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王鹏军,王宪,杨洋,陈慧,翟华立,詹轶群,杨晓明,于淼
2020, 44(1): 0-0.
[摘要] 目的：通过研究非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠肝脏基因表达谱变化，为NASH发生发展的分子机制以及防治药物研发提供参考。方法：蛋氨酸-胆碱缺乏饲料喂养C57BL/6小鼠构建非酒精性脂肪性肝炎模型，分别于造模0、1、2、3周称量小鼠体重、摘眼球取血、在全自动生化仪上检测血糖、转氨酶、甘油三酯、胆固醇及游离脂肪酸，脱颈处死小鼠后摘取肝脏称重，对肝组织进行HE染色并用称重法检测肝脏甘油三酯。TRIZOL提取造模0周和3周组小鼠肝脏的总RNA并检测基因表达谱变化，对差异基因进行GO分析及real-time PCR验证。结果：与0周小鼠相比，随着MCD饲料喂养时间延长，小鼠体重不断下降、肝脏缩小、转氨酶水平升高、血糖下降、血清甘油三酯和胆固醇略微下降、肝脏中甘油三酯显著增加，HE染色可见MCD喂养第1周时小鼠肝细胞出现水泡变性，MCD2周组小鼠肝细胞发生气球样变，MCD3周组小鼠肝脏存在广泛重度脂肪变性以及坏死肝细胞。基因芯片检测结果显示，MCD喂养3周后导致小鼠肝脏出现8915个差异基因，其中3649个上调基因、5302个下调基因。富集分析结果显示差异基因显著富集在炎症反应、氧化应激、凋亡、胆固醇合成、内质网应激、鞘脂代谢、糖酵解、TGFβ通路、NF-κB通路、以及PPAR通路。RT-PCR实验对炎症、内质网应激以及TGFβ通路基因的变化进行了验证，与芯片结果一致。结论：利用MCD喂养构建小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型成功，与正常小鼠相比，NASH小鼠肝组织大量基因表达水平存在显著差异，特别是炎症、应激等过程及其涉及的通路，可以做为NASH疾病机制探索及药物研发的靶点。
