物酶活性检测评估创面氧化应激情况,对其作用机制进行初步分析。结果 外泌体直径范围为30~150 nm,扫描电镜下呈圆盘状囊泡,CD9、CD63和TSG101表达阳性。细胞实验结果显示,外泌体能显著促进辐射损伤皮肤角质细胞和成纤维细胞的增殖和迁移,减少细胞凋亡。肝细胞生长因子修饰增强外泌体的作用。泊洛沙姆水凝胶显示出良好的温敏性和生物相容性。动物实验结果显示,外泌体治疗显著加快了小鼠放创复合伤的愈合,并抑制炎性浸润、减轻胶原沉积,肝细胞生长因子修饰外泌体促创面愈合作用最强,其促创面愈合的作用机制可能与促细胞增殖、减少细胞调亡和氧化应激有关。结论 成功制备了一种新型的基因修饰的干细胞外泌体水凝胶,并证明了其在放射性皮肤损伤治疗中的有效性,为临床放射性皮肤损伤治疗提供了一种新的策略。
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  论著

  达泮舒腈（OLT1177）减轻急性放射性肺损伤及机制初探

  慈维昊, 李亚婷, 徐立涛, 陈晨, 杨晓明, 任广明

  2024, 48(5): 334-339. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.03

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  目的 研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体抑制剂达泮舒腈（OLT1177）对急性放射性肺损伤的治疗作用及其机制。方法 将小鼠分为对照组、注射OLT1177组、照射组及照射后注射OLT1177组, 采用单次 22 Gy 全肺 ⁶⁰Co 射线放射建立急性放射性肺损伤模型。建模6 h后腹腔给药OLT1177 （100 mg/kg,1次/d）。连续给药14 d后,取小鼠肺组织并称重,计算并统计小鼠肺系数;苏木素-伊红染色（HE）和F4/80免疫组化染色观察小鼠肺组织病理变化和炎性细胞浸润情况;实时定量PCR（qPCR）检测肺组织NLRP3、白细胞介素-1β（IL-1β）等mRNA的转录水平;流式微球阵列（CBA）蛋白定量技术检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等炎性因子的分泌;Western印迹检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）和IL-18蛋白的激活。结果 放射导致小鼠肺组织急性炎症的发生,表现为肺组织水肿以及肺泡结构破坏,炎性细胞浸润增多,肺组织炎症相关基因NLRP3、IL-1β、TNF-α、IL-6表达及血清TNF-α、IL-6等炎症因子水平增加。用OLT1177处理可以显著改善放射引起的上述症状。OLT1177抑制放射导致的NLRP3炎症小体下游Caspase-1及其底物IL-18的剪切活化。结论 OLT1177显著减轻小鼠急性放射性肺损伤,可能是通过抑制放射导致的NLRP3炎症小体活化。
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  论著

  白细胞与血小板计数比值在放射诱导小鼠胸腺淋巴瘤早筛中的价值

  蒙若曦, 欧阳张翼, 善亚君, 刘欣宇, 陈阳, 王丽梅, 从玉文

  2024, 48(5): 340-346. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.004

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  目的 研究外周血白细胞与血小板计数比值在预测电离辐射诱发胸腺淋巴瘤发生中的价值。方法 采用分次电离辐射建立疾病模型,观察白细胞与血小板计数比值在胸腺淋巴瘤发生发展中的变化情况。将4周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和照射组,照射组小鼠接受每周1次1.8 Gy全身照射,连续照射4周,比较2组小鼠在照射后370 d内的发病率和存活率。濒死动物通过胸腺组织外观形态和HE染色确诊胸腺淋巴瘤;流式细胞术检测濒死动物胸腺、骨髓和脾脏中T细胞的变化;外周血细胞计数了解放射致胸腺淋巴瘤发病过程中外周血变化情况。结果 小鼠分次电离辐射后370 d内胸腺淋巴瘤的发病率为83%,正常对照组小鼠未发生胸腺淋巴瘤（P<0.0001）。组织病理学检查,观察到发病小鼠胸腺组织呈现中等大小的肿瘤细胞。流式细胞分析发现胸腺淋巴瘤小鼠胸腺、骨髓和脾脏中的CD4⁺ T细胞减少,CD8⁺ T细胞增多。外周血象检测显示胸腺淋巴瘤小鼠死亡前1周,其白细胞与血小板计数比值升高（P<0.01）。结论 外周血白细胞与血小板计数比值升高对电离辐射诱发的小鼠胸腺淋巴瘤具有一定的预测作用。
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  论著

  长链非编码RNA MALAT1调控星形胶质细胞增殖和凋亡及对MAPK/ERK1,2信号通路的影响

  胡辉, 王雪, 吴雨涵, 董华丰, 张玲, 韦爱君, 谢方, 赵云, 孙兆炜, 钱令嘉

  2024, 48(5): 347-354. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.005

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  目的 探讨肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）的表达对星形胶质细胞（C8-D1A）增殖和凋亡,以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（ERK1,2）通路的影响。 方法 通过慢病毒载体和质粒载体在C8-D1A细胞中分别敲低及过表达MALAT1基因,用实时荧光定量PCR（qPCR）法检测敲低及过表达效率、细胞增殖相关标志物Ki67、微染色体维持蛋白2（MCM2）、细胞核增殖抗原（PCNA）、凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达变化,CCK-8、流式细胞术检测敲低及过表达MALAT1后对C8-D1A细胞增殖和凋亡的影响。免疫荧光染色法检测Caspase-3和Ki67蛋白表达,Western印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2及ERK1/2、p-ERK1/2、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达变化情况。结果 与对照组相比,过表达MALAT1抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其G₀/G₁期、G₂/M 期比例升高,S期比例降低,Caspase-3蛋白表达升高,p-ERK1/2蛋白表达降低,Ki67、PCNA mRNA表达量降低;而敲低MALAT1后细胞增殖显著增加并抑制细胞凋亡,其S期比例增高、G₂/M 期比例降低,Caspase-3、Bax蛋白表达降低,p-ERK1/2、p-p38MAPK 蛋白表达升高,Ki67、MCM2、PCNA mRNA表达量增加（P<; 0.05）。结论 MALAT1基因可能通过调控MAPK/ERK1,2信号通路进而促进星形胶质细胞凋亡并抑制其增殖。
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  论著

  含溴结构域蛋白2在抗肿瘤免疫调控中的作用及机制研究

  张诚, 李圆圆, 李爱玲, 满江红

  2024, 48(5): 355-361. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.006

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  目的 研究含溴结构域蛋白2（BRD2）在抗肿瘤免疫调控中的作用及机制,探索新的免疫治疗靶点。方法 利用REMBRANDT胶质瘤数据库分析、GlioVis和TIMER网站在线分析,比较BRD2在肿瘤组织与正常组织中表达水平的差异、BRD2的表达水平与多形性胶质母细胞瘤（GBM）患者预后的相关性,并比较其与GBM肿瘤中免疫细胞浸润的相关性。构建靶向BRD2基因的干涉质粒,包装慢病毒并感染小鼠胶质瘤细胞GL261,灭瘟素筛选感染阳性细胞6 d,Western印迹法检测BRD2蛋白表达水平。CellTiter-Glo试剂盒检测敲低BRD2后GL261的细胞活力。将敲低BRD2的GL261细胞移植入C57BL/6J小鼠皮下形成皮下肿瘤,定期测量肿瘤的体积,并在肿瘤接种后第28 天将其取出并分离肿瘤细胞,利用流式细胞术和免疫组化的方法分析皮下瘤组织内CD8⁺T细胞的浸润情况。结果 BRD2在多种肿瘤组织中高表达,高表达BRD2的胶质瘤患者的预后较差,且BRD2表达水平与肿瘤中CD8⁺T细胞浸润呈负相关。敲低BRD2后的GL261细胞形成的小鼠皮下移植瘤生长速度减慢,且皮下瘤组织内CD8⁺T细胞的浸润水平增加。结论 BRD2高表达抑制GBM肿瘤组织内CD8⁺T细胞的浸润并促进肿瘤的生长。
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  论著

  组织蛋白酶B基因敲除抑制布鲁菌胞内感染

  陆菁菁, 许荷玲, 张琦, 黄芳, 李山虎

  2024, 48(5): 362-368. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.007

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  目的 研究组织蛋白酶B（cathepsin B,CTSB）在布鲁菌感染中的作用。方法 利用CRISPR/Cas9技术构建ctsb基因敲除的人宫颈癌HeLa细胞株,并检测ctsb敲除对细胞增殖的影响。通过CCK-8法和胞内菌计数检测布鲁菌感染中ctsb敲除对细胞增殖活性和细菌胞内存活的影响,并通过Western印迹检测揭示ctsb调控布鲁菌感染的分子机制。结果 成功构建了ctsb基因敲除细胞株;CCK-8结果表明敲除ctsb不影响布鲁菌感染前后的细胞增殖率;胞内菌计数结果显示KO细胞感染4 d后胞内布鲁菌数量显著减少;Western印迹检测结果提示KO细胞在布鲁菌长期感染中自噬相关蛋白表达水平显著下调。结论 ctsb基因敲除能够抑制长期感染中布鲁菌的胞内存活,为慢性布鲁菌病的治疗提供了潜在的靶点。
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  论著

  新型自组装抗菌肽CR-16的性质及抑菌活性研究

  崔亚楠, 邹鹏飞, 龚, 伟, 王玉丽, 高春生, 杨阳, 杨美燕

  2024, 48(5): 369-375. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.008

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  目的 研究新型自组装多肽CR-16的性质及其对于大肠杆菌的抑菌活性,为细菌感染的治疗提供实验依据。方法 在抗菌肽BuforinⅡ和LfcinB结构基础上,设计并合成了新型抗菌肽CR-16,采用粒径、电位、透射电镜、X线衍射仪等手段表征该抗菌肽的性质。在测定临界胶束浓度的基础上,采用原子力显微镜、圆二色谱法等对分子的自组装性能进行考察。采用二倍稀释法测定该肽的最小抑菌浓度,并运用透射电子显微镜分析其对细菌外膜的影响。结果 抗菌肽CR-16能够成功自组装,自组装体呈现规则圆球状,性质稳定。抑菌实验表明,CR-16对3种大肠杆菌的生长均有抑制作用。值得重视的是,CR-16对产新德里金属-β-内酰胺酶1（NDM-1）的耐碳青霉烯类大肠杆菌生长有明显抑制作用,显示了其在抗细菌感染及抗耐药菌感染中的良好前景。结论 CR-16抗菌肽可以实现自组装,并且对大肠杆菌具有抑菌活性。
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  论著

  光对秋水仙碱稳定性的影响及光稳定剂筛选

  杨国宝, 董静, 龚伟, 杨美燕, 高春生, 王玉丽, 杨阳

  2024, 48(5): 376-381. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.009

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  目的 提高秋水仙碱（COL）在制剂缓释微丸中的光稳定性。方法 对COL光化降解动力学进行研究,了解其降解规律,通过添加光稳定剂屏蔽光线以抑制COL发生光化降解,并考察了光稳定剂种类、颜色、用量、位置对COL缓释微丸光稳定性的影响。结果 以中间独立层的方式,用载药微丸重量4%的红氧化铁作为保护层制备的缓释微丸光照10 d,COL光化降解产物含量未见增长。结论 COL缓释微丸中使用红氧化铁作为光稳定剂,能够有效避免COL发生光化降解。
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  论著

  基于谱-效关系的强力定眩片舒血管作用药效物质基础研究

  闫平, 王茂宁, 朱君翊, 房盼, 张航, 张彦, 张寒

  2024, 48(5): 382-388. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.010

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  目的 研究强力定眩片高效液相（HPLC）指纹图谱与舒张血管作用药效之间的相关性,明确强力定眩片发挥舒张血管作用的潜在物质基础。方法 采用离体肠系膜上动脉血管环舒张实验,以血管环舒张率为指标评价强力定眩片舒张血管作用,采用灰色关联度和偏最小二乘回归分析（PLSR）进行谱-效关联分析,快速筛选出其药效贡献较大成分。结果 10批强力定眩片的HPLC指纹图谱共标定21个共有峰,相似度均在0.88以上,并指认了其中14个特征峰。离体血管环舒张实验表明,10批样品均有不同程度的舒张血管作用,21个共有色谱峰关联度均大于0.73, PLSR显示11种成分与强力定眩片的舒张血管作用成正相关,其中已知的6个化合物分别为巴利森苷A、巴利森苷C、5-羟甲基糠醛、木犀草素、蒙花苷和川芎嗪。结论 强力定眩片的舒张血管是多种成分共同作用的结果。巴利森苷A、巴利森苷C、5-羟甲基糠醛、木犀草素、蒙花苷和川芎嗪与强力定眩片的舒张血管作用成正相关,可能是强力定眩片降压作用的主要药效物质基础。
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  论著

  一种基于多路纳米孔测序技术的多种血清型沙门菌快速分型方法

  王东帅, 师丹阳, 李君文, 金敏

  2024, 48(5): 389-394. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.011

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  目的 构建基于多路纳米孔测序技术的本地化沙门菌血清型分型方法,评估血清型数量和测序时间对分型结果的影响,为多种血清型沙门菌的同时快速分型提供方法。方法 首先,利用纳米孔测序技术建立多菌株测序方法。其次,基于沙门菌核心基因组数据库构建本地化沙门菌血清型分型流程。最后评估血清型数量和测序时间对分型结果的影响。结果 建立的多种血清型沙门菌分型方法准确率和特异性均可达到100%,且在2 h测序时间内可完成6株以上不同血清型的沙门菌快速准确分型。结论 该方法能够同时对多株血清型沙门菌快速分型,有效提高沙门菌血清型的鉴定效率,为环境水体中沙门菌血清型的快速鉴定提供有力支持。
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  综述

  海军长远航慢性疲劳综合征的研究进展

  班春莉, 蒋蓓尔, 汪若曦, 向钰洁, 何颖

  2024, 48(5): 395-400. https://doi.org/10.7644/j.issn.1674-9960.2024.05.012

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  慢性疲劳综合征（CFS）是一种慢性的、累及多系统的疾病,主要表现为长时间的疲劳,多伴随有躯体化症状,如肌肉疼痛、睡眠障碍等,严重影响患者生活健康。目前CFS病因不明,缺乏特异性有效治疗方案,现有治疗措施大多是对症下药,运用认知行为疗法、营养支持等手段辅助治疗。海军官兵在执行长远航任务时,工作时间长、压力大,长期处于相对封闭的环境,极易产生体力疲劳和脑力疲劳,并进一步发展成CFS。该文综述了海军长远航时CFS的发病原因、诊断现状、治疗与预防方案,为长远航海军官兵健康和作业能力提供有力保障。