论著
赵纪伟, 彭疏篁, 刘涵菲, 王婧, 纪奥强, 陈怡, 张瀚文, 吴俊嶺, 王淑芳, 申星, 余祖胤, 孙刚
目的 探讨环孢素A(CsA)联合放射治疗对胰腺癌细胞增敏作用及其机制。方法 通过网络药理学分析筛选CsA、铁死亡与胰腺癌放疗增敏的共同作用靶点,进行富集分析和分子对接预测。在体外实验中,采用人胰腺癌细胞系BxPC-3和MIA PaCa-2进行研究。细胞分为5组:对照组、CsA组、照射组、CsA+照射组、CsA+照射+铁死亡抑制剂(Fer-1)组。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测CsA对胰腺癌细胞活性的影响,筛选适宜浓度用于后续实验;通过台盼蓝染色实验和集落形成实验评估细胞存活率及增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡;BODIPY 581/591 C11探针检测细胞内脂质过氧化水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹检测长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA和蛋白表达。结果 网络药理学分析预测结果显示,CsA可能通过关键靶点SLC7A11调控铁死亡通路。体外实验结果显示,与对照组比较,CsA处理后,胰腺癌细胞的活力显著降低,且呈浓度依赖性。CsA与放射治疗联合使用时,表现出协同增效作用。与单独照射组比较,CsA联合照射显著抑制细胞活性、降低细胞存活率、减少集落形成,并促进细胞凋亡。这些效果可以通过Fer-1部分逆转。在机制方面,CsA联合照射显著诱导了脂质过氧化,且相较于单独照射组,SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白表达显著下调,而ACSL4的mRNA和蛋白表达则显著上调。Fer-1能够特异性地逆转这些调控效应。结论 CsA通过调控SLC7A11/GPX4/ACSL4信号轴诱导铁死亡,增强胰腺癌细胞的放疗敏感性。